靈芝硒多糖構效關系的比較研究.pdf

1、多糖和硒對許多疾病都有防治作用，近年來對多糖和硒的活性的研究已經(jīng)較為深入，但將多糖與硒有機結(jié)合成為硒多糖，在國內(nèi)外的研究尚處于起步階段。靈芝硒多糖是一種通過生物轉(zhuǎn)化作用得到的半天然、半人工合成的富硒真菌多糖，硒多糖的化學結(jié)構有別于普通多糖，形成了特殊的硒氧鍵；硒多糖具有多種生理活性，具有可拮抗重金屬中毒和抗活性氧損傷的能力，從而發(fā)揮其抗氧化作用；影響細胞周期，使癌細胞DNA合成受阻而抑制癌細胞生長；并能夠誘導腫瘤細胞凋亡過程的發(fā)生等。

2、 本論文通過食用菌深層發(fā)酵方法，向靈芝發(fā)酵菌絲體發(fā)酵液中加入了無機硒—亞硒酸鈉，經(jīng)深層發(fā)酵后，有效的將無機硒轉(zhuǎn)化成有機硒并富集于靈芝菌絲體中，熱水、堿水浸提得到靈芝硒多糖粗提物。后經(jīng)去蛋白、脫色、DEAE-cellulose柱層析、高效液相色譜柱層析等步驟，將靈芝粗多糖純化為10種組分，MTT實驗表明，多糖組分SeGLP-2B-1對K562癌細胞抑制率最高。 本論文的著重點是通過對純化的各多糖組分化學結(jié)構的比較，通過分析不

3、同生物活性多糖物質(zhì)在其化學結(jié)構上的差異，從而從化學結(jié)構比較的角度為硒多糖的高效生物活性找到證據(jù)。本實驗的研究對象是富硒多糖SeGLP-2B-1、SeGLP-2B-2和不富硒的靈芝多糖GLP-2B-1、GLP-2B-2，利用紅外光譜、紫外光譜、氣相色譜、質(zhì)譜和核磁共振等儀器同步進行結(jié)構分析，以求闡明它們在結(jié)構上的差異。高效液相色譜法測定了硒多糖SeGLLP-2B-1和SeGLLP-2B-2的分子量分別為1.06×106D和1.42×104

4、D。 紅外光譜分析表明硒多糖中的Se元素可能是以Se=O鍵或C-O-SeO3鍵的形式存在。靈芝多糖糖環(huán)上的某些部位甲基化具有普遍性，而硒多糖的糖環(huán)上的這種甲基化不明顯。 紫外光譜掃描結(jié)果顯示硒多糖在260nm和280nm兩處均無明顯吸收，說明純化后的硒多糖已不含核酸和蛋白質(zhì)。 氣相色譜分析表明GLP-2B-1和SeGLP-2B-1都含有Glc,Xyl，Rha,Gal四種單糖，摩爾比分別為1.000∶0.927∶0

5、.651∶0.263和1.000∶0.652∶0.443∶0.227；GLP-2B-2和SeGLP-2B-2都含有Glc,Gal,Xyl,Man,Rha五種單糖，摩爾比分別為1.000∶1.015∶0.584∶0.333∶0.260和1.000∶0.840∶0.623∶0.601∶0.193。 甲基化單糖的質(zhì)譜解析和核磁共振的峰譜指派分析綜合看來，GLP-2B-1中的糖苷鍵有α-Glc(1→6)，α-Gal(1→6)，α-Rha

6、(1→4)和β-Xyl(1→4)四種類型；SeGLP-2B-1中的糖苷鍵有α-Glc(1→6)，α-Gal(1→6)，α-Rha(1→4)，β-Xyl(1→4)β-Gal(1→3)和α-Glc(1→4)六種類型；GLP-2B-2中的糖苷鍵有α-Glc(1→6)，α-Glc(1→4)，β-Gal(1→3)，α-Rha(1→4)，β-Xyl(1→4)，α-Gal(1→6)和α-Man(1→4)七種類型；SeGLP-2B-2中的糖苷鍵有α-G