急性腸黏膜損傷導(dǎo)致下肢穴區(qū)敏化的電生理學(xué)特征.pdf

1、在內(nèi)臟疾病狀態(tài)下，體表相關(guān)部位會出現(xiàn)病理反應(yīng)點，這種病理反應(yīng)點伴隨疾病的發(fā)生而產(chǎn)生，隨病情的改善而減輕或消失，該相關(guān)部位為疾病在病理反應(yīng)時的反應(yīng)點或者稱其為敏化腧穴。腧穴是特異性反應(yīng)內(nèi)臟功能變化的窗口，而由機體疾病導(dǎo)致的穴區(qū)敏化正是這種特異性的體現(xiàn)。目前研究表明敏化穴區(qū)可有幾個方面的表現(xiàn):(1)穴區(qū)處出現(xiàn)疼痛，或按壓穴區(qū)時出現(xiàn)明顯的壓痛。(2)對熱的敏感度發(fā)生變化，表現(xiàn)為穴區(qū)對熱的敏感度或升高、降低或左右兩側(cè)對應(yīng)穴區(qū)失去平衡。(3)穴區(qū)

2、皮膚色澤形態(tài)發(fā)生改變，皮下出現(xiàn)結(jié)節(jié)、條索狀反應(yīng)物等。(4)穴區(qū)皮膚生物物理特性發(fā)生改變。古人也創(chuàng)立了一系列通過敏化穴區(qū)來治療疾病的針灸療法，《靈樞·五邪》:“以手疾按之，快然，乃刺之”?？傊?，人體在疾病狀態(tài)下的敏化區(qū)可以通過望診、切診及治療后的效應(yīng)來確定，但是敏化腧穴對針灸刺激呈現(xiàn)“小刺激大反應(yīng)”的作用機制目前知之甚少。
　　實驗研究表明內(nèi)臟損傷可促使伊文思藍(lán)(Evens Blue，EB)在體表滲出，表示內(nèi)臟疾病可以導(dǎo)致體表的血漿

3、滲出，呈現(xiàn)神經(jīng)源性炎癥反應(yīng)。滲出點呈現(xiàn)神經(jīng)節(jié)段分布并與損傷內(nèi)臟的背腧穴等具有高度相關(guān)性，提示在疾病狀態(tài)下穴位由沉寂而活化。以往我們研究還發(fā)現(xiàn)急性腸黏膜損傷導(dǎo)致體表敏化區(qū)域的肥大細(xì)胞數(shù)量和脫顆粒率及P物質(zhì)、降鈣基因相關(guān)肽的表達均高于非敏化區(qū)域及正常對照組。這些都為穴位敏化提供了科學(xué)基礎(chǔ)。但是穴區(qū)敏化的作用機制，迄今沒有報道。
　　本研究采用電刺激急性腸粘膜損傷模型下肢不同機能狀態(tài)的穴區(qū)，觀測下肢傳入神經(jīng)（坐骨神經(jīng)）C類纖維的電生理學(xué)

4、指標(biāo)。觀察大鼠急性腸黏膜損傷后下肢敏化區(qū)的動態(tài)變化，尋找敏化區(qū)域引起傳入神經(jīng)C類纖維動作電位(Action Potential，AP)發(fā)放的刺激閾值和最大值，分析不同狀態(tài)的穴區(qū)接受電刺激引起坐骨神經(jīng)束C類纖維動作電位的即刻效應(yīng)，揭示穴區(qū)敏化的部分電生理學(xué)機制及敏化穴區(qū)對刺激呈現(xiàn)“小刺激大反應(yīng)”的部分科學(xué)基礎(chǔ)。
　　1.研究方法
　　實驗選擇8 w齡雄性SD大鼠40只，體重200～250 g，隨機分成對照組10只、模型組20只

5、、模型恢復(fù)組10只。采用直灌胃針從肛門插入腸道深約8 cm，灌注2.5％芥子油0.4 ml，4h后即發(fā)生急性腸黏膜損傷，5～6天后得到急性腸黏膜損傷恢復(fù)模型。成模后10％烏拉坦腹腔注射麻醉，尾靜脈注射2.5％EB0.4 ml并剃毛。1h后觀察EB滲出點分布，模型組和對照組完成EB滲出點記錄后進行電生理指標(biāo)觀測，5～6天后模型恢復(fù)組下肢EB滲出點消退后進行電生理指標(biāo)觀測。腧穴的機能狀態(tài)分為靜息態(tài)（對照組）、非敏化態(tài)（模型組穴區(qū)上無EB點）

