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1、河北醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文淋巴瘤Raji細(xì)胞Id4基因甲基化檢測(cè)及AsO抑制效應(yīng)研究姓名:趙春華申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):兒科學(xué)指導(dǎo)教師:曲凡20090301中文摘要As203對(duì)惡性淋巴瘤的作用及As203治療惡性淋巴瘤的可能機(jī)制;為惡性淋巴瘤的發(fā)病機(jī)制提供新的理論依據(jù)及治療對(duì)策,為去甲基化藥物治療惡性淋巴瘤提供實(shí)驗(yàn)室資料。方法:體外培養(yǎng)人Burkitt’S淋巴瘤細(xì)胞株Raji細(xì)胞,用MSPCR法檢測(cè)Raji細(xì)胞的Id4基因甲基化狀態(tài),并用
2、不同濃度的As203處理Raji細(xì)胞。應(yīng)用MTT比色法檢測(cè)細(xì)胞生長(zhǎng)情況;流式細(xì)胞術(shù)(FCM)分析As203對(duì)細(xì)胞周期的影響并檢測(cè)細(xì)胞凋亡;MSPCR法檢測(cè)As203處理前后Id4基因甲基化程度的改變,逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RTPCR)法檢測(cè)處理前后Id4mRNA的表達(dá)情況。結(jié)果lMSPCR法檢測(cè)結(jié)果顯示:Raji細(xì)胞用甲基化特異性引物擴(kuò)增可見(jiàn)155bp特異性擴(kuò)增產(chǎn)物條帶,非甲基化特異性引物擴(kuò)增未見(jiàn)特異性擴(kuò)增產(chǎn)物條帶,表明Raji細(xì)胞的Id
3、4基因呈完全甲基化狀態(tài)。2MTT比色試驗(yàn)結(jié)果表明:As203各濃度組作用于Raji細(xì)胞24h后抑制率分別為1215%,3372%,3899%,6206%;48h后抑制率分別為2186%,4538%,5210%,7579%;72h后抑制率分別為4003%,6664%,7409%,9217%。各實(shí)驗(yàn)組作用于Raji細(xì)胞24、48、72h后細(xì)胞抑制率與對(duì)照組相比均有顯著性差異(PO05),同時(shí)各濃度組之間以及時(shí)間組之間均有顯著性差異(PO05
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