受體酪氨酸激酶Axl及配體Gas6在甲狀腺乳頭狀癌中的表達(dá)及意義.pdf

1、目的:通過(guò)檢測(cè)Axl、Gas6在甲狀腺乳頭狀癌(papillary thyroid carcin-omas，PTC)、結(jié)節(jié)性甲狀腺腫(Nodular Goiter，NG)及瘤旁正常組織中的表達(dá);在PTC、NG和正常人血清中的含量，分析和探討兩者在甲狀腺乳頭狀癌發(fā)生、發(fā)展中的作用及相關(guān)性。對(duì)Axl與Gas6作為PTC分子標(biāo)記物的可行性進(jìn)行探討，尋找PTC早期診斷的marker，為甲狀腺癌的早期診斷及預(yù)后提供新思路。
　　方法:

2、>　　1、病例收集與分組:收集2013年1月1日～2014年1月1日間由河北北方學(xué)院附屬第一醫(yī)院手術(shù)切除并經(jīng)病理診斷證實(shí)且臨床病理資料完整的54例PTC標(biāo)本及血液（PTC組），16例結(jié)節(jié)性甲狀腺腫標(biāo)本及血液(nodular goiter，NG組)，70例瘤旁正常組織標(biāo)本及10例健康人血液(normal thyroid tissues,N組)。
　　2、應(yīng)用Western blot、免疫組織化學(xué)SP法檢測(cè)Axl與Gas6蛋白在PTC

3、、NG及瘤旁正常組織中的表達(dá)，并結(jié)合完整的臨床病理資料，分析二者的變化與臨床病理特征的關(guān)系。Real-time PCR法檢測(cè)三組中AxlmRNA與Gas6mRNA的轉(zhuǎn)錄水平。
　　3、ELISA法檢測(cè)PTC、NG及正常人血清Axl與Gas6的含量，分析二者的血清含量變化與PTC臨床病理的關(guān)系。
　　4、應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析，數(shù)據(jù)結(jié)果以(x)±s表示，各組數(shù)據(jù)行ANOVA方差分析及q檢驗(yàn)。Axl與Ga

4、s6的相關(guān)性分析采用Spearman非參數(shù)相關(guān)分析。免疫組化結(jié)果陽(yáng)性率的比較采用卡方檢驗(yàn)，雙側(cè)P＜0.05確定為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果:
　　1、免疫組織化學(xué)染色結(jié)果:所有PTC樣本均有Axl強(qiáng)弱不等的表達(dá)。Axl陽(yáng)性主要表達(dá)于PTC細(xì)胞的細(xì)胞膜上，少數(shù)存在于胞質(zhì)中，在NG及瘤旁正常組織中Axl表達(dá)為弱陽(yáng)性或者陰性。Gas6陽(yáng)性主要表達(dá)于PTC細(xì)胞的胞質(zhì)，在結(jié)節(jié)性甲狀腺腫及瘤旁正常組織中均為陰性表達(dá)。兩者在PTC的陽(yáng)性表

5、達(dá)率明顯高于結(jié)甲和瘤旁組(P＜0.01)，結(jié)節(jié)性甲狀腺腫與瘤旁正常組織中兩者的表達(dá)無(wú)明顯差別（P＞0.05）。Axl、Gas6的異常表達(dá)與PTC患者年齡、性別及腫瘤大小無(wú)關(guān)(P＞0.05)，與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、病理分期有關(guān)(P＜0.05)。
　　2、Western Blot檢測(cè)結(jié)果:Axl與Gas6蛋白在PTC組織中的表達(dá)量明顯高于其在NG及癌旁正常組織，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，兩者在NG及癌旁正常組織中的表達(dá)無(wú)明顯的差異性

6、(P＞0.05)。
　　3、Real-time PCR檢測(cè)結(jié)果:AxlmRNA與Gas6mRNA在PTC組織中的轉(zhuǎn)錄水平明顯高于結(jié)節(jié)性甲狀腺腫及癌旁正常組織，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，兩者在結(jié)節(jié)性甲狀腺腫及癌旁正常組織中的轉(zhuǎn)錄水平無(wú)明顯的差異性(P＞0.05)。
　　4、ELISA檢測(cè)結(jié)果:Axl與Gas6在PTC患者血清中的含量明顯高于結(jié)節(jié)性甲狀腺腫及正常人血清，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，結(jié)節(jié)性甲狀腺腫

7、與正常組人血清含量無(wú)明顯差異(P＞0.05)。PTC患者血清中Axl、Gas6的含量與患者年齡、性別、腫瘤大小無(wú)關(guān)(P＞0.05)，與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)(P＜0.05)。
　　5 Axl與Gas6的蛋白的相關(guān)性分析:在PTC患者中Axl和Gas6的蛋白表達(dá)水平呈正相關(guān)(r=0.358，P=0.015)
　　結(jié)論:
　　1、PTC、NG組織中均檢測(cè)到Axl和Gas6，兩者在PTC中的表達(dá)量高于NG。在PTC中Axl、Ga