基于CXCR2受體拮抗劑阻斷T淋巴細(xì)胞入腦對(duì)AD病變的影響及機(jī)制研究.pdf

1、中國(guó)醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文基于CXCR2受體拮抗劑阻斷T淋巴細(xì)胞入腦對(duì)AD病變的影響及機(jī)制研究姓名：楊一鳴申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：發(fā)育生物學(xué)指導(dǎo)教師：陳譽(yù)華20090401巴細(xì)胞在A D 病程發(fā)展的進(jìn)程中起到怎樣的作用尚未清楚?；诖耍诒狙芯恐胁捎么笫竽X立體定向注射的方法，建立1 3 淀粉樣蛋白在腦內(nèi)沉積的動(dòng)物模型，同時(shí)使用C X C R ：受體拮抗劑來(lái)阻斷T 淋巴細(xì)胞遷移入腦，旨在研究入腦的T 淋巴細(xì)胞在A D 病變中的作用，同時(shí)分析

2、T 淋巴細(xì)胞進(jìn)入腦內(nèi)可能的機(jī)制。方 法一、體內(nèi)實(shí)驗(yàn)1 、采用大鼠腦立體定位注射技術(shù)將聚集態(tài)A 1 31 4 2 注入大鼠雙側(cè)海馬，腹腔注射C X C R ：受體的拮抗劑S B 一3 3 2 2 3 5 一Z 或者拮抗劑的溶劑p e g - 4 0 0 ，對(duì)照組注射等體積的A B 4 2 ．1 。2 、利用免疫組織化學(xué)染色方法觀察阻斷T 淋巴細(xì)胞入腦前后小膠質(zhì)細(xì)胞表達(dá)C D l l b 、M H C ．I I 變化。3 、利用免疫熒光的方

3、法檢測(cè)阻斷T 淋巴細(xì)胞入腦前后神經(jīng)元表達(dá)活化c a s p a s e ．3 片段的變化。4 、應(yīng)用免疫熒光方法檢測(cè)A D 模型大鼠腦微血管內(nèi)皮表達(dá)M H C ．I 的改變。二、體外實(shí)驗(yàn)1 、使用A 1 3l 拋?zhàn)饔糜谌四X微血管內(nèi)皮細(xì)胞( H B M E C s ) 后應(yīng)用蛋白質(zhì)免疫印跡( W e s t e r n - b l o t ) 方法檢測(cè)不同時(shí)間點(diǎn)M H C ．I 蛋白表達(dá)的變化。2 、使用B V 2 培養(yǎng)上清液作用于H B

4、 M E C s 后應(yīng)用W e s t e r n - b l o t 檢測(cè)不同時(shí)間點(diǎn)M H C ．I 蛋白表達(dá)的變化。3 、使用A 1 3 1 ．4 2 刺激的B V 2 培養(yǎng)上清液作用于H B M E C s 后應(yīng)用W e s t e r n - b l o t檢測(cè)不同時(shí)間點(diǎn)M H C ．I 蛋白表達(dá)的變化。4 、應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)A 1 3l 啦作用于H B M E C s 不同時(shí)間，內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)M H C ．I 變化。結(jié) 果1