共振光散射技術測定藥物及生物分子新方法的研究與應用.pdf

1、使用普通的熒光光度計進行測量的共振光散射(Resonance light scattering, RLS)技術是1993年由Pasternack等人提出的。由于RLS技術具有實驗操作簡單,方法靈敏度高,選擇性好等優(yōu)點而受到了廣泛的關注。近幾年來,RLS法作為一種新興的分析測試方法,被不斷地應用到超分子化學、物理化學、生命科學等領域中,并逐步顯示出了巨大的應用潛能。進一步研究并開發(fā)出靈敏度高、選擇性佳、穩(wěn)定性好、操作簡便的RLS測定新方法

2、和新體系已然成為分析化學工作者追求的科研目標之一。
　　本學位論文的主要內容是采用新興的RLS技術建立了八種新的生物與藥物分子的測定方法,并利用多種光譜學手段探討了分子間的作用機理。全文分為共振光散射技術在藥物與生物分子的分析研究兩個部分。
　　第一部分,藥物分子及藥物中微量元素的分析研究
　　本文首次建立了以二價錳離子為探針,基于較為少見的RLS信號減弱現(xiàn)象的藥物分子蘆丁的定量分析方法。另外還利用氨基比林-十六烷基三

3、甲基溴化胺-蘆丁的三體系建立了基于 RLS信號增強的分析測定方法。分別研究了反應的各種影響因素以及適宜的反應條件。在pH7.5的溶液中,二價錳離子與蘆丁發(fā)生相互作用,引起 RLS信號減弱的現(xiàn)象,降低的RLS強度與蘆丁的濃度呈良好的線性正比關系,由此建立的蘆丁測定方法的檢出限為0.42μg/mL,線性范圍為0.49-24.4μg/mL。而在氨基比林-十六烷基三甲基溴化胺-蘆丁的RLS體系中,表面活性劑以橋聯(lián)作用將三者結合并引起強烈的RLS

4、信號增強,該方法的檢出限為0.12μg/mL,線性范圍為0.4-24.0μg/mL。本文提出的兩種蘆丁測定方法較傳統(tǒng)的蘆丁分析方法靈敏度高,選擇性好,可以在較寬的范圍內準確測定出蘆丁的含量。
　　二價銅離子以及Gemini型兩性離子表面活性劑磷酸二酯季銨鹽在最佳實驗條件下可與藥物分子姜黃素發(fā)生反應并引起強烈的共振光增強,且RLS增強的強度與姜黃素的濃度在一定范圍內成線性正比關系。兩個實驗測定姜黃素的檢出限分別為:0.07μg/mL

5、和2.6 ng/mL;線性范圍分別為:0.4~60μg/mL和0.08~60μg/mL。從實驗結果可見,以磷酸二酯季銨鹽為探針建立的姜黃素的RLS測定方法更加靈敏且線性范圍更寬。
　　本文還建立了測定藥物中的活性成分鉍的RLS新方法。實驗發(fā)現(xiàn),PO43+與Bi(III)可以發(fā)生相互作用并形成離子締合物使得RLS信號明顯增強?；诖爽F(xiàn)象,本文利用極為普通廉價的磷酸作為RLS探針,建立了一種新的,快速簡便的測定溶液中微量鉍的分析方法,

6、實驗測定出鉍的檢出限為2.4 ng/mL,線性范圍在0.05~30μg/mL之間。該方法操作簡單,靈敏度高,選擇性和重現(xiàn)性好,可直接用于胃藥中鉍含量的測定。
　　第二部分,生物分子的分析研究
　　本文研究發(fā)現(xiàn),糊精和生物多糖海藻酸鈉具有在溶液中發(fā)生自身聚集特性并使得自身粒徑變大從而導致RLS信號增強。在其它條件一定時,RLS信號的強度與散射粒子的濃度呈線性正比關系。由此我們確定了用RLS法測定溶液中糊精和生物多糖海藻酸鈉濃度

7、的定量基礎。糊精和多糖測定的檢出限分別為0.012 mg/mL和0.15μg/mL;線性范圍分別為0.2~14 mg/mL和0.05~18 mg/mL。這是RLS方法在免探針的情況下建立的分析測定實驗,進一步簡化了操作的同時是新興RLS技術的革新。
　　以致癌物質聯(lián)苯胺為RLS探針研究了蛋白質與環(huán)境化學污染物的相互作用,并利用它們在酸性條件下產生的增強的RLS光譜信號建立了一種測定蛋白質的RLS新方法。在波長392.0 nm處,聯(lián)