中西醫(yī)結(jié)合治療對重癥急性胰腺炎SIRS時腹腔pMΦ表面CD50表達的影響.pdf

1、背景和目的：急性胰腺炎（acute pancreatitis，AP）是一種外科常見疾病，臨床病理變化復雜，對治療的反應也各不相同，輕型水腫型胰腺炎是一種自限性疾病，對治療反應好，多數(shù)預后較好，而重癥急性胰腺炎（severe acute pancreatitis，SAP）起病急、進展快，早期即可發(fā)生全身炎癥反應綜合征（systemic inflammatory response syndrome，SIRS），雖然對SAP的治療有了長足發(fā)展

2、，但死亡率仍高達10～30%。SIRS被認為是導致患者死亡的主要原因。大量的研究已經(jīng)證實SIRS時巨噬細胞清除凋亡中性粒細胞的吞噬能力下降，導致大量炎癥介質(zhì)釋放加重了全身炎癥反應。巨噬細胞膜上的CD50分子在巨噬細胞清除凋亡中性粒細胞過程中起著重要的調(diào)節(jié)作用，為巨噬細胞識別、清除凋亡中性粒細胞奠定基礎。因此，研究SAP誘發(fā)的SIRS時巨噬細胞CD50的表達以及不同治療對其表達的影響，對治療SAP誘發(fā)的SIRS以及降低SAP的死亡率有重要

3、意義。本實驗旨在研究在SAP導致SIRS的大鼠模型中，應用中藥茵陳承氣湯、地塞米松及兩者聯(lián)合用藥對腹腔巨噬細胞CD50蛋白表達水平的影響。 方法：開腹經(jīng)十二指腸乳頭將1.5%去氧膽酸鈉溶液逆行注入胰管制備大鼠SAP/SIRS（SAP/SIRS）的模型。75只SD大鼠隨機分為假手術(shù)組（SO）、重癥急性胰腺炎SIRS組、茵陳承氣湯（YCCQT）治療組、地塞米松（DEX）治療組、中西醫(yī)結(jié)合（ZXY）治療組，茵陳承氣湯治療劑量為1ml/

4、100g（灌胃），地塞米松治療劑量為1mg/100g（腹腔內(nèi)注射），各治療組于造模后2小時和造模后12小時再次給藥。造模24h后采集標本進行各項指標檢測。 光鏡下觀察各組胰腺標本病理改變，進行病理學評分；應用流式細胞技術(shù)檢測各組腹腔巨噬細胞CD50陽性率：應用western blotting技術(shù)檢測各組腹腔巨噬細胞CD50蛋白表達水平的差異；應用免疫熒光技術(shù)檢測各組腹腔巨噬細胞CD50蛋白水平的差異。 結(jié)果： 1

5、.各組大鼠胰腺標本病理改變：SI組與SO組比較，SI組病理改變明顯（水腫：3.50±0.21 vs 0.290±0.05、炎癥：2.90±0.15 vs 0、出血：2.10±0.18 vs 0、壞死：2.80±0.24 vs 0，P<0.01）；各治療組與SI組比較，均可見不同程度的改善，且具有統(tǒng)計學意義（P<0.05），尤以ZX組與SI組比較差異最顯著（水腫：3.00±0.14 vs3.50±0.21，P<0.05、炎癥：1.40±0

6、.23 vs 2.90±0.15、出血：0.40±0.15 vs 2.10±0.18、壞死：1.40±0.12 vs 2.80±0.24，P<0.01）。 2.流式細胞儀檢測各組大鼠巨噬細胞CD50表達陽性率： （1）與SO組比較，SI組巨噬細胞CD50陽性率明顯下降，具有統(tǒng)計學意義（12.32±8.82% vs 36.52±12.61%，P<0.01）。 （2）與SI組比較，YC組巨噬細胞CD50陽性率略有增加

7、（12.47±4.36% vs 12.32±8.82%，P<0.05），DE組巨噬細胞CD50陽性率明顯增加（26.98±3.72% vs 12.32±8.82%，P<0.05），ZX組巨噬細胞CD50陽性率明顯增加（35.35±5.74% vs 12.32±8.82%，P<0.01）； （3）各治療組間比較：ZX組與YC組、DE組比較，巨噬細胞CD50陽性率明顯增加（35.35±5.74% vs 12.47±4.36% vs

8、26.98±3.72%，P<0.05）。 3.Western Blotting檢測各組大鼠巨噬細胞CD50蛋白表達的比較： （1）與SO組比較，SI組巨噬細胞CD50的表達有顯著性差異（0.47±0.09 vs 0.76±0.15，P<0.01）。 （2）與SI組比較：YC組巨噬細胞CD50的表達水平有顯著性差異（0.47±0.09 vs0.55±0，08，P<0.05），DE組巨噬細胞CD50的表達水平有顯著性

9、差異（0.47±0.09 vs0.56±0.11，P<0.05），而ZX組巨噬細胞CD50的表達有顯著性差異（0.47±0.09 vs 0.71±0，13，P<0.01）。 （3）各治療組間比較：ZX組與DE組、YC組比較，巨噬細胞CD50的水平表達有顯著性差異（0.71±0.13 vs 0.56±0.11，0.71±0.13 vs 0.55±0，08，P<0.05）；DE組與YC組比較，巨噬細胞CD50的表達顯著性差異（0.5

10、6±0.11 vs 0.55±0.08，P<0.05）。 4.免疫熒光技術(shù)檢測各組大鼠巨噬細胞CD50蛋白表達的AU值比較： （1）與SO組比較，SI組巨噬細胞CD50的表達有顯著性差異（235.44±21.35 vs354.72±28.46，P<0.01）。 （2）與SI組比較：DE組巨噬細胞CD50的表達水平有顯著性差異（235.44±21.35 vs 275.43±30.27，P<0.05），YC組巨噬細胞

11、CD50的表達水平有差異（235.44±21.35 vs 267.39±25.36，P<0.05），而ZX組巨噬細胞CD50的表達有顯著性差異（235.44±21.35 vs 305，52±31.14，P<0.01）。 （3）各治療組間比較：ZX組與YC組、DE組比較，巨噬細胞CD50的水平表達有顯著性差異（305.52±31.14 vs 267.39±25.36，305.52±31.14 vs 275.43±30.27，P<0

12、.05）； DE組與YC組比較，巨噬細胞CD50的表達存在差異（275.43±30.27 vs267.39±25.36，P<0.05）。 結(jié)論：與SO組比較，SI組大鼠胰腺病理改變較嚴重，各治療組均有不同程度的改善，尤以ZX組效果最明顯，說明單獨應用中藥茵陳承氣湯或單獨應用西藥地塞米松對大鼠胰腺病理性改變效果不如中西藥聯(lián)合應用顯著。SI組巨噬細胞CD50的表達水平明顯下降，各治療組均有不同程度提高，其中中西醫(yī)結(jié)合治療對巨噬細胞的