Notch1-Hes1-Hes5在漿液性卵巢癌中的表達(dá)及其臨床意義.pdf

1、研究背景： 卵巢癌仍是迄今致死率最高的婦科惡性腫瘤，總的五年生存率為44％，其中晚期患者不到30％，但有關(guān)卵巢癌的發(fā)病機(jī)理仍未闡明。目前紫杉醇聯(lián)合鉑類化療已成為卵巢癌標(biāo)準(zhǔn)的一線化療方案。統(tǒng)計(jì)分析顯示，晚期卵巢癌患者應(yīng)用紫杉醇聯(lián)合鉑類化療，近期緩解率高達(dá)80％以上，但絕大多數(shù)病人將復(fù)發(fā)并產(chǎn)生化療耐藥。獲得性化療耐藥是卵巢癌患者治療失敗和死亡的主要原因。解決卵巢癌化療耐藥問(wèn)題是目前全世界婦科腫瘤學(xué)家們面臨的嚴(yán)峻挑戰(zhàn)，進(jìn)一步揭示卵巢癌

2、化療耐藥的相關(guān)機(jī)制對(duì)于克服藥物耐受、提高療效及改善預(yù)后具有十分重要的意義。 卵巢癌的化療耐藥可能涉及多種機(jī)制，大致可分為：藥代動(dòng)力學(xué)因素、腫瘤微環(huán)境因素、癌細(xì)胞特異性因素三大類。癌細(xì)胞特異性因素是影響化療敏感性最關(guān)鍵的因素，已有研究發(fā)現(xiàn)多藥耐藥基因編碼的P-糖蛋白過(guò)表達(dá)、谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶表達(dá)增加、拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ活性的降低以及DNA修復(fù)能力的增強(qiáng)、微管相關(guān)蛋白異常均與化療耐藥密切相關(guān)。另外發(fā)現(xiàn)一些信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子的異常也與化療耐藥存

3、在相關(guān)性，如蛋白激酶B信號(hào)傳導(dǎo)通路、表皮生長(zhǎng)因子受體介導(dǎo)的信號(hào)傳導(dǎo)途徑、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β受體介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等。盡管在卵巢癌耐藥機(jī)制的研究方面取得了一定進(jìn)展，但尚不能完全解釋卵巢癌的耐藥，耐藥卵巢癌的臨床處理進(jìn)展不大。 Notch-Hes信號(hào)途徑對(duì)多種細(xì)胞分化的調(diào)節(jié)作用提示其可能在腫瘤發(fā)生中起重要作用，已經(jīng)有研究發(fā)現(xiàn)Notch1蛋白是許多腫瘤中最常檢測(cè)到的Notch家族成員，Notch1蛋白的異常與腫瘤的發(fā)生發(fā)展關(guān)系密切，Elise

4、n等首先發(fā)現(xiàn)在人類T淋巴母細(xì)胞白血病中有Notch1蛋白的高表達(dá)，并且在體內(nèi)和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中也證實(shí)，活化的Notch1蛋白可使正常細(xì)胞向惡性轉(zhuǎn)化，目前已經(jīng)在許多實(shí)體瘤和造血系統(tǒng)腫瘤中發(fā)現(xiàn)Notch1蛋白的異常表達(dá)。Hes1和Hes5作為Notch信號(hào)通路下游重要的效應(yīng)因子，它們的與腫瘤的發(fā)生發(fā)展關(guān)系的報(bào)道并不多見，并且在不同組織類型的細(xì)胞中，Hes基因的致瘤性尚無(wú)一致的意見，有研究發(fā)現(xiàn)Hes1蛋白的高表達(dá)可促進(jìn)膽管癌、小鼠白血病、肺癌細(xì)胞的

5、增殖，而在類癌瘤、乳腺癌、成神經(jīng)細(xì)胞瘤中則抑制腫瘤細(xì)胞的增殖。 Notch-Hes信號(hào)通路中的蛋白參與非實(shí)體腫瘤和實(shí)體腫瘤的發(fā)生發(fā)展過(guò)程，如T-ALL、乳腺癌、胰腺癌、肝癌、肺癌等，另外在宮頸癌中Notch-Hes信號(hào)通路參與從宮頸上皮內(nèi)瘤變向?qū)m頸癌的發(fā)生發(fā)展，并有望作為預(yù)測(cè)早期宮頸癌不良預(yù)后的因素。近期有研究發(fā)現(xiàn)Notch-Hes信號(hào)通路中的蛋白不僅參與了腫瘤的發(fā)生發(fā)展，且其表達(dá)水平與腫瘤細(xì)胞化療耐藥具有一定的關(guān)系，在多發(fā)性骨

6、髓瘤8個(gè)細(xì)胞系、人成纖維肉瘤細(xì)胞系、肝癌細(xì)胞系、人前列腺癌細(xì)胞系、黑色素瘤細(xì)胞系、結(jié)腸癌細(xì)胞系、膠質(zhì)母細(xì)胞系、肺癌細(xì)胞系、非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系、T細(xì)胞白血病細(xì)胞系、MCF7和MLOT4(T-ALL)細(xì)胞系均發(fā)現(xiàn)Notch-Hes信號(hào)通路與腫瘤的化療耐藥具有密切關(guān)系，同時(shí)研究發(fā)現(xiàn)在實(shí)體腫瘤(如乳腺癌、和造血系統(tǒng)腫瘤中，Notch1蛋白的異常表達(dá)與臨床預(yù)后存在一定的相關(guān)性。 目前有關(guān)Notch-Hes信號(hào)通路異常與卵巢癌化療耐藥研究較

