鐵皮石斛圓球莖生物反應(yīng)器培養(yǎng)及有效成分含量的分析.pdf

1、鐵皮石斛是一種十分珍稀的藥用植物，具有獨(dú)特的藥用價(jià)值。由于鐵皮石斛種子發(fā)芽率低，分株繁殖速度慢，影響了規(guī)模化生產(chǎn)的進(jìn)程，加之試管苗的移栽成活率低，造成了石斛藥源供需之間的緊張狀態(tài)。本研究以鐵皮石斛無菌播種所獲得的圓球莖為材料，對(duì)影響鐵皮石斛圓球莖增殖的幾種因素進(jìn)行了研究，并且通過生物反應(yīng)器諸理化參數(shù)的調(diào)控，探明在反應(yīng)器內(nèi)圓球莖生長(zhǎng)的優(yōu)化條件，并對(duì)有效成分含量進(jìn)行分析，為鐵皮石斛的開發(fā)利用提供理論依據(jù)。
　　固體培養(yǎng)基組成對(duì)鐵皮石斛

2、圓球莖增殖影響的研究結(jié)果表明：鐵皮石斛圓球莖在1/2 MS的培養(yǎng)基中增殖效果最佳，顯著好于其他濃度的MS培養(yǎng)基；在1/2 MS培養(yǎng)基中加入NAA0.5 mg·L-1和BA2 mg·L-1促進(jìn)鐵皮石斛圓球莖增殖；培養(yǎng)基中加入提取物質(zhì)有利于鐵皮石斛圓球莖的增殖生長(zhǎng)，以加入椰汁100 ml·L-1為最佳。
　　利用氣升式生物反應(yīng)器可大量增殖鐵皮石斛圓球莖，在3L反應(yīng)器中接種20 g圓球莖進(jìn)行完全浸沒培養(yǎng)30 d后，圓球莖鮮重可達(dá)167.

3、5 g，顯著好于10 g和30 g接種量處理。鐵皮石斛圓球莖增殖采用生物反應(yīng)器培養(yǎng)時(shí)，1600 Lux光照強(qiáng)度對(duì)鐵皮石斛圓球莖增殖培養(yǎng)最為有效；反應(yīng)器注入0.20 vvm空氣，更有利于鐵皮石斛圓球莖的增殖培養(yǎng)。
　　接種密度、光照強(qiáng)度、通氣量等因素均對(duì)鐵皮石斛圓球莖多糖和生物堿含量有一定的影響，結(jié)果表明：反應(yīng)器內(nèi)接種10 g圓球莖時(shí)其多糖含量20 g和30 g接種量處理，圓球莖生物堿含量在接種量為20 g時(shí)較高。不同光照強(qiáng)度下，圓

4、球莖多糖含量順序依次為：2400 Lux﹥1600 Lux﹥黑暗；生物堿含量順序依次為：黑暗﹥1600 Lux﹥2400 Lux。反應(yīng)器內(nèi)供給0.2 vvm氧氣時(shí)，鐵皮石斛圓球莖多糖和生物堿含量高于其它通氣量處理。
　　鐵皮石斛圓球莖多糖含量和生物堿含量在10 d至30 d內(nèi)不斷增加，并且多糖產(chǎn)量和生物堿產(chǎn)量在30 d時(shí)達(dá)到最大值，30 d后兩者含量均有所下降。鐵皮石斛圓球莖的多糖含量和生物堿含量均高于栽培苗和組培苗，分別為214