抗NRP-1b1b2單克隆抗體的純化、活性鑒定及其對胃癌細胞抗腫瘤活性的初步研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、實驗目的:
  研究neuropilin-1(NRP-1,神經(jīng)纖毛蛋白-1)在人體胃癌細胞中的定位;研究抗NRP-1單克隆抗體對兩株胃癌細胞株生長增殖、細胞遷移的影響。
  實驗方法:
  使用rProte inA親和柱純化蛋白法將抗N RP-1抗體從小鼠腹水中提純,并通過SDS-PAGE鑒定抗體的純度,ELISA方法鑒定抗體的親和力,流式細胞術觀察抗體與兩株胃癌細胞BGC823、MKN28的結合能力,細胞免疫熒光觀察

2、抗體在胃癌細胞表面的定位。最后,我們通過細胞增殖抑制實驗,劃痕實驗研究抗NRP-1抗體對胃癌細胞BGC823、MKN28的增殖、遷移的影響。
  實驗結果:
  實驗結果顯示:1、純化的抗NRP-1抗體純度超過95%,濃度為4mg/mL;2、抗體對表達的重組NRP-1b1b2蛋白和兩株胃癌細胞株有較高的親和力;3、免疫熒光實驗結果顯示抗體定位在細胞表面4、細胞增殖實驗、劃痕實驗表明抗NRP-1抗體對胃癌細胞的生長、遷移都有一

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