白細胞介素18和γ-干擾素聯(lián)合檢測鑒別診斷結核性和惡性胸腔積液的價值和臨床意義.pdf

1、一、課題背景及目的 滲出性胸腔積液在臨床上以結核性和惡性胸腔積液最為多見。結核性和惡性胸腔積液治療和預后迥然不同，故正確鑒別非常重要。結核性胸腔積液和惡性胸腔積液細胞學檢查往往都是以淋巴細胞占優(yōu)勢的滲出性胸水，而腫瘤細胞的檢出率較低，胸水直接檢查和Ziehl-Neelsen染色法需要結核桿菌數(shù)在10，000/mL，因此，靈敏度很低(0-1％)。盡管結核桿菌培養(yǎng)具有更高的靈敏度(11-50％)，但需要2-4周的培養(yǎng)時間。開胸胸膜活

2、檢為確定胸腔積液病因的“金標準”，在直視下可發(fā)現(xiàn)可疑病灶，并能選擇性的進行活檢，特異性和敏感性均高于其他任何檢查方法，但此項檢查創(chuàng)傷較大，手術風險較高。因此尋找敏感性和特異性更高的無創(chuàng)輔助診斷方法鑒別診斷結核性胸腔積液和惡性胸腔積液具有重要的臨床意義。白細胞介素18(IL-18)和γ-干擾素(IFN-γ)是多效能的細胞因子，在Th1和Th2細胞免疫調(diào)節(jié)過程中均發(fā)揮著重要作用。最近研究發(fā)現(xiàn)IL-18和IFN-γ與結核性胸腔積液及惡性胸腔積

3、液的發(fā)生、發(fā)展關系密切，本研究就聯(lián)合檢測結核性和惡性胸腔積液中病人胸水及血清標本和正常人血清標本中白細胞介素18和γ-干擾素濃度，分析比較IL-18和IFN-γ在結核性和惡性胸腔積液中的鑒別診斷價值及臨床意義。 二、材料與方法 胸水及血清標本來自浙江大學醫(yī)學院附屬第一醫(yī)院呼吸內(nèi)科、杭州市紅十字會醫(yī)院結核病科及嵊州市人民醫(yī)院呼吸內(nèi)科2007年6月至2008年1月已經(jīng)確診的34例結核性胸腔積液患者和38例惡性胸腔積液患者，另

4、外18例正常血清標本來自健康自愿者及正常獻血員。胸腔積液患者于住院24小時內(nèi)，未經(jīng)過任何治療前，經(jīng)過患者同意，采用標準胸腔穿刺術抽取胸水后，留取10ml新鮮胸水及同時采取5ml靜脈血2000r/min離心15分鐘，收集上清液置于-20°C冰箱保存，待測定IL-18和IFN-γ。 人白細胞介素-18(IL-18)測定采用雙抗體夾心生物素化酶復合物一酶聯(lián)免疫吸附試驗(雙抗體夾心ABC-ELISA法)。用抗人IL-18單抗包被于酶標板

5、上，標準品和樣品中的IL-18與單抗結合，加入生物素化的抗人IL-18，形成免疫復合物連接在板上，辣根過氧化酶標記物的抗生蛋白鏈菌素(streptavidin)與生物素結合，加入酶底物鄰苯二胺(OPD)，出現(xiàn)黃色，加終止液硫酸，顏色變深，在492nm處測吸光度值(OD值)，IL-18濃度與OD值成正比，可以通過繪制標準曲線求出標本中IL-18濃度。γ-干擾素(IFN-γ)測定采用雙抗體夾心生物素化酶復合物-酶聯(lián)免疫吸附試驗(雙抗體夾心A

6、BC-ELISA法)。用抗人IFN-γ，單抗包被于酶標板上，標準品和樣品中的IFN-γ與單抗結合，加入生物素化的抗人IFN-γ，形成免疫復合物連接在板上，辣根過氧化酶標記物的抗生蛋白鏈菌素(Streptavidin)與生物素結合，加入酶底物鄰苯二胺(OPD)，出現(xiàn)黃色，加終止液硫酸，顏色變深，在492nm處測吸光度值(OD值)，IFN-γ 濃度與OD值成正比，可以通過繪制標準曲線求出標本中IFN-γ濃度。用SPSS11.5 fo

7、r Windows統(tǒng)計軟件包進行統(tǒng)計學分析處理，P<0.05差異有統(tǒng)計學意義。 三、結果 正常人組血清IL-18的濃度為(152±58 ng/L)，結核性胸腔積液患者組血清IL-18的濃度為(190±51ng/L)，惡性胸腔積液組患者血清IL-18的濃度為(159±53 ng/L)，結核性組血清IL-18的濃度高于正常人組血清IL-18的濃度及惡性胸腔積液組患者血清IL-18的濃度，但結核性組血清IL-18與正常人組血清

8、IL-18比較差異無統(tǒng)計學意義(t值1.66，P>0.05)，結核性組血清IL-18與惡性胸腔積液組患者血清IL-18差異無統(tǒng)計學意義(t值1.83，P>0.05)，惡性胸腔積液組患者血清IL-18與正常人組血清IL-18比較差異無統(tǒng)計學意義(t值0.29，P>0.05)。結核性胸腔積液患者組胸水IL-18的濃度為(1111±190ng/L)，惡性胸腔積液組患者胸水IL-18的濃度為(316±162ng/L)，兩組比較差異有統(tǒng)計學意義(

9、t值14.1，P<0.01)。 正常人組血清IFN-γ的濃度為(42±26 ng/L)，結核性胸腔積液患者組血清IFN-γ的濃度為(70±72ng/L)，惡性胸腔積液組患者血清IFN-γ的濃度為(53±43ng/L)。結核性組血清IFN-γ的濃度高于正常人組血清IFN-γ的濃度及惡性胸腔積液組患者血清IFN-γ的濃度，但結核性組血清IFN-γ與正常人組血清IFN-γ比較差異無統(tǒng)計學意義(t值1.02，P>0.05)，結核性組血清

10、IFN-γ與惡性胸腔積液組患者血清IFN-γ差異無統(tǒng)計學意義(t值0.92，P>0.05)，惡性胸腔積液組患者血清IFN-γ與正常人組血清IFN-γ比較差異無統(tǒng)計學意義(t值0.5 9，P>0.05)。結核性胸腔積液患者組胸水IFN-γ的濃度為(1008±309ng/L)，惡性胸腔積液組患者胸水(31±10ng/L)。兩組比較差異有統(tǒng)計學意義(t值14.2，P<0.01)。 四、結論 結核性、惡性胸腔積液及正常人三組血清