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文檔簡介
1、目的:通過檢測Annexin A1(ANXA1)mRNA及蛋白在卵巢癌紫杉醇耐藥與敏感細胞及組織中的表達,探討ANXA1與卵巢癌紫杉醇耐藥之間的關(guān)系,尋找預(yù)測卵巢癌紫杉醇耐藥的指標及為臨床上逆轉(zhuǎn)卵巢癌紫杉醇耐藥提供理論及實驗依據(jù)。
方法:
1.采用MTT法檢測卵巢癌紫杉醇敏感細胞系(SKOV3),耐藥細胞系(SKOV3/Taxol-25)的紫杉醇半數(shù)抑制濃度(IC50)及耐藥指數(shù)(RI)。
2.在前期研究基
2、礎(chǔ)上(蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)比較SKOV3/Taxol-25和SKOV3的蛋白質(zhì)表達的差異,發(fā)現(xiàn)ANXA1蛋白在SKOV3/Taxol-25中表達明顯下調(diào),提示ANXA1蛋白表達下調(diào)可能與卵巢癌紫杉醇耐藥相關(guān)),采用Western blot及Real Time-PCR(RT-PCR)檢測SKOV3/Taxol-25及SKOV3中ANXA1蛋白及mRNA的表達。
3.采用回顧性研究的方法,選擇同期手術(shù)切除的組織標本,卵巢癌紫杉醇耐藥者2
3、0例(耐藥組),敏感者22例(敏感組),免疫組化法檢測ANXA1蛋白在兩組患者卵巢癌組織中的表達,分析ANXA1蛋白的表達與卵巢癌臨床病理特征的關(guān)系。
結(jié)果:
1.MTT結(jié)果顯示:SKOV3/Taxol-25耐藥性良好,此細胞株可以進行后續(xù)實驗。
2.Western blot及RT-PCR結(jié)果顯示:ANXA1蛋白及mRNA在SKOV3/Taxol-25中的表達低于SKOV3中的表達,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0
4、.05)。
3.免疫組化結(jié)果顯示:耐藥組和敏感組ANXA1蛋白表達陽性率分別為70%和95.5%,兩者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05);在卵巢癌組織中,ANXA1蛋白的陽性表達與卵巢癌組織類型、病理分級無關(guān)(p>0.05),而與臨床分期相關(guān)(p<0.05);26例低分化卵巢癌中,耐藥組與敏感組ANXA1蛋白陽性表達率分別為72.7%(8/11)及93.3%(14/15)(p>0.05)。
結(jié)論:
1.A
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