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文檔簡(jiǎn)介
1、1964年鹽酸克倫特羅(CBL)在美國(guó)首次合成并獲得專(zhuān)利。在臨床上作為支氣管解痙藥物。20世紀(jì)80年代初,美國(guó)脂胺公司研究發(fā)現(xiàn),當(dāng)CBL的使用劑量達(dá)到治療量的5-10倍時(shí),具有能量重分配作用,可增加動(dòng)物瘦肉率,降低骨骼肌脂肪。但在隨后的數(shù)年里,國(guó)內(nèi)外發(fā)生的多起CBL中毒事件觸目驚心。在我國(guó),CBL殘留監(jiān)測(cè)以ELISA作為篩選方法,GC/MS作為確證方法。檢測(cè)對(duì)象主要為飼料、豬尿、豬肉和豬肝,但都不同程度的存在采集、保存、運(yùn)輸,檢測(cè)周期長(zhǎng)
2、的缺點(diǎn),為此,我們研究了毛發(fā)中CBL殘留量GC/MS檢測(cè)方法以及毛發(fā)與肌肉中CBL殘留量的關(guān)系,為使CBL在動(dòng)物體內(nèi)殘留的監(jiān)測(cè)更科學(xué)、更準(zhǔn)確、更便捷打下基礎(chǔ)。主要工作歸納如下: (1)首先選擇小白鼠作為毛發(fā)中CBL殘留量檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,以最明顯的心肌損害為指標(biāo)的最大無(wú)作用劑量連續(xù)灌胃30天,制作慢性中毒小鼠模型,在不同時(shí)間分別采集樣本,用GC/MS檢測(cè)。并對(duì)拔取和剪取兩種采樣方式進(jìn)行比較。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中嘗試了不同的提取溶液和不同的
3、提取時(shí)間,最終找到了最佳的提取方式,并對(duì)檢測(cè)結(jié)果的穩(wěn)定性、重復(fù)性、精密度,線性、回收率等方法學(xué)驗(yàn)證指標(biāo)進(jìn)行了評(píng)價(jià),結(jié)果另人滿(mǎn)意。 (2)對(duì)毛發(fā)和肌肉中CBL殘留量檢測(cè)方法從采集樣本—樣本的前處理—GC/MS對(duì)衍生液的檢測(cè)—檢測(cè)結(jié)果的計(jì)算的全過(guò)程進(jìn)行了方法不確定度影響因素的研究。結(jié)果顯示:衍生液體積、采用擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線和對(duì)照液濃度計(jì)算樣品溶液濃度及重復(fù)性引入的不確定度較大,建議在實(shí)際檢測(cè)中,要注意檢測(cè)環(huán)境溫度的控制,還可以選擇與樣品
4、液濃度接近的對(duì)照溶液進(jìn)行單點(diǎn)校正計(jì)算結(jié)果。 (3)在采集小鼠毛發(fā)樣本的同時(shí),采集了小鼠的肝腎、肌肉與毛發(fā)同時(shí)檢測(cè),檢測(cè)從灌胃第九天起延續(xù)到停藥后的30天,雌雄分別檢測(cè)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)小鼠毛發(fā)、肝腎和肌肉中CBL殘留量按濃度大小依次為:毛發(fā)>肝腎>肌肉;相同樣本雌鼠高于雄鼠;殘留量達(dá)到峰值的時(shí)間,雄鼠早于雌鼠。各樣本CBL的降解速度由快到慢為肌肉>毛發(fā)>肝腎,且雌鼠高于雄鼠。 (4)在以上基礎(chǔ)上,以育肥豬為驗(yàn)證對(duì)象,制作慢性中毒
5、模型,分別在不同的時(shí)間點(diǎn)采集肝腎、肌肉樣本,驗(yàn)證(3)中的蓄積與降解趨勢(shì)。結(jié)果豬體內(nèi)毛發(fā)、肝腎和肌肉中CBL殘留量按濃度大小依次為:毛發(fā)>肝腎>肌肉;相同樣本雌性豬高于雄性豬;到達(dá)峰值的時(shí)間,雌雄豬無(wú)明顯差異,但不同組織到達(dá)峰值的時(shí)間由快到慢為肝腎>肌肉>毛發(fā),降解速度由快到慢為肌肉>肝腎>毛發(fā)。 因此,以毛發(fā)作為檢測(cè)對(duì)象不僅樣品易采集,易保管,易運(yùn)輸,不需特殊保藏設(shè)施而且能反映所有的CBL暴露史。從毛發(fā)與肌肉中CBL殘留量關(guān)系
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