連翹提取物對膿毒癥大鼠肝基因表達(dá)的影響.pdf

1、目的:研究中藥連翹提取物對膿毒癥大鼠肝組織基因表達(dá)的影響，從基因水平上探討連翹治療膿毒癥可能的作用機(jī)制。
　　方法:雄性SD大鼠210只，隨機(jī)分為模型組(n=90)、連翹組(n=90)和對照組(n=30)，模型組和連翹組又根據(jù)取材時間(24h、48h、72h)分為3個亞組，每個亞組30只。采用盲腸結(jié)扎穿孔術(shù)(cecal ligation puncture，CLP)制備膿毒癥模型，連翹組尾靜脈注射連翹提取物溶液2.5ml/kg，每1

2、2小時一次;模型組及對照組給予同等體積生理鹽水。模型組和連翹組不同亞組分別于造模后24h、48h、72h斷頭處死大鼠，無菌條件下切取右上葉肝組織，無RNase生理鹽水清洗后，置于液氮中保存?zhèn)溆谩φ战M于相同條件下切取大鼠肝組織，保存于液氮備用。應(yīng)用RatGenome2302.0大鼠基因表達(dá)譜芯片檢測并分析各組大鼠肝組織的基因表達(dá)情況，以基因表達(dá)的倍數(shù)變化(fold change)＞2或＜-2且p＜0.05為差異基因篩選標(biāo)準(zhǔn)，通過計算機(jī)篩

3、選出差異表達(dá)的基因，并通過美國國立生物技術(shù)信息中心(NCBI)數(shù)據(jù)庫查詢基因功能并加以分類。
　　結(jié)果:與對照組比較，模型24h組篩選出差異表達(dá)基因671條，已知功能基因667條，其中上調(diào)基因439條，下調(diào)基因228條;模型48h組篩選出差異表達(dá)基因133條，其中上調(diào)基因55條，下調(diào)基因78條;模型72h組篩選出差異表達(dá)基因204條，其中上調(diào)基因89條，下調(diào)基因115條。與同時間點(diǎn)模型組比較，連翹24h組篩選出差異基因2條，表達(dá)均

4、上調(diào);連翹48h組篩選出差異基因52條，已知功能基因51條，其中上調(diào)基因34條，下調(diào)基因17條;連翹72h組篩選出差異基因71條，其中上調(diào)基因38條，下調(diào)基因33條。模型組/對照組表達(dá)上調(diào)而連翹組/模型組表達(dá)下調(diào)基因14條，模型組/對照組表達(dá)下調(diào)而連翹組/模型組表達(dá)上調(diào)基因11條。基因功能主要涉及免疫反應(yīng)、物質(zhì)能量代謝、細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞周期調(diào)控、物質(zhì)運(yùn)輸、細(xì)胞粘附等方面。
　　結(jié)論:1.膿毒癥時肝組織大量基因異常表達(dá)，涉及不同的

5、分子功能，并參與多個生物學(xué)過程，提示膿毒癥是一個涉及多因子、多基因、多種信號途徑共同調(diào)控的復(fù)雜過程。2.連翹提取物能調(diào)控膿毒癥模型大鼠部分異常表達(dá)基因發(fā)生回歸，尤其是部分免疫炎癥相關(guān)基因及代謝相關(guān)基因，能夠調(diào)節(jié)機(jī)體免疫平衡紊亂，避免過度炎癥反應(yīng)，糾正Th1/Th2比例失衡，改善T細(xì)胞對特異性抗原刺激的低反應(yīng)性，避免出現(xiàn)免疫麻痹;調(diào)節(jié)機(jī)體糖脂代謝，維持血糖穩(wěn)定，降低血脂肪酸水平，改善高胰島素血癥及胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)。此外，還可維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定，