Bacillus subtilis NH的分離及玉米皮發(fā)酵參數(shù)的優(yōu)化研究.pdf

1、玉米皮是玉米加工玉米淀粉所得到的副產(chǎn)品，具有來(lái)源豐富，成本低廉的特點(diǎn)，是一種潛在的飼料資源，但其粗纖維含量高、適口性差、難于被動(dòng)物消化利用。本試驗(yàn)旨在利用微生物發(fā)酵改善玉米皮營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和適口性，降低玉米皮中的粗纖維和霉菌毒素等的含量，增加飼料中的活菌數(shù)，提高玉米皮的利用價(jià)值。試驗(yàn)的內(nèi)容與結(jié)果如下:
　　1.產(chǎn)纖維素酶菌株的分離與鑒定。采用剛果紅染色法分離產(chǎn)纖維素酶的菌株，并通過(guò)革蘭氏染色法和16srDNA測(cè)序進(jìn)行種屬鑒定，并對(duì)其酶活

2、進(jìn)行測(cè)定。試驗(yàn)結(jié)果表明，分離獲得了一株產(chǎn)纖維素酶的菌株，此菌株為革蘭氏陽(yáng)性菌;測(cè)序結(jié)果進(jìn)行同源性比對(duì)，該片段的核苷酸序列分析結(jié)果表明，該菌株的16srDNA核苷酸序列與枯草芽孢桿菌(Bacillussubtils)的同源性為95％。命名為BacillussubtilsNH。纖維素酶活力測(cè)定的結(jié)果顯示，BacillussubtilsNH的纖維素酶活性在24h時(shí)最高，達(dá)到0.533±0.207U/mL。
　　2.玉米皮發(fā)酵的參數(shù)優(yōu)化研

3、究。試驗(yàn)用BacillussubtilsNH、凝結(jié)芽孢桿菌（Bacilluscoagulans）和卷曲乳酸菌（Lactobacilluscrispatus）3種益生菌等比例混合制備發(fā)酵菌劑。玉米皮、米糠、棉粕按20∶3∶3制備發(fā)酵底料，發(fā)酵采用室溫固體發(fā)酵。為優(yōu)化發(fā)酵參數(shù)，發(fā)酵試驗(yàn)分別以3％、5％、7％和9％的接種量接種發(fā)酵，檢測(cè)不同的接種量對(duì)于發(fā)酵效果的影響;以30％、40％、50％、60％的料水比發(fā)酵，檢測(cè)不同料水比對(duì)于發(fā)酵效果的影

4、響;以1d、3d、5d和7d四個(gè)發(fā)酵時(shí)間進(jìn)行發(fā)酵，檢測(cè)不同發(fā)酵時(shí)間對(duì)于發(fā)酵效果的影響。檢測(cè)指標(biāo)包括營(yíng)養(yǎng)成分含量、pH值、活菌數(shù)、霉菌毒素和感官評(píng)價(jià)等。試驗(yàn)結(jié)果表明，發(fā)酵參數(shù)優(yōu)化中，以接菌量為自變量時(shí)，混合菌劑接種量為7％時(shí)發(fā)酵效果最好，活菌數(shù)達(dá)到43.00×108/g，NDF和ADF的值分別為41.5％和14.2％;以料水比為自變量時(shí)，料水比為50％時(shí)發(fā)酵效果最好，活菌數(shù)達(dá)到3.5×108/g，活菌數(shù)高于其他處理組，NDF和ADF的值分

5、別達(dá)到38.5％和13.8％，比原料有明顯降低;以發(fā)酵時(shí)間作為自變量時(shí)，發(fā)酵時(shí)間為7d時(shí)發(fā)酵效果最好，活菌數(shù)達(dá)到24.5×108/g，NDF和ADF的值分別達(dá)到38.5％和13.8％，比原料有明顯降低。因此得出結(jié)論，在發(fā)酵玉米皮的參數(shù)優(yōu)化中以接菌量為7％，料水比為50％，發(fā)酵時(shí)間為7d時(shí)，發(fā)酵效果最佳，且發(fā)酵后飼料氣味、顏色、質(zhì)地相比原料明顯有所改善。除此之外，活菌數(shù)明顯增加，纖維素酶活性、CP含量升高，干物質(zhì)、NDF和ADF的含量及P