滋補脾陰方藥對谷氨酸損傷神經(jīng)元中樹突棘的保護作用及機制研究.pdf

1、本實驗目的：觀察滋補脾陰方藥預處理對于谷氨酸引起的原代培養(yǎng)的大鼠海馬神經(jīng)元樹突棘形態(tài)結(jié)構(gòu)損傷的保護作用，探討滋補脾陰方藥對于樹突棘內(nèi)與其形態(tài)結(jié)構(gòu)穩(wěn)定密切相關的SNK-SPAR途徑的調(diào)節(jié)作用，從而深入探討其相應的神經(jīng)保護作用及其與樹突棘形態(tài)調(diào)節(jié)之間的相關分子機制。 研究方法：將增強的綠色熒光蛋白表達載體(pEGFP-N2)通過陽離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法轉(zhuǎn)染至原代培養(yǎng)的大鼠海馬神經(jīng)元內(nèi)，用谷氨酸處理細胞，通過熒光顯微鏡觀察樹突棘的形態(tài)結(jié)構(gòu)的

2、變化情況；免疫熒光細胞化學方法觀察與樹突棘形態(tài)相關的分子SNK、SPAR在谷氨酸處理后的表達變化情況，并觀察在使用滋補脾陰方藥含藥血清預處理后對SPAR和SNK表達變化的調(diào)節(jié)作用。 研究結(jié)果：谷氨酸對原代培養(yǎng)的海馬神經(jīng)元的樹突棘結(jié)構(gòu)有明顯的損傷作用：表現(xiàn)在樹突干斷裂，樹突棘呈靜脈曲張樣改變，樹突棘結(jié)構(gòu)的退化、消失等；谷氨酸可以引起血清誘導激酶SNK蛋白表達上調(diào)，并引起樹突棘內(nèi)肌動蛋白調(diào)節(jié)蛋白SPAR蛋白表達下調(diào)并在細胞內(nèi)重新分布

3、，滋補脾陰方藥含藥血清預處理能夠明顯抑制SNK和SPAR的蛋白表達變化，改善谷氨酸對樹突棘結(jié)構(gòu)的損傷情況。 研究結(jié)論： 1.谷氨酸對原代培養(yǎng)海馬神經(jīng)元樹突棘的損傷機制可能在于調(diào)節(jié)突觸后與樹突棘結(jié)構(gòu)穩(wěn)定密切相關的SNK-SPAR途徑； 2.谷氨酸對原代培養(yǎng)的海馬神經(jīng)元樹突棘的損傷可能與谷氨酸引起SPAR在細胞內(nèi)的重新分布有關； 3.滋補脾陰方藥具有顯著的神經(jīng)保護作用，其神經(jīng)保護作用的實現(xiàn)與維持樹突棘正常的形