蘋果果生刺盤孢轉(zhuǎn)錄因子PacC對pH適應(yīng)性和致病過程中的功能.pdf_第1頁
已閱讀1頁,還剩52頁未讀, 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡介

1、果生刺盤孢(Colletotrichum fructicola)是蘋果炭疽葉枯病(Glomerella leaf spot)的主要病原。蘋果炭疽葉枯病是近幾年我國蘋果生產(chǎn)中出現(xiàn)的流行性很強(qiáng)的病害,危害葉片和果實(shí),引起葉斑、葉片干枯脫落、采前大量落果等癥狀,對蘋果產(chǎn)量和品質(zhì)威脅很大,造成嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失。
  為了能在各種復(fù)雜的pH條件下生存,真菌形成適應(yīng)外部pH值的機(jī)制。轉(zhuǎn)錄因子PacC在真菌pH信號通路中處于核心位置,也是很多真菌的

2、毒力因子。該因子在不同pH下激活或者抑制一些基因的轉(zhuǎn)錄。由于在幼果期果實(shí)酸度較高,苦腐病侵染果實(shí)后處于潛伏侵染狀態(tài),而果生刺盤孢在幼果期能夠引起典型斑點(diǎn)癥狀,這種特性是否與其對pH的適應(yīng)或調(diào)節(jié)能力有關(guān),目前還不清楚。本研究針對果生刺盤孢利用基因敲除策略,開展了PacC基因與生長、產(chǎn)孢、致病及pH適應(yīng)性關(guān)系研究,以期為該菌的致病機(jī)制及進(jìn)一步的防治提供理論依據(jù),取得以下主要結(jié)果。
  1)本研究采用split PCR技術(shù)構(gòu)建了含有潮霉

3、素(hph)的基因敲除盒,通過PEG介導(dǎo)的原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化,獲得了抗潮霉素的轉(zhuǎn)化子,利用PCR檢測,鑒定出4個(gè)PacC的敲除突變體。
  2)對突變體與野生型在生物學(xué)特性和致病力上差異進(jìn)行分析,結(jié)果顯示,在PDA上突變體生長速率明顯下降,分生孢子萌發(fā)率和附著胞形成率明顯下降,說明該基因?qū)ζ浞稚咦用劝l(fā)、附著胞形成和生長速率具有較大影響。對嘎拉葉片進(jìn)行有傷和無傷接種,結(jié)果均顯示突變體病斑面積要顯著小于野生型,說明PacC基因影響果生刺盤

4、孢侵入葉片和菌絲在葉片中的擴(kuò)展。對嘎拉果實(shí)進(jìn)行無傷接種,結(jié)果顯示突變體不發(fā)病野生型發(fā)病,說明PacC基因影響果生刺盤孢侵入果實(shí)。有傷接種結(jié)果顯示突變體和野生型差異不顯著,有待進(jìn)一步研究菌絲在蘋果組織中的擴(kuò)展。接種結(jié)果表明PacC基因影響果生刺盤孢致病力。通過構(gòu)建互補(bǔ)載體,獲得PacC的互補(bǔ)轉(zhuǎn)化子,G418和PCR檢測出陽性互補(bǔ)轉(zhuǎn)化子,對其進(jìn)行上述表型觀察和致病力檢測。發(fā)現(xiàn)互補(bǔ)轉(zhuǎn)化子在菌落形態(tài)和生長速率、孢子萌發(fā)率、附著胞形成率和對嘎拉葉

5、片的致病力均能恢復(fù)到野生型狀態(tài),表明敲除突變體的生物學(xué)變化和致病力變化確實(shí)是由于PacC基因的缺失引起。
  3)在不同pH的培養(yǎng)基培養(yǎng),結(jié)果顯示在pH3時(shí),突變體和野生型生長差異不顯著,在pH4至pH6,突變體比野生型生長速率顯著變慢,且隨著pH增加,突變體與野生型生長速率差值越來越大,表明PacC在酸性條件下可以促進(jìn)果生刺盤孢的生長;在pH8培養(yǎng)基上,突變體菌落生長明顯變慢;在pH9時(shí),突變體不能生長,而野生型雖受到抑制,仍能

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論