長期配戴角膜接觸鏡者角膜上皮的病理改變.pdf

1、目的：
　　 通過對(duì)比的方法,研究長期配戴角膜軟性接觸鏡患者和從未配戴角膜軟性接觸鏡患者的角膜上皮,觀察角膜上皮組織的基底細(xì)胞數(shù)目、上皮厚度、基底細(xì)胞形態(tài)、PCNA等方面的不同變化,了解長期配戴角膜軟性接觸鏡對(duì)角膜的影響,從而為臨床提供有效的治療手段。
　　 方法：
　　 1.選擇患者:選配戴角膜接觸鏡超過三年的患者和從未配戴角膜接觸鏡患者各33例。
　　 2.實(shí)驗(yàn)分組:
　　 (1)實(shí)驗(yàn)組:配戴

2、軟性角膜接觸鏡超過三年的患者33例66眼；
　　 1)實(shí)驗(yàn)A組:配戴軟性角膜接觸鏡超過三年的患者30例60眼,其中男性13例26眼,女性17例34眼,年齡18-41歲,平均27.38±5.66歲；
　　 2)實(shí)驗(yàn)B組:配戴軟性角膜接觸鏡超過三年的患者3例6眼,其中男性1例2眼,女性2例4眼；
　　 (2)對(duì)照組:從未配戴角膜接觸鏡患者33例66眼；
　　 1)對(duì)照A組為從未配戴角膜接觸鏡患者30例60眼,

3、其中男性15例30眼,女性15例30眼,年齡18-40歲,平均26.87±6.73歲；
　　 2)對(duì)照B組為從未配戴角膜接觸鏡患者3例6眼,其中男性2例4眼,女性1例2眼。
　　 3.取材:對(duì)所選患者,在準(zhǔn)分子Flap-free Epi-LASIK手術(shù)中,用Epi-K角膜上皮刀取下角膜上皮瓣。
　　 4.檢測(A組患者):
　　 (1)厚度測量:將角膜上皮瓣展開,平放在載玻片上,采用超聲方法測量其厚度；<

4、br>　　 (2)基底細(xì)胞計(jì)數(shù):
　　 1)角膜上皮瓣經(jīng)過HE染色、固定、脫水、透明、封片后,在顯微鏡下觀察其基底細(xì)胞數(shù)目的變化；
　　 2)將新鮮角膜上皮瓣經(jīng)瑞氏染色,在顯微鏡下觀察其基底細(xì)胞數(shù)目的變化。
　　 5.形態(tài)學(xué)觀察(B組患者):
　　 1)取角膜上皮瓣,經(jīng)過固定、脫水、透明、包埋、切片、HE染色、固定、脫水、透明、封片后在病理顯微鏡下觀察角膜上皮瓣及其細(xì)胞形態(tài)的變化；
　　 2)取

5、角膜上皮瓣,常規(guī)切片,經(jīng)免疫組織化學(xué)染色后,在高倍顯微鏡下進(jìn)行增殖細(xì)胞核抗原(Proliferating Cell Nuclear Antigen簡稱PCNA)測定。
　　 結(jié)果：
　　 1.通過超聲測量離體角膜上皮瓣的厚度,長期配戴角膜軟性接觸鏡組角膜上皮層厚度為55.33±4.56μm；對(duì)照組角膜上皮層厚度為57.19±3.82μm,二者之間有顯著差異,存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)。
　　 2.通過顯微鏡下

6、對(duì)離體角膜上皮瓣基底細(xì)胞的觀察,發(fā)現(xiàn)長期配戴角膜軟性接觸鏡組,基底上皮細(xì)胞數(shù)目減少,為3872.57±153.16個(gè)/mm2；對(duì)照組基底上皮細(xì)胞數(shù)目為3989.18±289.58個(gè)/mm2,二者之間有顯著差異,存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.01)。
　　 3.通過形態(tài)變化的對(duì)比,可以見到長期配戴軟性角膜接觸鏡者角膜基底細(xì)胞細(xì)胞排列疏松,細(xì)胞形態(tài)欠規(guī)整,基底膜較厚,相對(duì)粗糙。
　　 4.經(jīng)過免疫組織化學(xué)標(biāo)記,長期配戴軟性角膜接觸

7、鏡者角膜上皮基底細(xì)胞發(fā)現(xiàn)PCNA陽性細(xì)胞,而從未配戴軟性角膜接觸鏡者沒有發(fā)現(xiàn)。
　　 5.用Epi-K取下的角膜上皮瓣基底細(xì)胞完整,界面光滑平整,無基底細(xì)胞缺失,無基質(zhì)細(xì)胞存在。
　　 結(jié)論：
　　 1.長期配戴軟性角膜接觸鏡可導(dǎo)致角膜上皮損傷:使角膜上皮厚度變薄；單位面積內(nèi)的的角膜上皮基底細(xì)胞數(shù)量減少；可使角膜上皮的組織結(jié)構(gòu)發(fā)生病理學(xué)改變,細(xì)胞形態(tài)發(fā)生改變,細(xì)胞之間的連接和基底膜遭到破壞,PCNA陽性細(xì)胞存在。