砷、鋅對(duì)雄性大鼠生殖功能的聯(lián)合作用.pdf

1、目的：
　　觀察亞慢性飲水砷暴露對(duì)雄性大鼠睪丸組織的毒性作用，以及不同劑量的鋅與砷聯(lián)合，對(duì)大鼠生殖毒性的拮抗作用。探討鋅拮抗砷的生殖毒性可能的作用機(jī)制。
　　方法：
　　將40只4周齡的SPF（specific pathogen free）級(jí)雄性SD(Sprague-Dawley)大鼠分成五組，每組8只，分別為:①對(duì)照組:雙蒸水;②單純?nèi)旧榻M:4 mg/kg NaAsO2;③砷加低鋅組:4 mg/kg NaAsO2+8

2、 mg/kg ZnSO4;④砷加中鋅組:4 mg/kg NaAsO2+20 mg/kg ZnSO4;⑤砷加高鋅組:4 mg/kg NaAsO2+50 mg/kg ZnSO4。連續(xù)灌胃染毒60天，取血和雙側(cè)睪丸，蘇木精伊紅染色(hematoxylin eosin，HE)觀察睪丸組織形態(tài)學(xué)改變，放射免疫法測(cè)定血清中睪酮(testosterone，T)的含量，免疫組織化學(xué)法測(cè)定睪丸中Fas蛋白的表達(dá)，酶聯(lián)免疫吸附法(Enzyme-linked

3、 immunosorbent assay，ELISA)測(cè)睪丸組織丙二醛(malondialdehyde，MDA)含量、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和乳酸脫氫酶(lactic dehydrogenase，LDH)的活性，RT-PCR法檢測(cè)睪丸中CuZn-SOD mRNA的表達(dá)，火焰原子吸收法測(cè)定睪丸組織中鋅元素的含量。
　　結(jié)果：
　　與對(duì)照組相比單純?nèi)旧榻M大鼠體重明顯降低，三個(gè)加鋅組與單

4、純?nèi)旧榻M相比體重正常，單純?nèi)旧榻M睪丸組織重量也明顯降低(P＜0.05)。中鋅與高鋅組與單純?nèi)旧榻M比較，睪丸重量正常(P＜0.05)。與單純?nèi)旧榻M比較，低鋅組睪丸重量差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，睪丸臟器系數(shù)也無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　HE染色結(jié)果顯示:單純?nèi)旧榻M各級(jí)的生精細(xì)胞都減少且排列疏松，管腔中只有少量精子;低鋅組生精細(xì)胞和成熟精子數(shù)量均較少，管腔內(nèi)出現(xiàn)脫落細(xì)胞;中鋅組和高鋅組各級(jí)生精細(xì)胞都有增加，管腔中成熟精子增多，形態(tài)結(jié)構(gòu)正

5、常。
　　免疫組化結(jié)果:單純?nèi)旧榻M睪丸組織中的Fas蛋白表達(dá)量顯著高于對(duì)照組，三個(gè)加鋅組Fas蛋白的表達(dá)都明顯降低。砷加低鋅組和高鋅組Fas蛋白表達(dá)高于對(duì)照組(P＜0.05)。砷加中鋅組Fas蛋白表達(dá)與對(duì)照組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
　　放射免疫測(cè)定結(jié)果:與對(duì)照組比較，單純?nèi)旧榻M的血清睪酮含量顯著下降，低鋅、中鋅及高鋅組與單純?nèi)旧榻M比較都顯著上升(P＜0.05)，而高鋅組的睪酮含量與中鋅組比較，反而出現(xiàn)下降。
　

6、　火焰原子吸收法結(jié)果:和對(duì)照組相比，單純?nèi)旧榻M大鼠睪丸鋅含量明顯降低，低鋅組也明顯比對(duì)照組低，高鋅組則明顯比對(duì)照組高(P＜0.05)。中鋅組睪丸鋅含量與對(duì)照組比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　PCR結(jié)果:與對(duì)照組相比，單純?nèi)旧榻MCuZn-SOD mRNA表達(dá)量降低，高鋅組表達(dá)升高(P＜0.05)，低鋅和中鋅組與對(duì)照組相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);中、高鋅組與單純?nèi)旧榻M比較CuZn-SOD mRNA表達(dá)均升高(P＜0.0

7、5)。
　　ELISA結(jié)果:與對(duì)照組相比，單純?nèi)旧榻M和砷加低、高鋅組的MDA含量都明顯的上調(diào)，而中鋅組卻明顯的下調(diào);中、高鋅組睪丸MDA都明顯低于單純?nèi)旧榻M(P＜0.05)。與對(duì)照組比較，單純?nèi)旧榻M和砷加低、高鋅組的睪丸組織的LDH和SOD活力都有明顯的下降，中鋅組的SOD比對(duì)照組則明顯上升(P＜0.05)，而中鋅組LDH與對(duì)照組比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);與單純?nèi)旧榻M比較，中鋅組和高鋅組的LDH和SOD活性明顯上升(P＜