PEP、DOP-PCR單細胞多基因位點檢測研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、全文由兩部分組成:第一部分,單細胞PEP多基因位點檢測的研究.目的:探索建立單細胞PEP全基因擴增,后續(xù)巢式PCRβF地中海貧血CD17和nt-28突變基因及連鎖基因(ATTTT)、18和21號染體短串聯(lián)重復(fù)序列D18S51、D21S11和D21S1411位點檢測技術(shù),考察單細胞PEP同步檢測上述基因位點以及囊性纖維病CF△F508及連鎖基因(GATT)、杜氏肌營養(yǎng)不良癥DMD基因外顯子17和48、Y染色體性別決定基因SRY的擴增準確率

2、,分析單細胞PEP擴增全基因組DNA的完整性.結(jié)果:1、成功建立單細胞PEP全基因組擴增,后續(xù)巢式PCRβ地中海貧血CD17Tnt-28突變基因及連鎖基因(ATTTT)、18和21 號染色體短患聯(lián)重復(fù)序列D18S51、D21S11和S21S1411位點檢測技術(shù).2、成功進行單細胞PEP-巢式PCR,上述基因位點以及囊性纖維病CF△F508及連鎖基因(GATT)、杜氏肌營養(yǎng)不良癥DMD基因外顯子17和48、Y染色體性別決定基因SRY10個

3、位點的同步分析,單個淋巴細胞和單個胚胎細胞擴增準確率分別達97.17﹪(583/600)和91.58﹪(174/190).3、單個淋巴擴增PEP后續(xù)巢式PCR擴增準確率高于單個胚胎細胞,假陽性率低于胚胎細胞,兩者有顯著性差異(P<0.05).第二部分,單細胞DOP-PCR多基因位點檢測的研究.目的:探索建立單細胞DOP-PCR全基因組擴增,后續(xù)巢式PCR上述10個基因位點的同步檢測技術(shù),考察其護增準確率,分析單細胞DOP-PCR擴增全基

4、因組DNA的完整性.通過與單細胞PEP上述各疾病突變基因或位點同步檢測成功率的比較,考察其在CGH檢測染色體非整倍體的同時,檢測或篩查單基因病的可行性.結(jié)論:1、單細胞PEP后續(xù)巢式PCR同步檢測囊性纖維病CF△F508及連鎖基因(GATT)、β地中海貧血CD17和nt-28突變基因及連鎖基因(ATTTT)、杜氏肌營養(yǎng)不良癥DMD基因外顯子17和48、Y染色體決定基因SRY、18和21號染色體短串聯(lián)重復(fù)序列D18S51、D21S11和D

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