轉(zhuǎn)化生長因子β1和明膠酶在妊娠滋養(yǎng)細胞疾病中的影響與意義.pdf

1、Y g z 6 2 s 4賡柬醬擎院碩士學(xué)位論文月轉(zhuǎn)化生長因子B 1 和明膠酶在人妊娠滋養(yǎng)細胞疾病中的影響與意義中文摘要【目的】體外培養(yǎng)原代人早孕滋養(yǎng)層細胞及絨毛膜癌細胞系J A R 細胞，研究轉(zhuǎn)化生長因子．1 3 1 ( T G F ．1 3 1 ) 對人早孕滋養(yǎng)層細胞和J A R 細胞增殖、細胞周期／凋亡和明膠酶及其抑制劑基因表達水平的影響，從而探討T G F ．p 1 和明膠酶在人妊娠滋養(yǎng)細胞疾病發(fā)病機制中的作用和意義?！痉椒ā坑?/p>

2、兩種不同的方法( 絨毛組織貼塊法、酶聯(lián)合消化法) 進行人早孕滋養(yǎng)細胞的原代培養(yǎng)，鑒定和純化原代早孕滋養(yǎng)層細胞，測定其細胞活力。對其部分生長特性進行研究。、傳代培養(yǎng)絨毛膜癌J A R 細胞，分別以不同濃度的T G F ．1 3 1 刺激培養(yǎng)良惡性兩種細胞，分別用細胞計數(shù)法、M T T 比色法、流式細胞術(shù)三種方法研究T G F ．B l 對兩種細胞增殖活性和細胞周期／凋亡的影響。R T - P C R 法檢測T G F 一1 3 1誘導(dǎo)的正

3、常早孕滋養(yǎng)細胞和J A R 細胞中侵襲相關(guān)基因明膠酶及其抑制劑m R N A的表達，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析，比較兩種細胞在體外侵襲性的異同。【結(jié)果】1 ．兩種方法均成功進行人早孕滋養(yǎng)細胞的原代培養(yǎng)，本研究發(fā)現(xiàn)酶聯(lián)合消化及F i c o l l 4 0 0 梯度密度離心法相比較而言，可獲得數(shù)量更多的活力好、純度較高的具有不同分化的功能的滋養(yǎng)層細胞，為進一步研究其侵襲、增殖能力等生理、病理中的作用提供了堅實的基礎(chǔ)。2 ．體外觀察發(fā)現(xiàn)，隨著T G F

4、．1 3 1 濃度的增高，T G F - 1 3 1 抑制人正常早孕滋養(yǎng)層細胞的增殖作用加大。但在一定的濃度范圍內(nèi)，卻以濃度依賴性和時間依賴性的方式促進J A R 細胞的增殖，提示T G F ．1 3 1 在良性滋養(yǎng)細胞疾病的惡變中可能的促進作用。3 ．M M P 2 和M M P 9 的m R N A 在正常早孕滋養(yǎng)細胞中有低度表達，T G F —D 1 能上調(diào)正常早孕滋養(yǎng)細胞M M P 2 的表達，差異有非常顯著性意義( P <