鋁佐劑的性質(zhì)研究及其在重組疫苗配制中的應(yīng)用.pdf

1、佐劑是指先于抗原或與抗原混合同時注入動物體內(nèi)，能夠改變或增強機體對該抗原的免疫應(yīng)答，發(fā)揮輔助作用的一類物質(zhì)。疫苗中加入佐劑可以為機體提供更加長久的免疫保護。自1926年Glenny等發(fā)現(xiàn)鋁鹽復(fù)合物吸附沉淀的白喉毒素(DT)懸液要比類毒素本身具有更好的免疫原性起，鋁鹽復(fù)合物作為疫苗佐劑已有80多年的歷史了。鋁佐劑作為第一個被美國食品藥品監(jiān)督局FDA批準(zhǔn)的人用佐劑，仍然是世界上公認最安全，應(yīng)用最廣泛的佐劑。
　　本研究嘗試配制不同類型

2、的磷酸鹽緩沖液和鋁鹽溶液，設(shè)定不同的溫度，利用蠕動泵將兩類溶液在不同的混合器中混合，使用氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH，配制出若干批次具有不同理化性質(zhì)的鋁佐劑;測定它們的pH，粒徑大小和PZC等各項理化參數(shù)，篩選出四種顆粒較小的鋁佐劑，編號25～28，研究表明其顆粒大小可在10～20μm左右，PZC介于氫氧化鋁和磷酸鋁佐劑之間;考察了高溫高壓滅菌對其理化性質(zhì)的影響，結(jié)果表明除25號佐劑外，其他三種佐劑的pH和粒徑等性質(zhì)在滅菌后沒有發(fā)生明顯變化。

3、>　　本研究將四種鋁佐劑分別與本實驗室純化的HPV16L1、18L1和HEV239病毒樣顆粒混合后配制出HPV16、18和HEV疫苗?？乖铰蕼y定實驗結(jié)果表明各種鋁佐劑對不同病毒樣顆粒的吸附率為60％-80％左右，部分組合可達90％;解離實驗表明病毒樣顆粒在解離液作用下的大部分解吸附比率大約為70％上下?？疾觳煌瑴囟认氯愐呙绲鞍椎幕钚裕l(fā)現(xiàn)26和27號佐劑配制的疫苗蛋白活性優(yōu)于25和28號佐劑。DSC差示掃描熱量分析實驗結(jié)果表明4種

4、HPV16疫苗Tm略顯差異，約70℃左右;4種HPV18疫苗Tm值接近，集中在78℃;4種HEV疫苗Tm值差異性較大，HEV25、26約75℃，HEV27、28約60℃，表明鋁佐劑會影響病毒樣顆粒的穩(wěn)定性。研究顯示HPV16/18臨床用苗和完成Ⅲ期臨床的HEV疫苗益可寧Hecolin(R)的pH，粒徑大小和PZC等各項理化參數(shù)與自行配制的疫苗相當(dāng)。自行配制的HPV16/18疫苗免疫原性略高于臨床用苗，配制的HEV疫苗也與即將商業(yè)化的HE