Aβ-,25-35-擬癡呆小鼠模型的建立及梓醇藥理作用的初步研究.pdf

1、目的:阿爾茨海默?。ˋlzheimer’s disease，AD）是老年人常見(jiàn)的疾病。研究發(fā)現(xiàn)AD最主要的病理變化之一是b-淀粉樣肽在基底核的沉積,造成膽堿能神經(jīng)元損傷，導(dǎo)致大腦膽堿能系統(tǒng)的功能障礙。迄今為止，AD尚沒(méi)有理想的動(dòng)物模型，每種模型都只是模擬AD的一部分病理學(xué)特征，使AD的研究受到一定限制。本實(shí)驗(yàn)室曾成功建立了SD大鼠單側(cè)腦基底核部位聯(lián)合注射淀粉樣肽Ab25-35和鵝蕈膏酸（Ibotenic acid，IBO）的擬癡呆模型。

2、小鼠與大鼠相比，更適合于暫時(shí)只能得到較少量藥物樣品而又需長(zhǎng)期喂服的情況。為此，我們建立了NH小鼠單側(cè)腦基底核部位注射淀粉樣肽Aβ25-35和IBO造成的擬癡呆動(dòng)物模型并用它對(duì)梓醇的藥理作用進(jìn)行了初步研究。 方法:根據(jù)小鼠腦立體定位圖譜所示，NH小鼠右側(cè)腦基底核部位一次性定位注射淀粉樣肽Aβ25-35和IBO造成擬癡呆模型，每鼠0.3ml(Aβ25-35 4mg和IBO 1mg，溶于1ml生理鹽水中)，對(duì)照組注射等量生理鹽水。設(shè)

3、立對(duì)照組、模型組和梓醇用藥組。用藥組灌服50mg/kg/d梓醇，另兩組灌服蒸餾水，共60d。用腦冠狀石蠟切片HE染色考察注射軌跡，用藥60d后進(jìn)行Y-迷宮測(cè)定各組動(dòng)物學(xué)習(xí)能力（主要反映短期記憶功能），放射配基結(jié)合分析單點(diǎn)法測(cè)定注射側(cè)腦內(nèi)M膽堿受體密度，放射酶學(xué)法測(cè)定腦內(nèi)膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶（choline acetyltransferase，ChAT）的活性，ELISA法測(cè)定腦內(nèi)腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子（brain-derived neurotro

4、phic factor，BDNF）的含量。 結(jié)果:腦冠狀石蠟切片HE染色顯示模型小鼠注射部位與圖譜腦基底核部位基本一致。Y-迷宮實(shí)驗(yàn)測(cè)得造模后連續(xù)60d每天喂服梓醇50mg/kg小鼠的學(xué)習(xí)能力，梓醇組第7天20次測(cè)試的正確次數(shù)(18.33±0.98)，顯著好于模型組(16.15±2.30)，與對(duì)照組(19.38±0.92)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。梓醇組第7天20次測(cè)試的正確次數(shù)/總反應(yīng)時(shí)間(8.41±0.80)也顯著好于模型組(5.92

5、±1.20)，且與對(duì)照組(9.18±0.63)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。放射配基結(jié)合分析單點(diǎn)法測(cè)定注射側(cè)腦內(nèi)M膽堿受體密度，對(duì)照組(1090±108 fmol/mg Pro)，模型組(925±58 fmol/mg Pro)，梓醇組(1121±86 fmol/mg Pro)。對(duì)照組和梓醇組M受體密度均顯著高于模型組，且兩者之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。M受體密度與迷宮實(shí)驗(yàn)中動(dòng)物學(xué)習(xí)記憶能力顯著相關(guān)(r=0.58，P<0.01)。放射酶學(xué)法測(cè)定腦內(nèi)ChAT活性，梓

6、醇組(18.38±3.65 nmol/h/mg Pro)，顯著高于模型組（14.80±2.46 nmol/h/mg Pro），且與對(duì)照組（18.23±3.14 nmol/h/mg Pro）無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。ELISA法測(cè)定腦內(nèi)BDNF含量結(jié)果顯示，與模型組（0.733±0.221 pg/ug Pro）相比，梓醇組BDNF含量顯著提高（0.849±0.208pg/ug Pro），且和對(duì)照組（0.832±0.216 pg/ug Pro）無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)