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文檔簡介
1、氟是一種原子量為19.00的鹵族元素,也是人體必需的微量元素之一。在已發(fā)現(xiàn)的100多種元素中,氟是最活潑的元素,幾乎能與所有的元素發(fā)生化學反應,因此其多以氟化物的形式廣泛分布于自然界。氟缺乏或過剩均可引起疾病。適量的氟有利于預防齲齒、維持鈣磷代謝、保持神經沖動的傳導,過量的氟是一種全身性毒物,可損害機體多器官系統(tǒng)。多年來,人們多以氟對骨骼、牙齒等骨相組織的損害作為地方性氟中毒的研究重點。近年來,隨著氟及其化合物的廣泛應用,使得人們越來越
2、多地暴露于高氟環(huán)境中,過量的氟對機體非骨相組織的損害,特別是對生殖系統(tǒng)的損害作用,日益受到人們的重視。目前,氟致雄性生殖毒性的研究,主要側重于氟對睪丸結構的破壞和精子數(shù)量、質量的改變,以及內分泌干擾等方面,而從分子水平上進行研究的報道較少。 鋅是一種原子量為65.39的金屬元素,也是人體生命必需的微量元素之一,主要以化合物的形式存在于自然界中。大量的研究表明:適量的鋅能通過抗氧化作用,減輕自由基對組織的損傷,提高機體免疫力;并能
3、使機體內結合態(tài)氟增加,離子態(tài)氟降低,從而減少氟的吸收,降低體內氟負荷,拮抗氟對機體的毒性作用。Fas和FasL是介導細胞凋亡的一對膜蛋白,生精細胞凋亡增多時,F(xiàn)as和FasL表達明顯增強。適量的鋅是凋亡抑制因子,可以拮抗毒物和衰老引起的生精細胞凋亡,明顯拮抗鎘、汞、鉛等環(huán)境毒物所致的生殖損害。有關鋅對氟的拮抗作用,主要集中于鋅對氟的骨相損害和慢性毒作用的拮抗研究,而鋅對氟生殖損傷的拮抗研究,目前報道尚少。因此,研究鋅對氟的雄性生殖毒性的
4、拮抗作用,探討鋅對氟的最佳拮抗劑量,可以為氟中毒的預防和治療提供基礎資料和科學依據(jù)。 材料和方法;1劑量分組:選用4~5周齡雄性Wistar大鼠50只,體重55g~70g,隨機分為5組,每組10只,即對照組、染氟組、染氟加低鋅組、染氟加中鋅組、染氟加高鋅組。對照組給予去離子水;染氟組、染氟加低鋅組、染氟加中鋅組和染氟加高鋅組采用的劑量和試劑分別為:25mg/kgBw·d氟化鈉溶液、25mg/kgBw氟化鈉溶液·d+4mg/kgB
5、w硫酸鋅溶液·d、25mg/kgBw氟化鈉溶液·d+20mg/kgBw·d硫酸鋅溶液、25mg/kgBw·d氟化鈉溶液+50mg/kgBw·d硫酸鋅溶液。 2染毒方法及檢測指標:按上述染毒劑量,各組大鼠均采用灌胃的方法,染毒6周后,稱重、麻醉并處死動物,解剖取睪丸、附睪,稱重并計算其臟器系數(shù),然后進行精子計數(shù)、精子活動率測定和精子畸形率的分析;采用放射免疫的方法檢測血清睪酮含量;檢測血清中銅鋅超氧化物歧化酶的活性和睪丸中乳酸脫氫
6、酶的活力;用氟離子選擇電極法測定睪丸中氟的含量;用免疫組化法(ICH)檢測睪丸中Fas蛋白表達水平。 3各項指標的統(tǒng)計學處理:各組間精子畸形率和活動率的比較,選用x2檢驗和x2分割的方法。其它數(shù)據(jù)采用單因素方差分析或非參數(shù)檢驗和近似t檢驗的方法,取α=0.05為顯著性檢驗水準。 結果;1大鼠體重、睪丸和附睪重量及其臟器系數(shù)分析結果:染氟加中鋅組附睪臟器系數(shù)高于染氟組,且差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。染氟加高鋅組大鼠體
7、重和睪丸重量低于對照組,且差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);染氟加低鋅組大鼠睪丸重量低于對照組,且差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。 2大鼠精子計數(shù)、精子活動率和畸形率分析結果:2.1精子計數(shù)結果:(1)氟加鋅各劑量組與氟組比較:氟加中鋅組精子計數(shù)顯著高于氟組,且差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。氟加低鋅組和氟加高鋅組精子計數(shù)與氟組比較,差異無統(tǒng)計學意義。(2)染毒各組精子計數(shù)與對照組比較:氟組低于對照組,差異有統(tǒng)計學意義(P<
8、0.05)。氟加中鋅組與對照組比較,差異無統(tǒng)計學意義。氟加低鋅組和氟加高鋅組精子計數(shù)均顯著低于對照組,且差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。 2.2精子活動率結果:(1)氟加鋅各劑量組精子活動率與氟組比較:氟加中鋅組顯著高于氟組,且差異有統(tǒng)計學意義(P<0.005)。氟加低鋅組與氟組比較,差異無統(tǒng)計學意義。氟加高鋅組顯著低于氟組,且差異有統(tǒng)計學意義(P<0.005)。(2)染毒各組精子活動率與對照組比較:氟組顯著低于對照組,差異有
