射頻消融治療脾功能亢進(jìn)癥對(duì)機(jī)體免疫功能影響的研究.pdf

1、一、背景 脾功能亢進(jìn)癥(hypersplenism)是由某些病因引起的脾臟病理性功能增加，循環(huán)血液中有形成分不同程度減少的一組癥候群。在1952年King提出“脾切除術(shù)后兇險(xiǎn)性感染(overwhelmingpost-splenectomyinfection，OPSI)”以前，人們對(duì)脾臟的認(rèn)識(shí)局限在“切除脾臟可治療某些脾臟疾病而對(duì)機(jī)體無明顯損害”的水平。因此對(duì)于脾亢的治療也只是單一的脾切除術(shù)。OPSI的提出引起人們對(duì)脾臟功能的廣泛

2、重視。經(jīng)過幾十年的研究發(fā)現(xiàn)脾臟雖不是維持生命所必須的器官，但是具有重要的抗感染、抗腫瘤等功能。隨著對(duì)脾臟功能認(rèn)識(shí)的不斷提高和手術(shù)技術(shù)的不斷完善，各種保留脾臟的手術(shù)和方法應(yīng)運(yùn)而生。而現(xiàn)在的各種脾臟保留性手術(shù)均有其局限性和不良反應(yīng)[1]。尋找更安全、更有效、微創(chuàng)的保脾手術(shù)方法是目前脾臟外科面臨的重要課題。我們?cè)趧?dòng)物實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上首次將射頻消融術(shù)(radiofrequencyablation，RFA)應(yīng)用于脾亢的治療，在臨床上取得了較好的療效[

3、2]。但是作為一種新的脾保留性手術(shù)，RFA治療脾亢究竟對(duì)機(jī)體的免疫功能產(chǎn)生何種影響?其遠(yuǎn)期療效如何?國內(nèi)外無相關(guān)資料可以借鑒。 二、研究目的 本研究通過對(duì)RFA治療組(實(shí)驗(yàn)組)和脾切除組(對(duì)照組)進(jìn)行臨床對(duì)比研究，評(píng)價(jià)兩組間免疫功能的差別，探索RFA治療脾亢后機(jī)體免疫功能的改變，為臨床開展此種脾保留性手術(shù)提供一些實(shí)驗(yàn)依據(jù)；并繼續(xù)收集RFA治療脾功能亢進(jìn)癥的臨床資料，進(jìn)行分析研究，為進(jìn)一步改善其臨床應(yīng)用提供依據(jù)。

4、三、實(shí)驗(yàn)方法和結(jié)果 1.使用隨機(jī)分組的方法將符合納入標(biāo)準(zhǔn)的患者分為實(shí)驗(yàn)組(17例)和對(duì)照組(16例)。兩組術(shù)前和術(shù)后一周、一月及半年采靜脈血檢測(cè)機(jī)體免疫功能指標(biāo)：使用檢驗(yàn)科全自動(dòng)生化分析儀及免疫分析儀檢測(cè)血清免疫球蛋白及補(bǔ)體含量；使用液相競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)定血清腫瘤壞死因子(Tumournecroticfactor,TNF)含量；使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)外周血T淋巴細(xì)胞亞群比值；使用LDH釋放法測(cè)定NK細(xì)胞活性；使用植物血凝素體外刺激法測(cè)定淋巴

5、細(xì)胞轉(zhuǎn)化率。結(jié)果表明：在體液免疫方面，實(shí)驗(yàn)組由于保留了部分脾臟組織，各項(xiàng)體液免疫指標(biāo)術(shù)后各時(shí)相與術(shù)前相比無明顯差別；對(duì)照組血清補(bǔ)體含量與術(shù)前相比無明顯差別，而術(shù)后血清IgM下降明顯(P＜0.01)，血清TNF、IgA、IgG雖有下降趨勢(shì)但是無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，反映出切除脾臟后機(jī)體體液免疫系統(tǒng)儲(chǔ)備功能不足。細(xì)胞免疫方面，實(shí)驗(yàn)組手術(shù)前后NK細(xì)胞活性無明顯變化，淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率在術(shù)后短期內(nèi)下降明顯(P＜0.01)，但在術(shù)后半年恢復(fù)至術(shù)

