組織蛋白酶B和趨化因子受體4在甲狀腺乳頭狀癌中的表達及意義.pdf

1、目的:甲狀腺癌是內(nèi)分泌腫瘤中最常見的惡性腫瘤,占內(nèi)分泌惡性腫瘤的91.5％,約占全身惡性腫瘤的1%,近年來其發(fā)病率呈上升趨勢。按腫瘤的病理分型,甲狀腺癌可分為乳頭狀癌、濾泡狀癌、未分化癌、髓樣癌。其中甲狀腺乳頭狀癌最常見,此類型甲狀腺癌局部淋巴結轉(zhuǎn)移率高,少數(shù)可發(fā)生血行轉(zhuǎn)移.因此充分利用現(xiàn)代免疫學和分子生物學理論和技術探索甲狀腺乳頭狀癌侵襲轉(zhuǎn)移的規(guī)律十分必要,并可為臨床診治提供可靠依據(jù)。組織蛋白酶B(cathepsin B,CB)是一種

2、蛋白水解酶,對多種植物蛋白(大豆、玉米、棉籽蛋白等)和動物蛋白(血紅蛋白、血清蛋白、卵黃磷蛋白、明膠等)都有水解活性。體外實驗發(fā)現(xiàn)CB可以降解纖連蛋白、Ⅰ型膠原蛋白、Ⅳ型膠原蛋白和層粘連蛋白等細胞外基質(zhì)成分,還可以激活尿激酶型纖溶蛋白酶原激活劑、基質(zhì)金屬蛋白酶等。腫瘤細胞侵襲轉(zhuǎn)移又必須降解細胞外基質(zhì),因此認為CB在腫瘤侵襲和遠處轉(zhuǎn)移的過程中起重要作用。趨化因子受體4(CXC chemokine receptor4,CXCR4)屬于G蛋白

3、偶聯(lián)受體超家族成員,是一類以基質(zhì)細胞衍生因子1(SDF-1)為結合配體的趨化因子受體。近年來研究指出,趨化因子SDF-1與其特異性受體CXCR4所構成的CXCR4/SDF-1生物學軸(CXCR4/SDF-1 biological axis)在多種腫瘤的播散和器官特異性轉(zhuǎn)移中發(fā)揮著重要的作用。因此提出了腫瘤細胞依靠趨化因子實現(xiàn)器官特異性轉(zhuǎn)移的理論模型:腫瘤細胞高表達特異的趨化因子受體,而有些腫瘤轉(zhuǎn)移的靶器官高表達其相應的趨化因子配體,腫瘤

4、細胞藉趨化因子與其受體的特異性結合力,完成向這些器官的特異性轉(zhuǎn)移。目前組織蛋白酶B在甲狀腺乳頭狀癌中的表達及與甲狀腺乳頭狀癌侵襲轉(zhuǎn)移的關系及組織蛋白酶B與趨化因子受體4在甲狀腺乳頭狀癌侵襲轉(zhuǎn)移中的相互關系國內(nèi)尚未見報道。本課題采用免疫組織化學SP法和RT-PCR的方法檢測組織蛋白酶B、趨化因子受體4在甲狀腺乳頭狀癌、腺瘤旁正常甲狀腺組織中表達情況,探討CB和CXCR4在甲狀腺乳頭狀癌侵襲轉(zhuǎn)移中的作用及兩者在在甲狀腺乳頭狀癌侵襲轉(zhuǎn)移中的相

5、互關系,為臨床治療甲狀腺乳頭狀癌提供理論依據(jù)。
　　方法:1.40例甲狀腺乳頭狀癌(papillary thyroid carcinomas,PTC)取自2005年1月至2007年12月鄭州大學第一附屬醫(yī)院甲狀腺外科手術切除標本,并經(jīng)由有經(jīng)驗的病理科醫(yī)生病理確診。所選病例術前未經(jīng)任何治療。標本均在手術切除后一部分放入液氮保存用于提取RNA,一部分甲醛固定、脫水、透明、包埋,用于免疫組織化學檢測。另取10例腺瘤旁正常甲狀腺組織為對照

