攜帶hBMP-2的可誘導(dǎo)慢病毒載體轉(zhuǎn)染人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的成骨研究.pdf

1、目的::觀察攜帶骨形態(tài)發(fā)生蛋白2的tet-on慢病毒載體對(duì)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞轉(zhuǎn)染表達(dá)及穩(wěn)定轉(zhuǎn)染后成骨的影響。
　　 方法:取第3代人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞分組培養(yǎng):實(shí)驗(yàn)組穩(wěn)定轉(zhuǎn)染攜帶骨形態(tài)發(fā)生蛋白2的tet-on慢病毒載體,并加入10mg/L,強(qiáng)力霉素;未加強(qiáng)力霉素組:同實(shí)驗(yàn)組但不加強(qiáng)力霉素;空病毒組轉(zhuǎn)染攜帶綠色熒光蛋白的慢病毒載體;空白對(duì)照組未進(jìn)行任何處理。
　　 結(jié)果:①骨形態(tài)發(fā)生蛋白2表達(dá):實(shí)驗(yàn)組、未加強(qiáng)力霉素組均有表達(dá)

2、,且實(shí)驗(yàn)組表達(dá)量高于未加強(qiáng)力霉素組(P＜0.05);空病毒組、空白對(duì)照組未見(jiàn)表達(dá)。②堿性磷酸酶染色:實(shí)驗(yàn)組可見(jiàn)細(xì)胞胞漿中出現(xiàn)大量紅色或紅棕色顆粒,未加強(qiáng)力霉素組可見(jiàn)少量紅色顆粒,實(shí)驗(yàn)組堿性磷酸酶活性高于未加強(qiáng)力霉素組(P＜0.05);空病毒組、空白對(duì)照組未見(jiàn)明顯紅色顆粒。⑨茜素紅染色:實(shí)驗(yàn)組、未加強(qiáng)力霉素組均可見(jiàn)鈣結(jié)節(jié)形成,實(shí)驗(yàn)組較未加強(qiáng)力霉素組礦化結(jié)節(jié)數(shù)量多,面積更大;空病毒組、空白對(duì)照組未見(jiàn)明顯礦化結(jié)節(jié)形成。
　　 結(jié)論:攜