重癥急性胰腺炎小腸動(dòng)力障礙與Cajal間質(zhì)細(xì)胞關(guān)系及大黃治療機(jī)制.pdf

1、重癥急性胰腺炎(Severe acute pancreatitis,SAP)是臨床常見(jiàn)的危重疾病。雖然,國(guó)內(nèi)外學(xué)者在該病的發(fā)病機(jī)制方面進(jìn)行了大量的研究,但是由于其確切機(jī)制至今仍未闡明,伴隨的胃腸衰竭以及其他多臟器功能衰竭的臨床治療缺乏有效的手段。 此類(lèi)病人多出現(xiàn)腹痛、腹脹等腸道并發(fā)癥,嚴(yán)重影響疾病的病程,是導(dǎo)致該病治愈率低下的重要原因之一。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)理論認(rèn)為重癥急性胰腺炎腹脹主要是因?yàn)橐认傺椎拇罅繚B出及產(chǎn)生炎癥反應(yīng)造成腸麻痹所致。

2、但是其確切的發(fā)病機(jī)制可能涉及腸神經(jīng)系統(tǒng)(Enteric nervous system,ENS)、Cajial間質(zhì)細(xì)胞(interstitial cells of cajal,ICC),腸道平滑肌細(xì)胞(Smooth muscle cells,SMCs)等綜合因素。 ICC是胃腸運(yùn)動(dòng)自主節(jié)律的起搏細(xì)胞,產(chǎn)生慢波,參與腸神經(jīng)肌肉信息傳遞過(guò)程,調(diào)控胃腸道運(yùn)動(dòng)。ICC功能或超微結(jié)構(gòu)異常與人類(lèi)多種胃腸運(yùn)動(dòng)障礙性疾病的發(fā)生有關(guān)。 藥用

3、生大黃中醫(yī)列為瀉下藥,具有瀉下攻積,清熱瀉火,解毒和活血化淤的功效。臨床應(yīng)用顯示生大黃能夠明顯減輕重癥急性胰腺炎患者腹脹癥狀,恢復(fù)其腸道功能。 本課題利用給Wistar大鼠腹腔注射L-精氨酸復(fù)制重癥急性胰腺炎腸麻痹模型,并給予大黃煎劑灌胃治療,測(cè)定腸道推進(jìn)率,腸道慢波和離體腸段運(yùn)動(dòng),觀察小腸組織的病理變化,透射電鏡觀察ICC超微結(jié)構(gòu)的改變和RT-PCR以及熒光定量PCR測(cè)定c-Kit m RNA的表達(dá),探討重癥急性胰腺炎時(shí)小腸動(dòng)

4、力改變與ICC改變的關(guān)系及大黃治療的影響。 第一部分重癥急性胰腺炎小腸動(dòng)力障礙和大黃治療效果 [目的]:探討重癥急性胰腺炎大鼠小腸推進(jìn)率,離體腸段運(yùn)動(dòng)和腸道電慢波的變化以及大黃治療的效果 [方法]:Wistar大鼠54只,隨機(jī)分為正常對(duì)照組、重癥急性胰腺炎模型組和生大黃治療組。通過(guò)以下方法檢測(cè)胃腸運(yùn)動(dòng)功能：通過(guò)炭素墨汁推進(jìn)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)小腸推進(jìn)率；觀察小腸在體肌電慢波頻率和振幅的變化以及離體腸段自發(fā)性收縮運(yùn)動(dòng)的頻率和振

5、幅的變化。 [結(jié)果]:模型組小腸推進(jìn)率為(49.48±5.60)％,正常對(duì)照組為(72.84±3.41)％,模型組和正常對(duì)照組比較：小腸推進(jìn)率明顯下降(P<0.01);模型組小腸在體肌電慢波頻率為(0.35±0.06)HZ,正常對(duì)照組為(0.55±0.03)HZ,小腸在體肌電慢波頻率明顯下降(P<0.01);模型組小腸在體肌電慢波振幅(4.06±0.59)mv×s,正常對(duì)照組為(5.27±0.41)mv×s,振幅下降(P<0.0