6、。2.采用免疫組織化學SP法和RT-PCR的方法檢測組織蛋白酶B、趨化因子受體4在甲狀腺乳頭狀癌、腺瘤旁正常甲狀腺組織中表達情況。3.采用SPSS10.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析。兩樣本率的比較采用四格表資料的x~2檢驗,兩等級變量的相關分析采用spearman秩相關分析。以P<0.05為差異顯著性的標準。
　　結果:1.組織蛋白酶B蛋白陽性信號定位于胞漿中,為棕黃色顆粒。在正常甲狀腺組織中不表達,在甲狀腺乳頭狀癌中的陽性表達率為65

7、%(26/40)。甲狀腺乳頭狀癌中組織蛋白酶B蛋白的陽性表達率明顯高于正常甲狀腺組織,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05);組織蛋白酶B mRNA在正常甲狀腺組織中表達率為0,在甲狀腺乳頭狀癌中的陽性表達率為82.5%(33/40)。甲狀腺乳頭狀癌中組織蛋白酶B mRNA的陽性表達率明顯高于正常甲狀腺組織(P<0.05)。組織蛋白酶B蛋白和mRNA在甲狀腺乳頭狀癌中的表達與患者的性別、年齡和腫瘤直徑之間的關系經(jīng)檢驗無顯著性差異(P>0.0

8、5),與浸潤程度、淋巴結轉(zhuǎn)移之間的關系經(jīng)檢驗存在顯著性差異(P<0.05)。浸潤被膜、有淋巴結轉(zhuǎn)移患者組織蛋白酶B蛋白和mRNA的陽性表達率明顯高于未浸潤被膜、無淋巴結轉(zhuǎn)移。2.趨化因子受體4蛋白陽性信號定位于胞漿中,為棕黃色顆粒。在正常甲狀腺組織中不表達,在甲狀腺乳頭狀癌中的陽性表達率為60%(24/40)。甲狀腺乳頭狀癌中趨化因子受體4蛋白的陽性表達率明顯高于正常甲狀腺組織,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05);趨化因子受體4mRNA

9、在正常甲狀腺組織中表達率為0,在甲狀腺乳頭狀癌中的陽性表達率為80%(32/40)。甲狀腺乳頭狀癌中趨化因子受體4mRNA的陽性表達率明顯高于正常甲狀腺組織(P<0.05)。組趨化因子受體4蛋白和mRNA在甲狀腺乳頭狀癌中的表達與患者的性別、年齡和腫瘤直徑之間的關系經(jīng)檢驗無顯著性差異(P>0.05),與浸潤程度、淋巴結轉(zhuǎn)移之間的關系經(jīng)檢驗存在顯著性差異(P<0.05)。浸潤被膜、有淋巴結轉(zhuǎn)移患者趨化因子受體4蛋白和mRNA的陽性表達率明

10、顯高于未浸潤被膜、無淋巴結轉(zhuǎn)移。3.在本組40例甲狀腺乳頭狀癌中,組織蛋白酶B蛋白和趨化因子受體4蛋白經(jīng)統(tǒng)計學檢驗兩者呈明顯正相關(P<0.05)。4.應用spearman相關分析發(fā)現(xiàn),CB、CXCR4 mRNA表達與蛋白表達之間呈顯著相關。在相同組別CB、CXCR4 mRNA表達率高于蛋白表達率,并且隨著CB、CXCR4 mRNA表達增加,其蛋白表達也相應增加。
　　結論:1.組織蛋白酶B在正常甲狀腺組織中不表達,在甲狀腺乳頭狀

11、癌組織中高表達,其表達與甲狀腺乳頭狀癌的浸潤程度、淋巴結轉(zhuǎn)移有關;提示組織蛋白酶B與甲狀腺乳頭狀癌的侵襲轉(zhuǎn)移有關。2.趨化因子受體4在正常甲狀腺組織中不表達,在甲狀腺乳頭狀癌組織中高表達,其表達與甲狀腺乳頭狀癌的浸潤程度、淋巴結轉(zhuǎn)移有關:提示趨化因子受體4與甲狀腺乳頭狀癌的侵襲轉(zhuǎn)移有關。3.組織蛋白酶B和趨化因子受體4蛋白在甲狀腺乳頭狀癌中表達的相關性提示,組織蛋白酶B和趨化因子受體4蛋白的異常表達在甲狀腺乳頭狀癌侵襲轉(zhuǎn)移過程中可能具有