N-乙酰半胱氨酸、白芍總甙、沙利度胺對(duì)TGF-β1誘導(dǎo)人胚肺成纖維細(xì)胞向肌成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化的影響.pdf

1、目的： 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β 1(Transforming Growth Factor-β 1，TGF-β 1)誘導(dǎo)的人胚肺成纖維細(xì)胞(Human Fetal Lung Fibroblast，HFL-F)向肌成纖維細(xì)胞(Myofibroblast，MF)轉(zhuǎn)化被認(rèn)為是肺間質(zhì)纖維化病變中的關(guān)鍵步驟。通過(guò)研究N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcystein，NAC)、白芍總甙(Total Glucosides of Peony，TGP)、沙

2、利度胺(Thalidomide，THD)對(duì)TGF-β 1誘導(dǎo)HFL-F向MF轉(zhuǎn)化過(guò)程和對(duì)已分化MF的作用，為進(jìn)一步體內(nèi)實(shí)驗(yàn)和臨床治療結(jié)締組織病相關(guān)肺纖維化病變提供參考。 方法： 體外培養(yǎng)HFL-F，5 μ g/l TGF- β1誘導(dǎo)HFL-F向MF轉(zhuǎn)化，通過(guò)測(cè)定羥脯氨酸含量(Hydroxyproline，HYP)、α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-smooth muscle actin，α-SMA)mRNA、Ⅲ型膠原(collag

3、en Ⅲ，Col Ⅲ)mRNA和α-SMA蛋白，觀察10μ g/l NAC、50 μ g/l TGP、50μ g/lTHD對(duì)HFL-F向MF轉(zhuǎn)化過(guò)程以及己分化MF細(xì)胞的影響。 結(jié)果： 5μg/l TGF-β 1誘導(dǎo)HFL-F 96h后，羥脯氨酸含量增高(p<0.01)，α-SMA mRNA(p<0.05)、Col Ⅲ mRNA表達(dá)上調(diào)(p<0.01)，α-SMA蛋白表達(dá)量增加。 同時(shí)加入10 μ g/1 NAC可

4、抑制羥脯氨酸含量增高(p<0.05)，ColⅢ mRNA表達(dá)上調(diào)(p<0.01)和α-SMA蛋白表達(dá)量增加，但對(duì)于α-SMAmRNA表達(dá)上調(diào)沒(méi)有影響(p>0.05)。50 μ g/l TGP可抑制羥脯氨酸含量增高(p<0.05)與α-SMA蛋白表達(dá)量增加，但對(duì)于α-SMA mRNA與ColⅢ mRNA的表達(dá)上調(diào)沒(méi)有影響(p均>0.05)。50 μ g/l THD可抑制羥脯氨酸含量增高(p<0.05)，Col Ⅲ mRNA表達(dá)上調(diào)(p<0

5、.05)和α-SMA蛋白表達(dá)量增加，但對(duì)于α-SMA mRNA表達(dá)上調(diào)沒(méi)有影響(p>0.05)。 5 μ g/l TGF-β 1刺激HFL-F 96h后，再加入10 μ g/l NAC或50μ g/l TGP對(duì)羥脯氨酸含量、α-SMA mRNA、Col Ⅲ mRNA表達(dá)與α-SMA蛋白表達(dá)量等方面均沒(méi)有影響(p均>0.05)。再加入50 μ g/lTHD在羥脯氨酸含量、β-SMA mRNA表達(dá)與β-SMA蛋白表達(dá)量等方面均沒(méi)有。明顯影響

6、(p均>0.05)，但可抑制Col Ⅲ mRNA的表達(dá)(p<0.05)。 結(jié)論： 5μg/l1 TGF-β1可誘導(dǎo)HFL-F向MF轉(zhuǎn)化。 10μg/1 NAC、50 μg/l TGP、50μg/l THD可部分抑制TGF-β 1誘導(dǎo)HFL-F向MF轉(zhuǎn)化，抑制作用主要體現(xiàn)在蛋白水平，抑制MF標(biāo)記蛋白α-SMA蛋白合成與膠原合成(羥脯氨酸的含量降低)。 對(duì)已分化的MF，10 μ g/l NAC與50 μ g/