表皮葡萄球菌中纖維蛋白原結(jié)合基因的研究.pdf

1、表皮葡萄球菌(以下簡(jiǎn)稱(chēng)表葡菌)是人體皮膚和粘膜上定居的正常菌群之一,通常情況下致病力很低.然而十余年來(lái),隨著留置靜脈導(dǎo)管等醫(yī)療裝置應(yīng)用和侵入性操作的增多,該菌已成為醫(yī)院感染的重要病原菌.尤其是在異物植入相關(guān)性感染如留置靜脈導(dǎo)管、腦脊液分流、人工骨關(guān)節(jié)置換和心臟瓣膜置換術(shù)后等引起的感染中,表葡菌已經(jīng)成為最常見(jiàn)的病原菌.近年來(lái)已發(fā)現(xiàn)表葡菌致病力的強(qiáng)弱與其進(jìn)入人體后對(duì)組織或異物的粘附力密切有關(guān),該類(lèi)細(xì)菌進(jìn)入人體后先定植并分泌大量粘液,形成粘液

2、層,此粘液層保護(hù)細(xì)菌不受抗菌藥物的作用,并降低細(xì)胞的吞噬功能,減弱補(bǔ)體的調(diào)理功能,致使表葡菌感染難以治愈.近期國(guó)外在表葡菌中發(fā)現(xiàn)了一個(gè)新的基因,該基因與纖維蛋白原的結(jié)合密切相關(guān),被稱(chēng)為纖維蛋白原結(jié)合基因(The gene for fibrinogen-binding protein,fbe基因),它編碼一種和纖維蛋白原結(jié)合的蛋白質(zhì),含有該基因的菌株體外粘附能力強(qiáng).然而該基因在表葡菌感染發(fā)病機(jī)制中的作用并不清楚.當(dāng)前發(fā)達(dá)國(guó)家都在積極利用分

3、子生物學(xué)技術(shù)對(duì)病原微生物的基因組進(jìn)行測(cè)序,而對(duì)基因功能的研究相對(duì)滯后,對(duì)該基因致病功能的研究亦未見(jiàn)報(bào)道,據(jù)推測(cè)該基因在表葡菌的定植、粘附等過(guò)程中可能起重要作用.如能闡明fbe基因在表葡菌感染中的致病功能及其作用方式將對(duì)控制表葡菌感染具有重要意義.基于上述情況,該研究將對(duì)表葡菌fbe基因在致感染中的作用進(jìn)行研究,通過(guò)基因插入滅活技術(shù)破壞fbe基因,獲得fbe基因缺失型菌株,并對(duì)原始菌株和人工變異菌株的fbe基因的mRNA轉(zhuǎn)錄水平和體外與纖

4、維蛋白原(Fg)的的結(jié)合能力進(jìn)行測(cè)定比較,有望初步闡明fbe基因在表葡菌致異物感染中可能是重要的因素之一,可能發(fā)現(xiàn)預(yù)防及治療表葡菌感染的重要線索.1.表葡菌fbe基因的檢測(cè)和測(cè)序.收集101株表葡菌臨床分離株和34株其他類(lèi)型葡萄球菌(包括金黃色葡萄球菌、溶血葡萄球菌、人葡萄球菌等)以及54株正常人表皮寄殖株,通過(guò)聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)檢測(cè)葡萄球菌中fbe基因的檢出率及其分布并比較.2.表葡菌fbe基因功能的研究.為闡明fbe基因在表葡菌