6、、敏化態(tài)（模型組穴區(qū)有EB點）、非敏化恢復(fù)態(tài)（模型恢復(fù)組穴區(qū)上無EB點）及敏化恢復(fù)態(tài)（模型恢復(fù)組穴區(qū)有EB點，5～6天后消退）。
　　選擇“上巨虛”、“膝前”、“昆侖”、“太沖”等敏化區(qū)域為刺激部位，采用0.35×25 mm的毫針作為刺激電極，“上巨虛”向外旁開3mm，毫針直刺作為參考電極。采用刺激器和隔離器進行方波電刺激，刺激參數(shù)Duration:2 ms、Interval:1 s、Train:10。鈍性分離股二頭肌與半膜肌，將

7、分離的坐骨神經(jīng)置于雙極金屬電極上作為記錄電極，參考電極插入切口旁的皮下。坐骨神經(jīng)沖動信號輸入微電極放大器，采用生理記錄系統(tǒng)記錄坐骨神經(jīng)動作電位。觀測電刺激穴區(qū)引起C類纖維AP發(fā)放的閾值、最大值，測定閾值、2倍閾值和3倍閾值刺激穴區(qū)引發(fā)C類纖維AP的發(fā)放個數(shù)。
　　2.結(jié)果
　　2.1下肢敏化穴區(qū)分布結(jié)果
　　急性腸粘膜損傷導(dǎo)致的EB在下肢穴位滲出的百分比如下:“上巨虛”相關(guān)百分比為44.89％，“膝前”相關(guān)百分比為51

8、.02％，小腿內(nèi)側(cè)區(qū)（非穴對照區(qū)）相關(guān)百分比為36.73％，“昆侖”相關(guān)百分比為10.20％，“太沖”相關(guān)百分比為16.32％。模型恢復(fù)組在造模的第2天雙下肢EB滲出點數(shù)量增加，第3～4天有所下降，第5～6天滲出點基本消失。
　　2.2敏化穴區(qū)的電刺激閾值、最大值、區(qū)間值結(jié)果比較
　　“膝前”、“上巨虛”、小腿內(nèi)側(cè)區(qū)靜息態(tài)的電刺激閾值分別為:4.57±0.45 mA、4.73±0.27 mA、4.88±0.17mA，敏化后分

9、別降低為:2.48±0.25 mA、2.52±0.18 mA、2.46±0.33 mA，統(tǒng)計結(jié)果顯示敏化態(tài)的閾值與其靜息態(tài)比較有非常顯著的差異（P＜0.01）;敏化態(tài)“昆侖”和“太沖”的電刺激閾值也低于其靜息態(tài)（P＜0.05）。敏化態(tài)“膝前”和“上巨虛”的閾值與其非敏化態(tài)比較有非常顯著的差異（P＜0.01）;小腿內(nèi)側(cè)區(qū)、“昆侖”、“太沖”敏化態(tài)的電刺激閾值低于其非敏化態(tài)（P＜0.05）。
　　敏化態(tài)“膝前”、“上巨虛”、小腿內(nèi)側(cè)區(qū)

10、、“昆侖”和“太沖”的電刺激最大值與其靜息態(tài)比較顯著降低（P＜0.01）;“膝前”、“上巨虛”、小腿內(nèi)側(cè)區(qū)、“昆侖”、“太沖”敏化態(tài)的電刺激最大值低于其非敏化態(tài)（P＜0.05）。非敏化狀態(tài)下“膝前”、“上巨虛”、小腿內(nèi)側(cè)區(qū)、“昆侖”和“太沖”的電刺激最大值低于其靜息態(tài)(P＜0.05)。
　　敏化態(tài)“膝前”、“上巨虛”、小腿內(nèi)側(cè)區(qū)、“昆侖”和“太沖”的電刺激區(qū)間值與其靜息態(tài)比較顯著降低(P＜0.01);“膝前”、“上巨虛”、小腿內(nèi)側(cè)

11、區(qū)、“昆侖”、“太沖”敏化態(tài)的電刺激區(qū)間值低于其非敏化態(tài)（P＜0.05）。非敏化狀態(tài)下“膝前”、“上巨虛”、小腿內(nèi)側(cè)區(qū)、“昆侖”和“太沖”的電刺激區(qū)間值低于其靜息態(tài)（P＜0.05）。
　　2.3進行閾值、2倍閾值、3倍閾值電刺激引發(fā)C類纖維AP結(jié)果比較
　　對不同機能狀態(tài)下的“膝前”、“上巨虛”、小腿內(nèi)側(cè)區(qū)、“昆侖”和“太沖”進行閾值電刺激，其敏化態(tài)引起C類纖維AP發(fā)放個數(shù)多于其靜息態(tài)、非敏化態(tài)、非敏化恢復(fù)態(tài)及敏化恢復(fù)態(tài)（P

