外源性孕酮和人絨毛膜促性腺激素對(duì)小鼠子宮巨噬細(xì)胞的影響.pdf

1、目的：通過研究外源性孕酮、人絨毛膜促性腺激素(hCG)這兩種生殖激素對(duì)正常非孕小鼠和妊早期(D4、D5、D6、D7)小鼠子宮巨噬細(xì)胞的影響，以探討二者與母胎免疫耐受之間的關(guān)系及其免疫抑制作用。 方法：(1)正常非孕小鼠隨機(jī)分為對(duì)照組P-D和三個(gè)實(shí)驗(yàn)組P-SD、P-SZ、P-SG，實(shí)驗(yàn)組分別皮下注射0.4mg、2mg、4mg的孕酮，對(duì)照組用等體積芝麻油處理，連續(xù)注射五天。(2)取動(dòng)情雌鼠與雄鼠1：1合籠過夜，次日清晨檢出陰栓者作為

2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物并定為孕0d，分別于孕4d、5d、6d、7d將小鼠隨機(jī)分為對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組，分別標(biāo)記為：P-D(4/5/6/7)-D和P-D(4/5/6/7)-S。實(shí)驗(yàn)組皮下注射4mg的孕酮，對(duì)照組用等體積芝麻油處理。(3)正常非孕小鼠隨機(jī)分為對(duì)照組h-D和三個(gè)實(shí)驗(yàn)組h-SD、h-SZ、h-SG，實(shí)驗(yàn)組分別腹腔注射1IU、5IU、25IU的hCG，對(duì)照組用等體積生理鹽水處理，連續(xù)注射五天。(4)取動(dòng)情雌鼠與雄鼠1：1合籠過夜，次日清晨檢出陰栓者作

3、為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物并定為孕0d，分別于孕4d、5d、6d、7d將小鼠隨機(jī)分為對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組，分別標(biāo)記為：h-D(4/5/6/7)-D和h-D(4/5/6/7)-S。實(shí)驗(yàn)組腹腔注射1IU的hCG，對(duì)照組用等體積生理鹽水處理。以上實(shí)驗(yàn)均于末次注射后6小時(shí)取子宮，冰凍切片，通過非特異性酯酶(a-NAE)染色和免疫組化(CD14、CD204)檢測(cè)子宮巨噬細(xì)胞的變化。 結(jié)果：(1)與對(duì)照組P-D相比，實(shí)驗(yàn)組P-SD、P-SZ、P-SG的小鼠子宮內(nèi)

4、膜、肌層、外膜上的a-NAE+和CD14+巨噬細(xì)胞數(shù)量均極顯著性減少(P<0.01)，其效應(yīng)與濃度呈正相關(guān)。未檢測(cè)到CD204+巨噬細(xì)胞。(2)妊娠4d：與對(duì)照組P-D4-D相比，實(shí)驗(yàn)組P-D4-S小鼠子宮環(huán)肌外層和環(huán)肌內(nèi)層及功能層的a-NAE+、CD14+和CD204+巨噬細(xì)胞均顯著增多(P<0.01)；妊娠5d：與對(duì)照組P-D5-D相比，實(shí)驗(yàn)組P-D5-S小鼠子宮環(huán)肌外層和環(huán)肌內(nèi)層的a-NAE+、CD14+和CD204+巨噬細(xì)胞均顯

5、著增多(P<0.01)，功能層a-NAE+和CD14+巨噬細(xì)胞無顯著變化，但CD204+巨噬細(xì)胞顯著增多(P<0.01)；妊娠6d和7d：與對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組小鼠子宮a-NAE+、CD14-和CD204+巨噬細(xì)胞均無顯著變化。(3)與對(duì)照組h-D相比，低濃度組和高濃度組子宮三個(gè)部位的a-NAE+和CD14-巨噬細(xì)胞均極顯著減少(P<0.01)：中濃度組的肌層和外膜a-NAE+和CD14+巨噬細(xì)胞也極顯著減少(P<0.01)，內(nèi)膜a-NA

6、E+和CD14+巨噬細(xì)胞卻比對(duì)照組顯著增加(P<0.01)。其中低濃度組子宮絕對(duì)數(shù)目和相對(duì)數(shù)目都最少。未檢測(cè)到CD204+巨噬細(xì)胞。(4)妊娠4d、5d、6d：與對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組小鼠子宮環(huán)肌外層和環(huán)肌內(nèi)層的a-NAE+、CD14+和CD204+巨噬細(xì)胞均顯著減少(P<0.01)，功能層細(xì)胞無顯著變化；妊娠7d：與對(duì)照組h-D7-D相比，實(shí)驗(yàn)組h-D7-S小鼠子宮巨噬細(xì)胞三個(gè)部位的a-NAE+、CD14+和CD204+巨噬細(xì)胞均無顯著變

7、化。 結(jié)論：(1)外源性孕酮可以抑制正常非孕小鼠子宮巨噬細(xì)胞向內(nèi)膜的遷移和活化，其效應(yīng)在一定范圍內(nèi)與劑量呈正相關(guān)。高劑量的外源性孕酮在妊娠不同時(shí)期不發(fā)揮效應(yīng)或促進(jìn)子宮巨噬細(xì)胞的活化，這可能與妊娠期子宮內(nèi)高水平的孕酮環(huán)境有關(guān)。(2)外源性人絨毛膜促性腺激素可以抑制正常非孕小鼠子宮巨噬細(xì)胞向內(nèi)膜的遷移和活化，其作用效應(yīng)與劑量不呈直線關(guān)系，可能是通過性激素這一途徑實(shí)現(xiàn)的。低劑量的人絨毛膜促性腺激素在妊早期一定程度上可抑制巨噬細(xì)胞向內(nèi)膜