6、1);模型組離體腸段自發(fā)性收縮運(yùn)動(dòng)的頻率(17.50±5.36)次/分,正常對(duì)照組為(32.5±3.67)次/分,離體腸段自發(fā)性收縮運(yùn)動(dòng)的頻率變慢(P<0.01);模型組離體腸段自發(fā)性收縮運(yùn)動(dòng)的振幅為(160.46±30.09)g×s,正常對(duì)照組為(483.98±73.7)g×s,離體腸段自發(fā)性收縮運(yùn)動(dòng)的振幅下降(P<0.01)。治療組和模型組比較：小腸推進(jìn)率明顯增加(P<0.01);小腸在體肌電慢波頻率增加(P<0.01)和振幅升高,

7、但是沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；離體腸段自發(fā)性收縮運(yùn)動(dòng)的頻率增加(P<0.05)和振幅升高(P<0.01)。 [結(jié)論]:重癥急性胰腺炎的大鼠存在明顯胃腸運(yùn)動(dòng)障礙。生大黃煎劑灌胃能夠明顯增加小腸傳輸,增加胃腸蠕動(dòng),有效改善胃腸運(yùn)動(dòng)障礙。 第二部分重癥急性胰腺炎大鼠小腸平滑肌cajal間質(zhì)細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)改變和大黃治療的影響 [目的]:探討ICC在重癥急性胰腺炎大鼠模型小腸中超微結(jié)構(gòu)的改變以及大黃治療的影響 [方法]:Wis

8、tar大鼠18只,隨機(jī)分為正常對(duì)照組、模型組和生大黃治療組。同第一部分制作重癥急性胰腺炎大鼠模型,取大鼠小腸組織行常規(guī)病理切片檢查,透射電鏡觀察小腸ICC超微結(jié)構(gòu)、分布以及和平滑肌、腸神經(jīng)元的關(guān)系。 [結(jié)果]:1、小腸病理切片檢查：模型組周?chē)c系膜脂肪壞死,小腸絨毛上皮細(xì)胞壞死、脫落,大量炎細(xì)胞浸潤(rùn)；大黃治療組小腸絨毛結(jié)構(gòu)部分恢復(fù)。2、小腸ICC超微結(jié)構(gòu)：模型組小腸肌間叢ICC超微結(jié)構(gòu)破壞,與腸神經(jīng)元、平滑肌細(xì)胞之間的縫隙連接減

9、少,大黃治療組ICC超微結(jié)構(gòu)部分恢復(fù),與腸神經(jīng)元、平滑肌細(xì)胞之間的縫隙連接恢復(fù)。 [結(jié)論]:重癥急性胰腺炎大鼠模型組存在小腸平滑肌ICC超微結(jié)構(gòu)的改變,生大黃治療組小腸平滑肌ICC超微結(jié)構(gòu)部分恢復(fù),提示小腸平滑肌ICC超微結(jié)構(gòu)的改變可能是重癥急性胰腺炎大鼠胃腸運(yùn)動(dòng)障礙的原因之一,生大黃煎劑灌胃通過(guò)恢復(fù)ICC的超微結(jié)構(gòu)改善其胃腸運(yùn)動(dòng)障礙。 第三部分重癥急性胰腺炎大鼠小腸平滑肌c-Kit mRNA表達(dá)的改變和大黃治療的影響

10、 [目的]:探討ICC在重癥急性胰腺炎大鼠模型小腸平滑肌層c-Kit mRNA表達(dá)的改變以及大黃治療的影響 [方法]:Wistar大鼠18只,隨機(jī)分為正常對(duì)照組、模型組和生大黃治療組。同第一部分制作重癥急性胰腺炎大鼠模型,取大鼠小腸組織RNA標(biāo)本。RT-PCR、Real-Time PCR方法觀察小腸平滑肌組織C-KIT mRNA表達(dá)的改變。 [結(jié)果]:小腸平滑肌ICC C-KIT mRNA表達(dá)：重癥急性胰腺炎模型組

11、為1.174±0.314,較正常對(duì)照組2.257±0.914明顯下降(P<0.05);重癥急性胰腺炎生大黃治療組2.186±0.174較模型組明顯升高(P<0.05)。 [結(jié)論]:重癥急性胰腺炎大鼠模型組c-Kit mRNA表達(dá)較正常對(duì)照組明顯減少。生大黃治療組小腸平滑肌c-Kit mRNA表達(dá)部分恢復(fù)。結(jié)合第二部分小腸平滑肌ICC超微結(jié)構(gòu)的變化,提示小腸平滑肌ICC c-Kit mRNA表達(dá)的異?？赡苁菍?dǎo)致ICC超微結(jié)構(gòu)改變的