AQP1與綠膿桿菌毒素致病機(jī)理的關(guān)聯(lián)性研究——綠膿桿菌毒菌對(duì)AQP1的影響.pdf

1、目的：
　　 水的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)對(duì)維持細(xì)胞正常代謝具有重要的作用。1992年以來大量研究證實(shí)機(jī)體內(nèi)存在特異性的水通道蛋白家族(Aquaporins，AQPs)。目前已經(jīng)從哺乳動(dòng)物的組織中鑒定出13種水通道蛋白即AQPO～12。AQP1在肺內(nèi)液體的吸收及轉(zhuǎn)運(yùn)方面具有重要作用，它在保持細(xì)胞內(nèi)外環(huán)境的穩(wěn)定扮演著重要的角色，并且參與完成一些機(jī)體重要的生理功能。比如介導(dǎo)藥理作用，參與水腫形成等。但AQP1與綠膿桿菌毒素之間是否存在著聯(lián)系，現(xiàn)在還

2、有待于進(jìn)一步研究。
　　 綠膿桿菌在醫(yī)院目前仍然是發(fā)病率和死亡率較高的一種病原體。在重癥監(jiān)護(hù)病房，綠膿桿菌(PA)在生物體的肺、血液、泌尿道、手術(shù)部位及軟組織感染中排名居前五位。其中呼吸道感染最常見，其多重耐藥性(MDR)，給臨床治療帶來相當(dāng)?shù)睦щy，并增加了發(fā)病率和死亡率。故研究綠膿桿菌毒素的致病機(jī)理有著重要的意義。
　　 本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用綠膿桿菌毒素對(duì)這種AQP1功能表達(dá)受限制的細(xì)胞所造成的表型變化，初步探討綠膿桿菌毒素對(duì)小

3、鼠成纖維細(xì)胞AQP1的作用。
　　 方法：
　　 實(shí)驗(yàn)分組：(1)空白對(duì)照組：未加任何干擾因素；(2)綠膿桿菌毒素組：加入不同濃度的綠膿桿菌毒素：100ng/mL and500ng/mL and1000ng/mL，分別在0小時(shí)，4小時(shí)，6小時(shí)后收取細(xì)胞，觀察細(xì)胞形態(tài)變化，并檢測(cè)AQP1蛋白表達(dá)量的變化。
　　 Western Blot檢測(cè)AQP1的蛋白表達(dá)變化。
　　 結(jié)果：
　　 加入同一種濃度

4、的綠膿桿菌毒素后，隨著時(shí)間的增加，4小時(shí)細(xì)胞AQP1的表達(dá)明顯增高，6小時(shí)細(xì)胞AQP1的表達(dá)進(jìn)一步增高，其中6小時(shí)AQP1的表達(dá)增高更明顯；同一時(shí)間下，隨著綠膿桿菌毒素濃度的增加(100ng/mL、500ng/mL、1000ng/mL)，AQP1的表達(dá)逐漸增加：即500ng/mL組AQP1的表達(dá)明顯增高，1000ng/mL組AQP1的表達(dá)進(jìn)一步增高。
　　 結(jié)論：
　　 加入綠膿桿菌毒素后可引起AQP1的表達(dá)增加，說明綠