6、前水平。對(duì)照組NK細(xì)胞活性和淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率在術(shù)后均下降明顯(P＜0.05)。實(shí)驗(yàn)組術(shù)后一周與術(shù)前比較，CD4+T細(xì)胞及CD4+/CD8比值雖有下降但是無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)，而且隨著時(shí)間的延長呈上升趨勢(shì)，其中CD4+/CD8+比值在術(shù)后6月恢復(fù)至術(shù)前水平。實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組的CD8+T細(xì)胞在術(shù)前術(shù)后均無明顯變化。對(duì)照組術(shù)后CD4+及CD4+/CD8+等指標(biāo)較術(shù)前有顯著降低(P＜0.01)。反映出切除脾臟對(duì)機(jī)體細(xì)胞免疫功能的影響較體液免

7、疫更為明顯。 2.Tuftsin又名血清促吞噬素，研究表明它是一種人體自然存在的天然性生理四肽，其結(jié)構(gòu)為蘇-賴-脯-精氨酸(Thr-Kys-Pro-Arg)。由于Tuftsin的產(chǎn)生需要經(jīng)過位于吞噬細(xì)胞膜上的白細(xì)胞膜酶(Leukokininase)和脾臟產(chǎn)生的內(nèi)羧基肽酶(Endocarboxypeptide)兩步酶的作用，因此是一個(gè)僅產(chǎn)生于脾臟的四肽。Tuftsin具有重要生物活性，與靶細(xì)胞膜上的Tuftsin專一性受體結(jié)合后發(fā)

8、揮其促吞噬、殺菌、抗腫瘤等作用。因此血清Tuftsin含量成為評(píng)價(jià)脾功能和脾外科手術(shù)療效的特異性指標(biāo)，并且有助于了解患者的免疫功能。本實(shí)驗(yàn)使用反相—高效液相色譜法檢測(cè)患者血清中Tuftsin的含量。結(jié)果表明由于對(duì)照組切除了Tuftsin的產(chǎn)生器官—脾臟，其血清中含量明顯下降(P＜0.01)；實(shí)驗(yàn)組術(shù)后血清中Tuftsin含量雖有下降，但是由于保留了部分脾臟，所以與術(shù)前比較并無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)，從而很好的保留了機(jī)體的抗感染、抗腫

9、瘤功能。 3.使用彩超測(cè)定實(shí)驗(yàn)組手術(shù)前后門靜脈及脾靜脈血流動(dòng)力學(xué)變化；使用SOMATOMSensation16排CT掃描器及其三維重建軟件測(cè)算脾臟的消融體積；進(jìn)一步收集RFA治療脾亢的臨床資料進(jìn)行分析研究，并在初期臨床研究的基礎(chǔ)上探索改善RFA治療脾亢的手術(shù)方法。結(jié)果表明：實(shí)驗(yàn)組術(shù)后各時(shí)相門靜脈及脾靜脈血管內(nèi)徑與術(shù)前相比明顯縮小(P＜0.05)，且隨著時(shí)間延長呈下降趨勢(shì)。門靜脈及脾靜脈最大血流速度、血流量均較術(shù)前明顯減小，與術(shù)前

10、比較有顯著差異(P＜0.05)；實(shí)驗(yàn)組患者脾臟消融體積為58％～73％，且脾臟總體積與消融體積隨著術(shù)后時(shí)間的延長逐漸縮小，并在術(shù)后半年左右趨于穩(wěn)定。所有患者脾亢緩解滿意，其中消融體積為73％的患者未出現(xiàn)免疫功能受損情況，因此我們認(rèn)為RF治療脾亢的最佳消融體積為60％～70％；初步探索出控制消融體積的手術(shù)方法；實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組術(shù)后血小板變化趨勢(shì)明顯不同。RFA術(shù)后外周血小板緩慢上升，沒有發(fā)生脾臟切除后出現(xiàn)的短期內(nèi)血小板升至峰值然后緩慢回落的