維醫(yī)異常黑膽質(zhì)型消化系統(tǒng)腫瘤患者外周血共性miRNA標(biāo)記物的研究.pdf

1、目的:在miRNA表達(dá)譜芯片結(jié)果的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步確定異常黑膽質(zhì)型消化系統(tǒng)腫瘤外周血共性miRNA標(biāo)志物，為實現(xiàn)傳統(tǒng)民族醫(yī)學(xué)的現(xiàn)代化和標(biāo)準(zhǔn)化做一份貢獻(xiàn)。
　　方法:收集異常黑膽質(zhì)型消化系統(tǒng)腫瘤患者外周血60例，非異常黑膽質(zhì)型消化系統(tǒng)腫瘤患者外周血64例，健康志愿者外周血21例，從白細(xì)胞分離RNA。小樣品通過miRNA表達(dá)譜芯片，篩選異常黑膽質(zhì)型消化系統(tǒng)腫瘤差異表達(dá)候選miRNA。其中選取7種候選miRNA，設(shè)計序列特異性引物，利用熒

2、光定量PCR方法檢測，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析，確定異常黑膽質(zhì)型消化系統(tǒng)腫瘤外周血共性miRNA標(biāo)志物。
　　結(jié)果:通過miRNA表達(dá)譜芯片分析，篩選23種上調(diào)表達(dá)和12種下調(diào)表達(dá)的異常黑膽質(zhì)型消化系統(tǒng)腫瘤患者外周血共性miRNA標(biāo)記物。本實驗選擇6個上調(diào)和1個下調(diào)的異常黑膽質(zhì)型消化系統(tǒng)腫瘤患者外周血共性miRNA。利用熒光定量PCR方法，定量檢測表達(dá)水平。與正常組比較，在異常黑膽質(zhì)型消化系統(tǒng)腫瘤組的表達(dá)量最高，在非異常黑膽質(zhì)型消化系統(tǒng)腫瘤組

3、表達(dá)量降低，除了miR-31-3p，其他6個miRNA的表達(dá)水平與miRNA表達(dá)譜芯片結(jié)果一致。與正常組比較，在異常黑膽質(zhì)型消化系統(tǒng)腫瘤組中miR-4725-5p，miR-4731-3p，miR-4701-3p，miR-4701-5p，miR-3162-3p等五種miRNA的表達(dá)水平具有統(tǒng)計學(xué)意義。與正常組比較，在非異常黑膽質(zhì)型消化系統(tǒng)腫瘤組中miR-4731-3p，miR-4701-3p，miR-4701-5p等三種miRNA的表達(dá)具

4、有統(tǒng)計學(xué)意義。與異常黑膽質(zhì)型消化系統(tǒng)腫瘤組比較，在非異常黑膽質(zhì)型消化系統(tǒng)腫瘤組中7種miRNA的表達(dá)均具有統(tǒng)計學(xué)意義。miR-4725-5p，miR-4731-3p，miR-4701-3p,miR-470-5p, miR-3162-3p等五種miRNA可能是異常黑膽質(zhì)型消化系統(tǒng)腫瘤特異性上調(diào)表達(dá)miRNA。
　　結(jié)論:異常黑膽質(zhì)型消化系統(tǒng)腫瘤發(fā)生發(fā)展與多種miRA的表達(dá)水平關(guān)系密切。miR-4725-5p，miR-4731-3p，