黃秋葵花多糖的超聲提取及其結(jié)構(gòu)和抗氧化活性研究.pdf_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、黃秋葵(Abelmoschus esculentus(L.) Moench),原產(chǎn)非洲,其花中富含多糖、蛋白質(zhì)、黃酮、脂肪酸、礦物質(zhì)元素等,營(yíng)養(yǎng)保健價(jià)值高,具有很大的開發(fā)潛力。國(guó)內(nèi)外已有大量對(duì)黃秋葵嫩莢多糖的研究報(bào)道,但對(duì)黃秋葵花中同樣富含的多糖類物質(zhì)研究較少。本文通過比較不同提取方法所得多糖的理化性質(zhì)以及抗氧化活性,探討了提取方法對(duì)多糖性質(zhì)的影響,優(yōu)化了超聲提取黃秋葵花多糖的工藝條件,并進(jìn)一步分離純化超聲提取的多糖,對(duì)主要多糖組分的化

2、學(xué)結(jié)構(gòu)進(jìn)行表征。
  1.以黃秋葵花作為原料,采用了熱水、酸法、酶法、超聲輔助提取的方法,分別得到四種粗多糖,其中酶法提取率最高。四種多糖的半乳糖醛酸含量在29.34%-52.63%,粗多糖中還檢測(cè)出少量蛋白質(zhì)、酚類物質(zhì)。采用HPLC、紅外光譜分析多糖的分子量、單糖組成和結(jié)構(gòu)特征,結(jié)果表明得到的四種樣品都具有多糖的典型紅外光譜特征;四種多糖的單糖組成類型相同,主要由鼠李糖、半乳糖醛酸、半乳糖組成,但單糖的摩爾比有所不同;酶法和熱水

3、提取的多糖樣品具有較高的分子量且特性粘度較大,而超聲提取顯著降低了多糖的分子量和特性粘度,同時(shí)使多糖分子量的分布更加均一。掃描電鏡觀察的結(jié)果顯示,多糖的微觀表面形態(tài)主要呈現(xiàn)不規(guī)則的薄層狀。通過DPPH自由基清除能力、氧自由基吸收能力等5種經(jīng)典體外抗氧化實(shí)驗(yàn),評(píng)價(jià)除去了色素等雜質(zhì)后多糖的抗氧化活性,結(jié)果表明四種多糖具有不同程度的抗氧化活性且具有劑量依賴性。其中,超聲輔助法提取的多糖抗氧化活性最強(qiáng)。
  2.采用單因素試驗(yàn)考察超聲功率

4、、提取溫度、提取時(shí)間、料液比等因素對(duì)黃秋葵花多糖提取率的影響,再通過響應(yīng)面分析法優(yōu)化黃秋葵花多糖的提取工藝,最終優(yōu)化的提取工藝:提取溫度55℃,提取時(shí)間30 min,超聲功率85.5 W,在此條件下多糖的提取率為12.62%。
  3.采用DEAE-Q Sepharose Fast Flow色譜柱對(duì)超聲提取的多糖進(jìn)行分離純化。其中,0.5 mol/L NaCl溶液洗脫下來的組分含量較高,且為均一多糖,命名為UOFP-2。用HPLC

5、、高碘酸氧化-Smith降解法,結(jié)合FT-IR、1D-NMR和2D-NMR圖譜對(duì)UOFP-2的理化性質(zhì)及化學(xué)結(jié)構(gòu)進(jìn)行研究,發(fā)現(xiàn)UOFP-2由鼠李糖、半乳糖醛酸、半乳糖、阿拉伯糖和甘露糖組成,單糖摩爾比為32.11∶20.67∶44.41∶1.51∶1.30,多糖的主鏈由→2)-α-Rha-(1→4)-α-GalA-(1→交替的重復(fù)單元和同聚鼠李糖組成,以1→4、1→3連接的β-Gal為支鏈,連接在α-Rha的O-4位。多糖的構(gòu)象采用SE

6、C-MALLS-IR-VIS聯(lián)用法研究和AFM觀測(cè),得到UOFP-2的特性粘度為1.78 dL/g,Mw為217kDa,Mark-Houwink方程中,特性常數(shù)α=0.31,表明UOFP-2在溶液中表現(xiàn)為球形構(gòu)象,與AFM觀測(cè)到的結(jié)果相符。
  4.多糖組分UOFP-2表現(xiàn)出了明顯的羥基自由基清除活性,IC50為5.89mg/mL,具有劑量依賴;UOFP-2的ORAC值為30.38μmol Trolox/g,CAA值為342.98

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