高壓氧與抗癇藥對外傷性癲癇大鼠模型治療的初步對比研究.pdf

1、目的：
　　本研究采用皮層注射氯化亞鐵建立外傷性癲癇大鼠模型，從基因等層面上對比高壓氧（Hyperbaric Oxygen，HBO）與一線抗癲癇藥物丙戊酸鈉（Valproate acid，VPA）對外傷性癲癇（Posttraumatic epilepsy，PTE）的防治作用，并探究其部分治療機制。
　　方法：
　　1、健康成年雄性 SD大鼠16只，通過皮層注射氯化亞鐵法造模，采用隨機數(shù)表法將存活者分為3組：動物模型組、

2、丙戊酸鈉治療組(VPA治療組)、高壓氧治療組（HBOT組）。對所有動物模型進行常規(guī)治療，丙戊酸鈉治療組予鼻飼丙戊酸鈉，高壓氧治療組予高壓氧治療。觀察其行為學(xué)與腦電圖改變。
　　2、30d后處死動物，在冰上斷頭取腦，采用 HE染色法觀察大腦右側(cè)海馬神經(jīng)細胞損傷情況；運用r-t PCR法檢測各樣本早期快反應(yīng)基因c-fos mRNA、c-jun mRNA、c-myc mRNA的表達水平。
　　3、用SPSS19.0軟件進行統(tǒng)計學(xué)分

3、析。若方差齊，則采用單因素方差分析，組間均數(shù)比較采用 LSD檢驗；若方差不齊，則采用非參數(shù)檢驗的Kruscal-Wallis法，設(shè)定 P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　1、造模情況：造模16只，成功16只，成功率100％。
　　2、行為學(xué)表現(xiàn)：動物模型組動物出現(xiàn)癲癇典型的急性期，靜止期及發(fā)作期表現(xiàn)；VPA治療組的癲癇發(fā)作頻率及持續(xù)時間較動物模型組無明顯減少；HBOT組的發(fā)作頻率及持續(xù)時間較動物模型組明顯

4、減少。
　　3、腦電圖表現(xiàn)：動物模型組大鼠表現(xiàn)出多種形式的癲癇樣放電波。VPA治療組大鼠癲癇發(fā)作次數(shù)無明顯減少。而HBOT組癲癇樣放電頻率減慢和波幅降低，發(fā)作次數(shù)明顯減少。
　　4、病理學(xué)表現(xiàn)：動物模型組海馬神經(jīng)元缺失明顯，出現(xiàn)典型細胞過度凋亡壞死及膠質(zhì)細胞增生；VPA治療組海馬神經(jīng)元缺失明顯，神經(jīng)元變性、死亡程度較重；HBOT組神經(jīng)元變性、死亡程度較輕。
　　5、PCR結(jié)果：
　　5.1、各組c-fos mRN

5、A的表達水平：VPA治療組c-fos mRNA的表達水平較模型組顯著升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（LSD檢驗，P＜0.01），HBOT組c-fos mRNA的表達水平較VPA治療組明顯下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（LSD檢驗，P＜0.05）。
　　5.2、各組c-jun mRNA的表達水平：HBOT組c-jun mRNA的表達水平較動物模型組及VPA治療組均明顯下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（K-W檢驗，P＜0.05）。
　　5.3、各組c-m

6、yc mRNA的表達水平：HBOT組及VPA治療組c-myc mRNA的表達水平較動物模型組顯著下降（LSD檢驗，P＜0.01）。
　　結(jié)論：
　　1、從行為學(xué)、EEG及病理層面表現(xiàn)顯示HBOT對PTE動物模型治療作用較抗癇藥佳。
　　2、從基因?qū)用嫖覀兛傻贸鋈缦峦茢啵?br>　　2.1、 c-fos基因作用層面分析：HBOT可能通過降低TBI后腦皮質(zhì)的高興奮性，抑制 N-甲基-D-天門冬氨酸（NMDA）受體激活及鈣離

7、子內(nèi)流，使得神經(jīng)細胞c-fos表達下調(diào)，從而抑制外傷性癲癇發(fā)作。而VPA作用機制則與之相反，故推斷其無法從本機制獲益。
　　2.2、 c-jun基因作用層面分析：HBOT可通過抑制JNK信號通路的激活，抑制神經(jīng)元過度凋亡及神經(jīng)膠質(zhì)細胞病理性增殖，從而達到抗PTE的效果。而VPA無法抑制JNK信號通路的激活。
　　2.3、 c-myc基因作用層面分析：我們推測HBOT及VPA均可下調(diào)c-myc的表達，從而抑制局部神經(jīng)細胞的過度