基質金屬蛋白酶3對急性眼高壓后大鼠視網(wǎng)膜節(jié)細胞存活的影響.pdf

1、目的:(1)研究正常大鼠視網(wǎng)膜中基質金屬蛋白酶3(Matrixmetalloproteinase3，MMP3)的定位以及在急性眼高壓后大鼠視網(wǎng)膜中的表達情況，(2)檢測MMP3對急性眼高壓后視網(wǎng)膜節(jié)細胞存活的影響。
　　方法:所有的SD大鼠被隨機分成正常對照組、假手術組、急性眼高壓組、急性眼高壓+藥物組和急性眼高壓+溶劑組。急性眼高壓組的大鼠前房通過注射無菌生理鹽水升高眼內壓至110mmHg并維持60min后緩慢降壓;急性眼高壓+

2、藥物組和急性眼高壓+溶劑組大鼠在前房注射生理鹽水前30min腹腔注射NNGH(N-Isobutyl-N-(4-methoxyphenylsulfonyl)glycyl hydroxamic acid，一種MMP3高靈敏度抑制劑）和3％DMSO，之后以1次/8h給藥1d。;對照組大鼠不做任何處理;假手術組大鼠刺穿角膜后壓力維持在20mmHg，不加壓。動物分別存活6h、1d、3d、7d后處死。用western blotting、免疫組織化學

3、、免疫熒光和免疫熒光雙標來檢測MMP3在正常成年大鼠視網(wǎng)膜中的分布和它對急性眼高壓后視網(wǎng)膜節(jié)細胞存活的影響。
　　結果:
　　1.MMP3在正常成年大鼠視網(wǎng)膜中其陽性產(chǎn)物主要分布在神經(jīng)纖維層、節(jié)細胞層、內網(wǎng)層、內核層和外網(wǎng)層的神經(jīng)元和神經(jīng)膠質細胞中。MMP3陽性產(chǎn)物在節(jié)細胞層與NeuN陽性產(chǎn)物明顯雙標;在內核層邊緣部與部分Calbindin陽性產(chǎn)物和Parvalbumin陽性產(chǎn)物雙標;在內網(wǎng)層和內核層與PKC-α陽性產(chǎn)物雙標

4、;MMP3陽性產(chǎn)物在內外網(wǎng)層與Synaptophysin陽性產(chǎn)物明顯雙標;而在外核層MMP3的陽性產(chǎn)物與Rhodopsin陽性產(chǎn)物沒有明顯雙標;在節(jié)細胞層和神經(jīng)纖維層中，MMP3與GFAP陽性產(chǎn)物明顯雙標，與部分GS陽性產(chǎn)物雙標;在內網(wǎng)層中，與部分CD11b陽性產(chǎn)物雙標。
　　2.急性眼高壓后MMP3的表達在早期呈現(xiàn)升高的趨勢，在3d時達到頂峰，然后下降。
　　3.NNGH干預后，大鼠視網(wǎng)膜中MMP3的表達在急性高眼壓1d和