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文檔簡介
1、研究目的:
針對不同交聯(lián)處理方法處理的生物組織具有不同生物學(xué)特性這一先期研究結(jié)論,觀察染料介導(dǎo)光氧化(Dye-mediated photooxidation,DMP)及京尼平(Genipin,GP)交聯(lián)處理的同種異體動(dòng)脈的物理特性,以及行同種異體血管移植術(shù)并承受體內(nèi)血流作用后的生物學(xué)特性。并初步探討DMP法交聯(lián)處理同種異體動(dòng)脈的中長期效果。
研究方法:
以新西蘭兔胸主動(dòng)脈(血管內(nèi)徑4mm左右)作
2、為研究對象,按對其交聯(lián)處理方法的不同分為DMP交聯(lián)處理組(DMP組)、GP交聯(lián)處理組(GP組)、戊二醛(Glutaraldehyde,GA)交聯(lián)處理組(GA組),同時(shí)設(shè)立實(shí)驗(yàn)對照組(即未進(jìn)行任何特殊交聯(lián)處理)。經(jīng)對應(yīng)的不同交聯(lián)處理后測定各組的組織含水量、熱皺縮溫度、斷裂強(qiáng)度,并進(jìn)行體外溶血試驗(yàn)觀察處理后動(dòng)脈的生物相容性。然后將各組血管行血管移植術(shù),建立新西蘭兔胸-腹主動(dòng)脈移植模型,實(shí)驗(yàn)對照組行自體動(dòng)脈原位移植。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物觀察飼養(yǎng)1個(gè)月后,
3、取出移植血管,通過光學(xué)顯微鏡半定量計(jì)數(shù)觀察,評價(jià)移植血管在體內(nèi)的生物穩(wěn)定性;通過掃描電鏡半定量計(jì)數(shù)各組血管新覆蓋的內(nèi)皮細(xì)胞,評價(jià)移植血管在體內(nèi)的生物毒性;運(yùn)用原子吸收光譜法測定移植血管的組織鈣含量,評價(jià)移植血管在體內(nèi)的抗鈣化性能。
另將DMP交聯(lián)處理的血管進(jìn)行新西蘭兔胸-腹主動(dòng)脈移植,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物長期飼養(yǎng)4-6個(gè)月,取出移植血管,進(jìn)行上述生物學(xué)性能研究。
結(jié)果:
(1)各組血管的組織含水量:對照組>
4、DMP組>GP組>GA組,對照組與DMP組、GP組與GA組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,DMP組的組織含水量明顯高于GP組(P<0.05)。
(2)各組血管的熱皺縮溫度:GA組>GP組>DMP組>對照組,GA組與GP組、DMP組與對照組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,GP組的熱皺縮溫度明顯高于DMP組(P<0.05)。
(3)各組血管的斷裂強(qiáng)度:GA組>GP組>DMP組>對照組,GA組與GP組、DMP組與對照組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,GP組
5、的斷裂強(qiáng)度明顯高于DMP組(P<0.05)。
(4)各組血管的體外溶血指數(shù):GA組>GP組>DMP組,均低于美國《ASTM協(xié)會(huì)醫(yī)用裝置標(biāo)準(zhǔn)》及國家標(biāo)準(zhǔn)(5%),GP組與DMP組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,GA組與GP組、GA組與DMP組之間具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)。
(5)光學(xué)顯微鏡觀察,評價(jià)移植血管的生物穩(wěn)定性:對照組>DMP組>GP組>GA組,對照組、DMP組及GP組兩兩之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,GP組與GA組之
6、間具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)。
(6)掃描電鏡下觀察并半定量計(jì)數(shù)移植血管內(nèi)皮細(xì)胞,計(jì)算內(nèi)皮細(xì)胞覆蓋率:DMP組>GP組>GA組,DMP組及GP組兩兩之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,GP組的內(nèi)皮細(xì)胞覆蓋率明顯高于GA組(P<0.01)。
(7)原子吸收光譜法定量檢測移植血管的組織鈣含量:GA組>GP組>DMP組>對照組,GA組與GP組、DMP組與對照組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,GP組的組織鈣含量明顯高于DMP組(P<0.01)。
7、
(8)DMP交聯(lián)處理的血管進(jìn)行新西蘭兔胸-腹主動(dòng)脈移植,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物長期飼養(yǎng)4-6個(gè)月后取出移植血管,進(jìn)行上述生物學(xué)性能研究,與飼養(yǎng)1個(gè)月的GP組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物相比,結(jié)果顯示其仍具有較好的生物穩(wěn)定性、抗鈣化性能以及低生物毒性。
結(jié)論及意義:
探索同種異體小血管移植的可行性,對最終解決移植材料的諸多不足和減小手術(shù)損傷具有重要意義。從血管材料植入前后交聯(lián)處理方法及其效果的研究入手,有希望最終解決小口徑血管移
8、植物易發(fā)生狹窄、閉塞和其生物學(xué)特性不穩(wěn)定的難題,本研究有如下結(jié)論:
(1)直徑4mm左右的新西蘭兔胸主動(dòng)脈經(jīng)不同交聯(lián)處理方法作用后,在組織含水量、熱皺縮溫度、血管的斷裂強(qiáng)度及組織穩(wěn)定性方面,GP較DMP交聯(lián)處理的血管,顯示出更好的物理學(xué)特性,更適宜塑型及外科手術(shù)操作。
(2)應(yīng)用DMP、GP、GA法處理的血管材料溶血試驗(yàn)指數(shù)均低于美國《ASTM協(xié)會(huì)醫(yī)用裝置標(biāo)準(zhǔn)》及國家標(biāo)準(zhǔn)(5%),適合體內(nèi)植入。三種方法交聯(lián)處
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