7、少，本研究選擇上皮性卵巢癌中最常見的組織類型-漿液性卵巢癌為研究對(duì)象，研究癌組織中Notch1、Hes1和Hes5蛋白的表達(dá)及與卵巢癌化療耐藥的關(guān)系，以期為克服化療耐藥、改善病人的預(yù)后提供理論依據(jù)。 研究目的： 分別檢測(cè)正常卵巢組織、漿液性卵巢瘤和漿液性卵巢癌中Notch1、Hes1和Hes5蛋白的表達(dá)水平，初步探討Notch1、Hes1和Hes5蛋白的表達(dá)與漿液性卵巢癌的發(fā)生發(fā)展、化療反應(yīng)和預(yù)后的關(guān)系。 材料和

8、方法： 選取1999年至2004年在浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬婦產(chǎn)科醫(yī)院病理科存檔的卵巢漿液性腺癌70例組織，病人年齡24-74歲，中位年齡49歲，所有的卵巢漿液性腺癌病人手術(shù)前均未接受放療或化療及免疫治療，均進(jìn)行腫瘤細(xì)胞減滅術(shù)，理想減滅34例，不理想減滅36例，手術(shù)分期按照FIGO(2000年) Ⅲa期2例，Ⅲb期9例，Ⅲc期54例，Ⅳ期5例，高分化7例，中分化42例，低分化21例，45例復(fù)發(fā)，復(fù)發(fā)中8例進(jìn)行二次腫瘤細(xì)胞減滅術(shù)。術(shù)后進(jìn)

9、行隨訪(包括婦科檢查、CA125水平測(cè)定、超聲檢查和CT檢查等)，隨訪時(shí)間12-108個(gè)月，中位期45.5個(gè)月。所有的漿液性腺癌病人術(shù)后接受了以鉑類為基礎(chǔ)的聯(lián)合化療，化療方案PC(順鉑＋環(huán)磷酰胺)27例、PAC(順鉑＋阿霉素＋環(huán)磷酰胺)14例、TP(泰素＋順鉑)15例、泰素＋卡鉑14例。據(jù)體表面積計(jì)算用藥劑量，而卡鉑的劑量根據(jù)曲線下面積(即AuC)計(jì)算。70例漿液性卵巢癌病人具有完整的臨床病理資料包括患者的年齡、FIGO分期、病理分級(jí)、

10、最大腫瘤直徑、腹水量、殘余灶的大小和術(shù)前CA125等臨床病理參數(shù)。另選取同期治療的47例卵巢漿液性腺瘤、20例正常卵巢組織(因子宮肌瘤行附件切除)作為對(duì)照。通過(guò)免疫組織化學(xué)的方法檢測(cè)Notch1、Hes1和Hes5蛋白的表達(dá)情況。 結(jié)果： 1.Notch1蛋白在正常卵巢組織中不表達(dá)，表達(dá)在漿液性卵巢腺瘤和腺癌中，在漿液性卵巢癌組織中，Notch1蛋白有下降表達(dá)的趨勢(shì)，但與正?？椔殉步M和腺瘤組織中的表達(dá)情況分別進(jìn)行比較，均

11、無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，而正常卵巢組織和腺瘤組織中的表達(dá)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；Notch1蛋白表達(dá)與漿液性卵巢癌患者各臨床病理參數(shù)間均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。 2.Hes1蛋白在正常卵巢組織不表達(dá)，在漿液性卵巢腺瘤和腺癌均中有表達(dá)，但正常卵巢組織和漿液性腺瘤間比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，而正常卵巢組織和漿液性腺癌及漿液性腺瘤和腺癌間比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)；Hes1蛋白表達(dá)與漿液性卵巢癌患者

12、各臨床病理參數(shù)間均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。 3.Hes5蛋白在正常卵巢組織、漿液性卵巢腫瘤中均有表達(dá)，正常卵巢組織、漿液性卵巢瘤和漿液性卵巢癌組織中表達(dá)均有差異(P<0.05)；Hes5蛋白的表達(dá)與臨床病理參數(shù)之間未見顯著性差異(P>0.05)。 4.Notch1、Hes1和Hes5蛋白的表達(dá)在漿液性卵巢瘤和漿液性卵巢癌中均無(wú)相關(guān)性(P>0.05)。 5.Notch1、Hes1和Hes5蛋白的表達(dá)與漿液性卵

13、巢癌患者化療反應(yīng)均無(wú)明顯相關(guān)性(P>0.05)而Hes5蛋白的表達(dá)與漿液性卵巢癌患者的鉑類耐藥狀態(tài)具有相關(guān)性(P<0.05)。 6.Notch1、Hes1和Hes5蛋白的表達(dá)與漿液性卵巢癌患者的總生存期和無(wú)瘤生存期均無(wú)顯著性差異(P>0.05)。 結(jié)論： 1.Notch1蛋白在漿液性卵巢癌組織中的表達(dá)與正常卵巢組織相比，有升高趨勢(shì)，但與漿液性腺瘤比較，Notch1蛋白表達(dá)有略下降趨勢(shì)，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；與正常卵巢組