貫穿縫扎聯(lián)合燙傷法構(gòu)建兔耳難愈性創(chuàng)面模型.pdf

1、目的:
　　建立一種穩(wěn)定規(guī)范、效果理想的兔耳難愈性創(chuàng)面模型。
　　方法:
　　(1)貫穿縫扎法構(gòu)建兔耳缺血瘀血模型:新西蘭大白兔8只，貫穿縫扎兔耳背腹側(cè)皮膚，間斷縫扎兔耳頭側(cè)及中央所有動(dòng)、靜脈（尾側(cè)除外），縫扎處暴露并外涂碘伏，每天3次。分別在縫扎后第1、7、14、21天對(duì)比觀察兔耳皮溫、色澤、水腫和縫扎處感染情況，同時(shí)行靜脈血?dú)夥治觥?br>　　(2)應(yīng)用全自動(dòng)汽燙儀制作不同兔耳燙傷創(chuàng)面模型的研究:取健康新西蘭大白兔

2、12只，隨機(jī)分為6組，每組2只，即兔耳4只，以調(diào)溫調(diào)壓全自動(dòng)燙傷儀作為燙傷裝置，在距兔耳遠(yuǎn)端6cm處，每只耳背側(cè)中央靜脈兩側(cè)各設(shè)計(jì)對(duì)稱的2個(gè)直徑為1cm圓形燙傷創(chuàng)面，每個(gè)圓形燙傷創(chuàng)面的圓心距離中央靜脈的垂直距離均為1cm，燙傷時(shí)間分別為0.6，0.8，1.0，1.2，1.5，2.0s，每一時(shí)間點(diǎn)8個(gè)創(chuàng)面。燙傷后連續(xù)觀察燙傷創(chuàng)面大體情況，傷后24h取標(biāo)本行組織病理檢查，根據(jù)結(jié)果篩選深Ⅱ度創(chuàng)面燙傷時(shí)間。
　　(3)貫穿縫扎聯(lián)合燙傷法構(gòu)

3、建兔耳難愈性創(chuàng)面模型:健康新西蘭大白兔30只，隨機(jī)分為6組，每組5只即兔耳10個(gè)，創(chuàng)面20個(gè)，分別為A組:單純打孔組、B組:縫扎+打孔組、C組:單純燙傷組（燙傷24h后去除壞死皮膚）、D組:單純燙傷（燙傷48h后去除壞死皮膚）、E組:縫扎+燙傷組（燙傷24h后去除壞死皮膚）、F組:縫扎+燙傷組（燙傷48h后去除壞死皮膚）。在建立缺血瘀血模型的10d后，E組與F組應(yīng)用調(diào)溫調(diào)壓自動(dòng)燙傷儀在兔耳背側(cè)制作兩個(gè)對(duì)稱的圓形燙傷創(chuàng)面，直徑1cm，并分

4、別于24h、48h后去除創(chuàng)面壞死皮膚，深達(dá)軟骨，刮除軟骨膜;C和D組分別作為對(duì)照在正常兔耳（血管未行縫扎）背側(cè)制作兩個(gè)相同的燙傷創(chuàng)面，并分別于24h、48h后去除創(chuàng)面壞死皮膚，深達(dá)軟骨，刮除軟骨膜;B組在兔耳縫扎10d后，在耳背用活檢打孔器制作與上述四組相同的圓形創(chuàng)面，深達(dá)軟骨;A組則在正常兔耳背側(cè)（血管未行縫扎）與B組一樣制作兩個(gè)相同的創(chuàng)面。兔耳縫扎處、燙傷和打孔創(chuàng)面每日均用0.5％碘伏消毒3次后無菌敷料包扎。對(duì)縫扎后兔耳大體情況進(jìn)行