9、統(tǒng)計學意義(P<0.005)。氟加中鋅組與對照組比較,差異無統(tǒng)計學意義。氟組、氟加低鋅組和氟加高鋅組均顯著低于對照組,且差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.005)。 2.3精子畸形率結果:(1)氟加鋅各劑量組精子畸形率與氟組比較:氟加中鋅組和氟加低鋅組顯著低于氟組,且差異有統(tǒng)計學意義(P<0.005)。氟加高鋅組與氟組比較,差異無統(tǒng)計學意義。(2)染毒各組精子畸形率與對照組比較:氟加中鋅組與對照組比較,差異無統(tǒng)計學意義。氟組、氟加低鋅
10、組和氟加高鋅組均顯著高于對照組,且差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.005)。 3大鼠血清睪酮含量測定結果:(1)氟加鋅各劑量組血清睪酮與氟組比較:三組均顯著高于氟組,且差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。(2)染毒各組血清睪酮與對照組比較:氟加鋅各劑量組均顯著高于對照組,且差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。氟組與對照組比較,差異無統(tǒng)計學意義。 4大鼠血清銅鋅超氧化物歧化酶檢測結果:(1)氟加鋅各劑量組血清CuZn-SOD活
11、性與氟組比較:氟加中鋅組高于氟組,且差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。氟加低鋅組和氟加高鋅組與氟組比較,差異無統(tǒng)計學意義。(2)染毒各組血清CuZn-SOD活性與對照組比較:氟加中鋅組與對照組比較,差異無統(tǒng)計學意義。氟組、氟加低鋅組和氟加高鋅組均低于對照組,且差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。 5大鼠睪丸氟測定結果:(1)氟加鋅各劑量組睪丸氟與氟組比較:氟加中鋅組低于氟組,且差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。氟加高鋅組高于氟組
12、,且差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。氟加低鋅組與氟組比較,差異無統(tǒng)計學意義。(2)染毒各組睪丸氟與對照組比較:氟加中鋅組與對照組比較,差異無統(tǒng)計學意義。氟組、氟加低鋅組和氟加高鋅組均高于對照組,且差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。 6大鼠睪丸乳酸脫氫酶活力測定結果:(1)氟加鋅各劑量組睪丸LDH活力與氟組比較:氟加中鋅組高于氟組,且差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。氟加低鋅組和氟加高鋅組與氟組比較,差異無統(tǒng)計學意義。(2)染
13、毒各組睪丸LDH活力與對照組比較:氟加中鋅組與對照組比較,差異無統(tǒng)計學意義。氟組、氟加低鋅組和氟加高鋅組均低于對照組,且差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。 7大鼠睪丸組織病理學檢測結果:對照組和氟加中鋅組的睪丸生精上皮細胞形態(tài)結構較完整,可見到大量成熟精子。氟組和氟加高鋅組的各級生精細胞只有2~3層,支持細胞的數(shù)量減少,結構疏松,成熟精子的數(shù)量減少。氟加低鋅組的各級生精細胞數(shù)量較氟組有所增加,形態(tài)結構較正常,間質細胞的數(shù)量和結
14、構也較正常,可見許多成熟精子。 8大鼠睪丸生精細胞fas表達檢測結果:(1)氟加鋅各劑量組Fas蛋白表達水平與氟組比較:氟低鋅組和氟加中鋅組均低于氟組,且差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。氟加高鋅組高于氟組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。(2)染毒各組Fas蛋白表達水平與對照組比較:四組均高于對照組,且差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。 結論;1氟可引起大鼠睪丸生精細胞Fas蛋白表達增強。 2鋅對氟致雄性生殖
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