表皮葡萄球菌中纖維蛋白原結(jié)合基因的研究.pdf

1、表皮葡萄球菌(以下簡稱表葡菌)是人體皮膚和粘膜上定居的正常菌群之一,通常情況下致病力很低.然而十余年來,隨著留置靜脈導(dǎo)管等醫(yī)療裝置應(yīng)用和侵入性操作的增多,該菌已成為醫(yī)院感染的重要病原菌.尤其是在異物植入相關(guān)性感染如留置靜脈導(dǎo)管、腦脊液分流、人工骨關(guān)節(jié)置換和心臟瓣膜置換術(shù)后等引起的感染中,表葡菌已經(jīng)成為最常見的病原菌.近年來已發(fā)現(xiàn)表葡菌致病力的強弱與其進(jìn)入人體后對組織或異物的粘附力密切有關(guān),該類細(xì)菌進(jìn)入人體后先定植并分泌大量粘液,形成粘液

2、層,此粘液層保護(hù)細(xì)菌不受抗菌藥物的作用,并降低細(xì)胞的吞噬功能,減弱補體的調(diào)理功能,致使表葡菌感染難以治愈.近期國外在表葡菌中發(fā)現(xiàn)了一個新的基因,該基因與纖維蛋白原的結(jié)合密切相關(guān),被稱為纖維蛋白原結(jié)合基因(The gene for fibrinogen-binding protein,fbe基因),它編碼一種和纖維蛋白原結(jié)合的蛋白質(zhì),含有該基因的菌株體外粘附能力強.然而該基因在表葡菌感染發(fā)病機(jī)制中的作用并不清楚.當(dāng)前發(fā)達(dá)國家都在積極利用分

3、子生物學(xué)技術(shù)對病原微生物的基因組進(jìn)行測序,而對基因功能的研究相對滯后,對該基因致病功能的研究亦未見報道,據(jù)推測該基因在表葡菌的定植、粘附等過程中可能起重要作用.如能闡明fbe基因在表葡菌感染中的致病功能及其作用方式將對控制表葡菌感染具有重要意義.基于上述情況,該研究將對表葡菌fbe基因在致感染中的作用進(jìn)行研究,通過基因插入滅活技術(shù)破壞fbe基因,獲得fbe基因缺失型菌株,并對原始菌株和人工變異菌株的fbe基因的mRNA轉(zhuǎn)錄水平和體外與纖

4、維蛋白原(Fg)的的結(jié)合能力進(jìn)行測定比較,有望初步闡明fbe基因在表葡菌致異物感染中可能是重要的因素之一,可能發(fā)現(xiàn)預(yù)防及治療表葡菌感染的重要線索.1.表葡菌fbe基因的檢測和測序.收集101株表葡菌臨床分離株和34株其他類型葡萄球菌(包括金黃色葡萄球菌、溶血葡萄球菌、人葡萄球菌等)以及54株正常人表皮寄殖株,通過聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)檢測葡萄球菌中fbe基因的檢出率及其分布并比較.2.表葡菌fbe基因功能的研究.為闡明fbe基因在表葡菌