5、連續(xù)觀察，記錄各組創(chuàng)面愈合時(shí)間，各組兔耳分別在打孔后或去除壞死皮膚后的第7、14、21d取創(chuàng)面組織行HE染色及bFGF免疫組織化學(xué)檢查，并對(duì)各組數(shù)據(jù)行方差分析。
　　結(jié)果:
　　(1)貫穿縫扎法構(gòu)建兔耳缺血瘀血模型:縫扎完畢后兔耳顏色即呈明顯紫黑色，縫扎后1天水腫明顯、縫扎處輕度充血和少許滲出，縫扎后7天兔耳顏色呈淡紫黑色，水腫最明顯但縫扎處干潔，縫扎后14天兔耳顏色逐漸變淡呈紫紅色、水腫明顯減輕、縫扎處皮膚出現(xiàn)明顯干性壞死

6、，21天兔耳顏色呈淡紫色，但水腫不明顯，縫扎處干燥無感染。皮溫、氧分壓、二氧化碳分壓、血氧飽和度在各觀察點(diǎn)均較縫扎前有明顯下降(P＜0.01)。
　　(2)應(yīng)用全自動(dòng)汽燙儀制作不同兔耳燙傷創(chuàng)面模型的研究:燙傷創(chuàng)面呈圓形，燙傷程度均勻，創(chuàng)面與創(chuàng)周正常皮膚邊界清楚，制作淺Ⅱ度、深Ⅱ度、Ⅲ度、Ⅳ度創(chuàng)面的燙傷時(shí)間分別為0.6s和0.8s、1.0s、1.2s、1.5S和2S，燙傷深度隨燙傷時(shí)間延長(zhǎng)而加深。
　　(3)貫穿縫扎聯(lián)合燙傷法

7、構(gòu)建兔耳難愈性創(chuàng)面模型:E組和F組以及B組縫扎后立即出現(xiàn)明顯的缺血淤血，兔耳顏色呈紫黑色，隨時(shí)間的延長(zhǎng)逐漸變淺，觀察至28天時(shí)顏色呈淡紫色。A-F6組創(chuàng)面愈合時(shí)間分別為10.00±1.00d、14.67±0.58d、14.33±0.62d、17.67±1.15d,19.67±0.52d和25.66±0.73d.B組與A組比較、D組與C組比較、F組與E組比較、C組與A組比較、E組與B組比較，創(chuàng)面愈合時(shí)間明顯延遲(P＜0.01)。打孔或去除

8、壞死皮膚后第7d:D、E、F組創(chuàng)面均可見少量肉芽組織生長(zhǎng)及大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，組織水腫明顯，B組創(chuàng)面可大量肉芽組織生長(zhǎng)及炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，水腫較輕，A組創(chuàng)面表皮化修復(fù);第14d:E組創(chuàng)面仍見大量肉芽組織生長(zhǎng)、炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，F(xiàn)組創(chuàng)面肉芽組織相對(duì)較少，有大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，C組創(chuàng)面表皮化修復(fù)，D組與C組相比炎性細(xì)胞較多，仍有大量肉芽組織，B組創(chuàng)面表皮覆蓋，A組表皮層變薄，向瘢痕組織轉(zhuǎn)變。第21d:E組和D組創(chuàng)面均被表皮覆蓋，E組創(chuàng)面真皮層炎癥細(xì)胞浸

9、潤(rùn)仍較多，F(xiàn)組創(chuàng)面仍有大量肉芽組織及炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，C組和B組愈合創(chuàng)面炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)明顯減少，部分成纖維細(xì)胞纖維化，A組愈合創(chuàng)面瘢痕組織形成。B組與A組比較、D組與C組比較、F組與E組比較、C組與A組比較、E組與B組比較在各觀察時(shí)間點(diǎn)兔耳創(chuàng)面堿性成纖維生長(zhǎng)因子表達(dá)量后者明顯低于前者，各觀察時(shí)間點(diǎn)創(chuàng)面組織堿性成纖維生長(zhǎng)因子平均光密度值前者與后者比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　結(jié)論:
　　(1)貫穿縫扎方法制作的兔耳缺淤血