乳腺癌血管-淋巴管新生與HER-2相關性及預后意義的研究.pdf

1、旦失學。學校代碼10246學號031106168博士學位論文乳腺癌血管／淋巴管新生與HER_2相關性及預后意義的研究院專姓系：業(yè)：名：指導教師：腫瘤醫(yī)院腫瘤學張瑰紅施達仁教授完成日期：!Q墮堡蘭旦!!旦復口大學攻讀博一學位研究生畢業(yè)論文中文摘要乳腺癌血管／淋巴管新生與HER2相關性及預后意義的研究中文摘要目的：研究血管／淋巴管新生與HER2基因的相互關系及在乳腺癌發(fā)生發(fā)展中的作用和對乳腺癌預后的影響，以期探討HER2過表達患者預后差的分

2、子機制，為乳腺癌淋巴結轉移和預后評估提供新的分子指標，為HER2過表達患者的臨床治療提供新的思路和理論依據。方法：(1)選取兩株HER一2表達水平不同的乳腺癌細胞株(sKBR3、MDAMB一231)，用Herceptin藥物干預阻斷HER一2蛋白功能，采用TaqMan實時熒光定量逆轉錄聚合酶鏈反應(Realtimequantitativereversetranscriptjonpolvmerasechainreaction，Realti

3、meqRTPcR)(相對定量法)和免疫組化法(hnmunohistochemistry，IHC)檢測Herceptin阻斷前后ⅦGFA，一C，一DmRNA及細胞爬片中三因子蛋白表達水平。(2)收集1993～1996年61例乳腺浸潤性導管癌和29例乳腺良性病變新鮮標本，采用realtimeqRTPCR(絕對定量法)檢測ⅦGF—A，c，一DmRNA表達水平，分析這三種因子mRNA表達與乳腺癌臨床病理參數及預后問關系。(3)收集1992～19

4、96年有隨訪資料的160例乳腺癌石蠟包埋組織，通過免疫組化方法檢測血管／淋巴管新生相關指標：ⅦGF—A—C，一D蛋白表達，并用FⅧ、podopIanin抗體分別標記微血管、微淋巴管內皮，計數微血管密度(microvesseldensjty，MVD)和淋巴管密度(1ymphaticvesseldensity，L、7D)，并觀察腫瘤組織中微血管侵犯(microvesselinvasion，MvI)和淋巴管侵犯(1ymphaticvessel

5、invasion，IⅣ1)情況，將以上指標與患者的臨床病理參數進行統(tǒng)計分析。(4)顯色原位雜交法(chromogenicinsituhybrjdization，cIsH)和免疫組化法分別檢測乳腺癌組織中HER2基岡和蛋白表達狀況，分析其與乳腺癌血管／淋巴管新生相關指標問關系，采用lo皿stic回歸模型將所有指標與淋巴結轉移進行多因素分析，并同時進行單因素和多因素生存分析(cox風險比例模型)。結果：(1)Herceptin阻斷后sKBR

6、一3細胞ⅦGFA，c，D基因mRNA含量是阻斷前的0247、O519、0930倍。Hercepcin阻斷前sKBR一3細胞vEGFA，c免疫組化染色為強陽性，vEGFD為弱陽性表達；阻斷后vEGFA，C降低為中度陽性表達，ⅦGFD無明顯改變仍為弱陽性表達。Herceptin阻斷后對照組MDAMB一231細胞vEGFAC，DmRNA及蛋自表達均無明顯改變。(2)人乳腺癌VEGF—A，一cmRNA表達量(419，429)分別高于乳腺良性病變