聚乙二醇TGF-β1緩釋微球復(fù)合去細(xì)胞瓣支架的研究.pdf

1、本研究包括兩部分：
　　 第一部分：制備聚乙二醇TGF-β1緩釋微球去細(xì)胞瓣復(fù)合支架
　　 目的：制備聚乙二醇TGF-β1緩釋微球去細(xì)胞瓣復(fù)合支架，并研究其相關(guān)生物學(xué)性能。
　　 方法：采用乳化交聯(lián)法制備PEG 微球，掃描電鏡觀察其形貌及粒徑。酶+去污劑法制備去細(xì)胞瓣膜，利用交聯(lián)劑EDC 將PEG 微球與去細(xì)胞瓣膜偶聯(lián)，通過PEG 微球的溶脹物理吸附TGF-β1，制備復(fù)合支架。ELISA 動態(tài)檢測復(fù)合支架的緩釋效

2、果，作HE染色和電鏡掃描觀察，以及羥脯氨酸含量、DNA 含量、瓣葉生物力學(xué)檢測。
　　 結(jié)果：PEG 微球形態(tài)好，粒徑為(42.72+3.48)nm。復(fù)合支架在緩釋實驗的前12h內(nèi)釋放TGF-β1速度較快，隨后釋放趨于平穩(wěn),7d 內(nèi)TGF-β1累積釋放率為67.22[％]，PEG 微球的TGF-β1包封率為82.01[％]。與單純?nèi)ゼ?xì)胞瓣膜比較，復(fù)合支架羥脯氨酸含量和DNA 含量無顯著變化，形態(tài)學(xué)檢測顯示復(fù)合支架細(xì)胞外基質(zhì)聯(lián)合緊

3、密，膠原纖維結(jié)構(gòu)緊湊，且瓣葉生物力學(xué)性能提高。
　　 結(jié)論：制備PEG-TGF-β1緩釋微球去細(xì)胞瓣復(fù)合支架，在不改變?nèi)ゼ?xì)胞瓣膜支架基本性能基礎(chǔ)上，賦予支架載藥緩釋能力，提高外源性生物因子的生物利用度，且通過兩種材料的復(fù)合可以適當(dāng)提高支架的生物力學(xué)性能。
　　 第二部分：體外構(gòu)建聚乙二醇TGF-β1緩釋微球去細(xì)胞瓣組織工程心臟瓣膜
　　 目的：體外構(gòu)建聚乙二醇TGF-β1緩釋微球去細(xì)胞瓣組織工程心臟瓣膜，并研究其

4、相關(guān)生物學(xué)性能。
　　 方法：采用組織塊培養(yǎng)法，分離擴(kuò)增鼠肌成纖維細(xì)胞。然后在復(fù)合支架表面種植大鼠肌成纖維細(xì)胞，體外構(gòu)建TEHV。體外培養(yǎng)7天后取瓣葉，作HE 染色和電鏡掃描觀察，以及羥脯氨酸含量、DNA 含量、瓣葉生物力學(xué)檢測。
　　 結(jié)果：種植細(xì)胞體外培養(yǎng)7天后，復(fù)合支架細(xì)胞緊密聯(lián)合且細(xì)胞外基質(zhì)更豐富，羥脯氨酸含量和DNA 含量增高，生物力學(xué)性能提高。
　　 結(jié)論：采用PEG-TGF-β1緩釋微球去細(xì)胞瓣復(fù)合