雙室共培養(yǎng)中人羊膜上皮細(xì)胞誘導(dǎo)分化為腺泡細(xì)胞研究.pdf

1、[目的]通過人羊膜上皮細(xì)胞（hAECs）體外誘導(dǎo)分化為腺泡細(xì)胞及人羊膜上皮細(xì)胞移植到受損傷唾液腺組織后的存活情況研究，為唾液腺功能障礙性疾病的細(xì)胞替代治療尋找理想的干細(xì)胞來源。
　　 [方法]①采用機械法和酶消化法從人羊膜組織中分離hAECs，經(jīng)原代培養(yǎng)后用流式細(xì)胞儀（FCM）和免疫細(xì)胞化學(xué)方法進行表型鑒定。②hAECs與SD大鼠唾液腺細(xì)胞用雙室裝置進行共培養(yǎng)。③取誘導(dǎo)1周、2周后的hAECs，用免疫細(xì)胞化學(xué)、熒光實時定量RT-

2、PCR等方法檢測α-淀粉酶及其mRNA的表達。④將BrdU標(biāo)記的hAECs懸液注入SD大鼠損傷下頜下腺組織內(nèi)。
　　 [結(jié)果]①胰蛋白酶消化法能有效從人羊膜中分離hAECs，檢測結(jié)果顯示hAECs表達CD29和CK19陽性；CD44和α-淀粉酶弱陽性。②在誘導(dǎo)后2周內(nèi)，hAECs中α-淀粉酶mRNA的表達量隨時間延長而增加。③免疫組化結(jié)果顯示，細(xì)胞移植后第4、7、14天組織切片均可見BrdU染色陽性細(xì)胞。
　　 [結(jié)論]