桑葉中東莨菪素提取分離、含量分析及體外抗菌活性研究.pdf

1、中國(guó)植桑養(yǎng)蠶歷史悠久。桑樹(shù)的各個(gè)部分在傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)上基本都可入藥，歷代中國(guó)藥典均收載了桑葉、桑枝、桑白皮、桑椹的藥用功效。 東莨菪素是一種簡(jiǎn)單的香豆素化合物，存在于茄科植物東莨菪，顛茄，傘形科植物白芷等植物，具有抗真菌、抑制樹(shù)木腐爛的作用，同時(shí)還具有抑制單胺氧化酶、抗炎、祛風(fēng)、止痛、祛痰解痙、抗腫瘤、抗鼻咽癌9KB細(xì)胞等活性。在桑樹(shù)中也發(fā)現(xiàn)有東莨菪素的存在，對(duì)桑樹(shù)中東莨菪素的提取分離、含量篩選及體外抗菌生物活性研究具有重要意義。

2、 1.桑樹(shù)中東莨菪素的提取分離。 本研究以西南大學(xué)生物技術(shù)學(xué)院新育成的人工三倍體桑樹(shù)品種嘉陵20號(hào)的葉片為材料，應(yīng)用乙醇浸提的方法，采取萃取、結(jié)晶、正反向色譜層析、高壓液相(HPLC)等分離手段，以硅膠、聚酰胺、大孔樹(shù)脂等為分離材料對(duì)東莨菪素進(jìn)行提取、分離、純化；與標(biāo)樣對(duì)比TLC，根據(jù)Rf進(jìn)行比對(duì)鑒定，從8kg嘉陵20號(hào)桑葉(干物)中分離得到東莨菪素23mg純品， 2.不同桑樹(shù)品種桑葉中東莨菪素含量的測(cè)定。

3、應(yīng)用HPLC對(duì)目前生產(chǎn)上廣泛栽植的7個(gè)種27個(gè)品種桑葉中東莨菪素的含量進(jìn)行了精確測(cè)定：結(jié)果發(fā)現(xiàn)：(1)桑樹(shù)中東莨菪素的含量差別都比較大的，其中火桑葉東莨菪素的含量最高，為164.2375μg/g，大紅皮的含量最低，為25.1μg/g；(2)不同季節(jié)東莨菪素的含量也有差別，在本次實(shí)驗(yàn)所選材料中，冬季葉片中的含量高于夏季葉片中的含量，夏季火桑葉的含量為164.2375μg/g冬季火桑葉的含量是最高的，高達(dá)294.05μg/g，為桑葉的冬季利

4、用提供了參考；(3)桑書(shū)不同部位東莨菪素的含量也有差別，對(duì)桑樹(shù)不同部位東莨菪素的含量進(jìn)行測(cè)定后比較后發(fā)現(xiàn)，火桑和沙二枝條中的東莨菪素含量要低于葉片中的含量，沙二葉片中東莨菪素的含量為219.275μg/g，沙二枝條中東莨菪素的含量為152.15μg/g，說(shuō)明同一桑樹(shù)品種桑樹(shù)葉片的東莨菪素的含量要高于桑樹(shù)枝條中的含量。 本實(shí)驗(yàn)比較了桑樹(shù)和親緣關(guān)系較近的構(gòu)樹(shù)葉片中東莨菪素的含量，結(jié)果發(fā)現(xiàn)大部分桑樹(shù)品種桑葉中，東莨菪素的含量明顯高于構(gòu)

5、樹(shù)，少部分桑樹(shù)品種桑葉和構(gòu)樹(shù)中的東莨菪素含量接近，表明東莨菪素的含量在桑科植物中，屬間的差異較大，也就是桑屬植物葉片中東莨菪素的含量高于同科的構(gòu)屬植物，這為桑屬植物開(kāi)發(fā)提取東莨菪素提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 3.東莨菪素體外抗菌活性研究。 本研究應(yīng)用瓊脂擴(kuò)散法和瓊脂稀釋法，初步對(duì)從桑樹(shù)中提取分離的東莨菪素，進(jìn)行了體外抗細(xì)菌和抗真菌的活性測(cè)定，兩種方法測(cè)定結(jié)果一致。結(jié)果表明，從桑樹(shù)中分離提取的東莨菪素對(duì)大腸桿菌和金黃色葡萄球菌沒(méi)有明