青霉素G鈉中致敏性雜質(zhì)的分離.pdf

1、青霉素是臨床上最易引發(fā)過(guò)敏反應(yīng)的藥物之一，但它本身并沒(méi)有致敏性，引發(fā)過(guò)敏反應(yīng)的最主要原因是青霉素制品中的大分子雜質(zhì)，因此，去除致敏性大分子雜質(zhì)對(duì)于降低青霉素過(guò)敏反應(yīng)發(fā)生率具有重要意義。凝膠色譜法作為一種高效、易于操作的分離模式是分離青霉素中致敏性大分子雜質(zhì)的有效手段。本文就凝膠色譜法分離的基礎(chǔ)理論和青霉素G鈉中致敏性雜質(zhì)的分離去除工藝兩方面展開(kāi)了深入的研究。
　　 青霉素G鈉的不穩(wěn)定性將嚴(yán)重影響分離除雜的效果，為此研究了溶液種類(lèi)

2、、緩沖液濃度、pH值以及溫度對(duì)青霉素G鈉穩(wěn)定性的影響。青霉素G鈉在不同溶液中的穩(wěn)定性順序依次為：檸檬酸鹽緩沖液>醋酸鹽緩沖液>磷酸鹽緩沖液>碳酸鈉溶液>0.9％氯化鈉溶液、5％葡萄糖溶液。在檸檬酸鹽緩沖液中，緩沖液與青霉素G鈉摩爾比大于0.75時(shí)有利于長(zhǎng)時(shí)間保持穩(wěn)定性。較低的溫度和中性溶液有利于青霉素G鈉溶液的穩(wěn)定性。
　　 采用Sephadex G－25、G－10凝膠，對(duì)青霉素G鈉中大分子雜質(zhì)的分離條件進(jìn)行了研究，考察了流動(dòng)相

3、種類(lèi)、緩沖液濃度、溫度對(duì)大分子雜質(zhì)分離效果以及青霉素G鈉色譜行為的影響，討論了青霉素G鈉與凝膠之間的相互作用機(jī)理。青霉素G鈉在Sephadex凝膠上的色譜行為主要是體積排阻效應(yīng)，但也存在溶質(zhì)分子－凝膠之間吸附作用的次級(jí)效應(yīng)。大分子雜質(zhì)在G－10凝膠上的分離比在G-25凝膠上好，但青霉素G鈉在G－10凝膠色譜上峰形分布較寬。在G－10凝膠上較高上樣量的情況下，次級(jí)效應(yīng)變得不明顯，大部分青霉素G鈉按照體積排阻效應(yīng)被洗脫。
　　 研究

4、了以Toyopearl HW-40F凝膠為分離介質(zhì)對(duì)大分子雜質(zhì)的分離。與G-10凝膠比較，HW-40F凝膠的柱效更高，對(duì)大分子雜質(zhì)的分離效果更好，相同色譜條件下，青霉素G鈉與HW－40F凝膠之間的吸附作用更明顯。青霉素G鈉在凝膠上的吸附作用主要由疏水相互作用引起，高離子強(qiáng)度、低溶液pH值有利于洛質(zhì)分子疏水作用的增強(qiáng)，進(jìn)而增大吸附作用。采用較低濃度的中性檸檬酸鹽緩沖液做為流動(dòng)相可以有效的分離青霉噻唑基類(lèi)大分子雜質(zhì)以及青霉噻唑酸，即使在上樣

5、量較大的情況下，分離效果也較好。
　　 采用前沿分析法研究了緩沖液種類(lèi)和濃度、溫度對(duì)青霉素G鈉在HW-40F凝膠上吸附平衡行為的影響。在不同溶液中，青霉素G鈉與HW-40F凝膠之間的吸附作用按照檸檬酸鹽緩沖液、磷酸鹽緩沖液、醋酸鹽緩沖液的順序依次降低；緩沖液濃度越高吸附量越大；溫度越高吸附量越小.青霉素G鈉在0.005 mol/L檸檬酸鹽緩沖液中的吸附平衡數(shù)據(jù)可以用Freundlich方程擬合，擬合平均相對(duì)誤差為1.881％；在