12、＜0.05）。
　　敏化狀態(tài)下“膝前”接受2倍閾值的電刺激引發(fā)C類纖維AP發(fā)放45.89±6.65個，其靜息態(tài)發(fā)放22.61±2.83個，統(tǒng)計結(jié)果顯示敏化態(tài)引發(fā)C類纖維AP發(fā)放個數(shù)與其靜息態(tài)比較顯著增多(P＜0.01)。敏化狀態(tài)下“上巨虛”、小腿內(nèi)側(cè)區(qū)、“昆侖”、“太沖”進行2倍閾值的電刺激引發(fā)AP的個數(shù)也多于其靜息態(tài)（P＜0.05）。敏化狀態(tài)下“膝前”接受2倍閾值電刺激激發(fā)引發(fā)AP與其非敏化態(tài)比較顯著增多（P＜0.01）;敏化態(tài)

13、的“上巨虛”、小腿內(nèi)側(cè)區(qū)、“昆侖”、“太沖”接受2倍閾值的電刺激激發(fā)AP也多于其非敏化態(tài)（P＜0.05）。非敏化狀態(tài)下“膝前”接受2倍閾值的電刺激引發(fā)C類纖維AP發(fā)放30.26±4.23個，其靜息態(tài)發(fā)放22.61±2.83個，統(tǒng)計結(jié)果顯示非敏化態(tài)引發(fā)C類纖維AP發(fā)放個數(shù)與其靜息態(tài)比較顯著增多（P＜0.01），并且非敏化狀態(tài)下小腿內(nèi)側(cè)區(qū)、“上巨虛”、“昆侖”和“太沖”引發(fā)AP的個數(shù)也多于其靜息態(tài)（P＜0.05）。
　　3倍閾值電刺激

14、敏化的“膝前”、“上巨虛”、小腿內(nèi)側(cè)區(qū)、“昆侖”、“太沖”引發(fā)AP個數(shù)與其靜息態(tài)比較增多（P＜0.05）。敏化的“膝前”、“上巨虛”、小腿內(nèi)側(cè)區(qū)、“昆侖”、“太沖”接受3倍閾值電刺激激發(fā)AP個數(shù)多于其非敏化態(tài)（P＜0.05）。
　　2.4穴位和非穴位的電生理學(xué)指標(biāo)比較
　　敏化態(tài)“上巨虛”的電刺激最大值低于敏化的非穴區(qū)域（小腿內(nèi)側(cè)區(qū)）（P＜0.05）。非敏化狀態(tài)“膝前”和“上巨虛”的電刺激最大值低于非敏化的非穴區(qū)域（P＜0.

15、05）。敏化態(tài)“上巨虛”的電刺激區(qū)間值小于敏化的非穴區(qū)域（P＜0.05）。
　　對穴區(qū)和非穴區(qū)進行2倍閾值的電刺激，敏化狀態(tài)下“膝前”引發(fā)C類纖維AP個數(shù)明顯多于敏化的非穴區(qū)域（P＜0.01）;敏化態(tài)“上巨虛”接受2倍閾值電刺激穴區(qū)引發(fā)AP多于敏化的非穴區(qū)域（P＜0.05）。敏化態(tài)小腿內(nèi)側(cè)的非穴區(qū)接受2倍閾值的電刺激引發(fā)AP多于非敏化態(tài)的“膝前”和“上巨虛”所引發(fā)的AP(P＜0.05)。非敏化狀態(tài)下“膝前”和“上巨虛”穴區(qū)接受2倍

16、閾值的電刺激引發(fā)AP多于小腿內(nèi)側(cè)區(qū)非穴區(qū)域(P＜0.05)。
　　敏化狀態(tài)下“膝前”和“上巨虛”接受3倍閾值的電刺激引發(fā)C類纖維AP多于敏化的非穴區(qū)域（P＜0.05）。非敏化狀態(tài)下“膝前”和“上巨虛”穴區(qū)接受3倍閾值的電刺激引發(fā)AP多于非敏化的非穴區(qū)域（P＜0.05）。
　　3.結(jié)論
　　(1)內(nèi)臟發(fā)生病變或損傷，其下肢的敏化點主要位于其下合穴附近。穴區(qū)的敏化程度伴隨著疾病變化而相應(yīng)動態(tài)變化。
　　(2)刺激敏化