急性期川崎病單核細(xì)胞活化型和抑制型FcγR表達(dá)初探.pdf

1、目的:
　　通過觀察急性期川崎病(KD)患兒靜脈注射丙種球蛋白(IVIG))治療前后外周血單核細(xì)胞(MC)活化型和抑制型FcγR表達(dá)變化，探討FcγR活化型/抑制型(A/I)表達(dá)失衡與KD炎癥細(xì)胞因子過表達(dá)的關(guān)系，進一步闡明KD免疫發(fā)病機制
　　方法:
　　收取2011年10月至2012年5月在我院住院治療診斷為急性KD患兒25例，予IVIG治療前后分別采血。根據(jù)患兒是否有冠狀動脈損傷分為冠脈損傷組（KD-CAL+，1

2、2例）和無冠脈損傷組(KD-CAL-，13例)。同年齡健康兒童15例。
　?、倭魇郊?xì)胞術(shù)檢測外周血MC FcγRⅠ和FcγRⅢ表達(dá)水平;
　?、诜崔D(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)及熒光定量PCR檢測MCFcγRⅡa、FcγRⅡb、炎癥細(xì)胞因子（IL-1β、IL-6、TNF-α）、趨化因子(IP-10、RANTES、iNOS) mRNA表達(dá);
　?、勖嘎?lián)免疫吸附(ELISA)法檢測血漿IFN-γ和TNF-α濃度。

3、>　　結(jié)果:
　?、偌毙云贙D患兒MC FcγRⅠ表達(dá)無明顯變化;FcγRⅢ表達(dá)升高，IVIG治療后下降:經(jīng)流式細(xì)胞術(shù)檢測MC細(xì)胞表面FcγRⅢ表達(dá)，注意到未經(jīng)任何絲裂原刺激的急性期KD患兒CD19+細(xì)胞FcγRⅢ陽性百分率(％)和平均熒光強度(MFI)明顯高于同年齡對照組[％:(29.84±14.77)％vs.(17.61±5.15)％,t=3.78, P＜0.05; MFI:459±254 vs.308±148，t=2.38，

4、P＜0.05]，IVIG治療后FcγRⅢ MFI和陽性百分率明顯下降，基本達(dá)到同齡對照組水平;FcγRⅠ表達(dá)與對照組相比無明顯差異(P＞0.05)。
　?、贔cγRⅡa升高，IVIG治療后降低;FcγRⅡb降低，IVIG治療后升高:經(jīng)Real-time PCR檢測MC FcγRⅡa和FcγRⅡb表達(dá)，觀察到急性期KD患兒MC FcγRⅡa mRNA明顯高于同齡對照組[(1.53±0.68)vs.(0.85±0.33)，t=4.24

5、，P＜0.05]，KD-CAL+FcγRⅡa表達(dá)高于KD-CAL[(2.11±0.54) vs.(1.07±0.25),t=5.91, P＜0.05];急性期KD患兒MC FcγRⅡb mRNA較同齡對照組明顯降低[(5.74±3.45) E-03 vs.(1.77±0.76) E-02,t=3.62, P＜0.05], KD-CAL+FcγRⅡb表達(dá)明顯低于KD-CAL[(2.74±1.29)E-03 vs.(8.10±2.65)E-

6、03，t=6.63，P＜0.05];IVIG治療后，較同齡對照組，F(xiàn)cγRⅡa明顯降低[(0.84±0.32)vs.(1.53±0.68)，t=4.59，P＜0.05];FcγRⅡb明顯增高[(1.40±0.67) E-02 vs.(1.77±0.56)E-02,t=5.71,P＜0.05]。
　?、奂?xì)胞因子升高，IVIG治療后降低:經(jīng)Real-time PCR檢測急性期KD患兒MC炎癥細(xì)胞因子（IL-1β、IL-6、TNF-α）

7、/趨化因子(IP-10、RANTES、iNOS)明顯高于同齡對照組（P＜0.05），IVIG治療后有不同程度降低;IVIG治療前IL-6、TNF-α和IP10與FcγRⅡa表達(dá)呈正相關(guān)（r=0.73,0.91,0.61,P＜0.05）。
　?、蹻cγRⅡb表達(dá)影響因素檢測:探討影響急性期KD患兒FcγRⅡa和FcγRⅡb表達(dá)調(diào)節(jié)因素，本文采用ELISA檢測血漿IFN-γ和TNF-α濃度，注意到急性期KD患兒IFN-γ和TNF-α血

8、漿濃度明顯高于健康對照組(IFN-γ:24.91±6.65 vs.15.15±2.6,t=6.53,P＜0.05; TNF-α:58.95±14.95 vs.42.35±6.41,t=4.86,P＜0.05),IVIG治療后下降(IFN-γ:13.48±6.47 vs.24.91±6.65,t=2.02,P＜0.05; TNF-α:44.90±24.01 vs.58.95±14.95，t=2.48，P＜0.05)，相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)IVIG

9、治療前IFN-γ濃度與MC FcγRⅡa和FcγRⅢ表達(dá)呈正相關(guān)(FcγRⅡa:r=0.79,P＜0.05; FcγRⅢ:r=0.65,P＜0.05),TNF-α濃度與MC FcγRⅡb表達(dá)呈負(fù)相關(guān)（FcγRⅡb: r=-0.90，P＜0.05）。
　　結(jié)論:
　　急性期KD患兒FcγRⅡa、FcγRⅢ表達(dá)異常增高，F(xiàn)cγRⅡb表達(dá)降低，F(xiàn)cγR活化(A)/抑制(Ⅰ)表達(dá)失衡可能是導(dǎo)致MC異?；罨?，炎癥細(xì)胞因子過表達(dá)的原因之