血清-卵泡液人絨毛膜促性腺激素和白細(xì)胞介素-8水平與體外受精結(jié)局的關(guān)系.pdf

1、背景：
　　 目前全球不孕夫婦比例正逐年上升，常規(guī)體外受精-胚胎移植(IVF-ET)是治療不孕癥的常用手段。近年來隨著輔助生殖技術(shù)(ART)水平的明顯提高，IVF-ET治療周期臨床妊娠率已可達(dá)40％～60％，但總有部分患者經(jīng)多次治療仍不能獲得妊娠。約20％～30％的卵母細(xì)胞質(zhì)量差、受精率低及胚胎分裂不良是主要原因之一。卵泡液為卵母細(xì)胞的發(fā)育提供了非常重要的微環(huán)境。卵泡液微環(huán)境中的激素和相關(guān)細(xì)胞因子可能對(duì)決定卵母細(xì)胞的質(zhì)量和激發(fā)潛

2、在的受精和胚胎分裂起到重要的調(diào)節(jié)作用。
　　 人絨毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin，hCG)屬于糖蛋白激素家族中的一員，與黃體生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)、和促甲狀腺激素(TSH)有著相同的典型異二聚體結(jié)構(gòu)。這些激素的α亞單位相同，而β亞單位明顯不同，β亞單位決定了激素特異抗原性及其生理功能。hCG和LH的β亞單位有85％的氨基酸序列是相同的，他們的主要不同在于N-連接寡糖和羧基末

3、端序列。hCGβ亞單位上羧基末端的28-32個(gè)氨基酸使得hCG比LH有相對(duì)較長(zhǎng)的半衰期。在IVF-ET的控制性超排卵(COH)過程中hCG常被用來模擬內(nèi)源性黃體生成素(LH)蜂，以觸發(fā)卵母細(xì)胞的最后成熟。目前在拮抗劑和激動(dòng)劑周期中，hCG是促發(fā)卵泡的最后成熟最可靠的途徑。
　　 細(xì)胞因子已經(jīng)證實(shí)調(diào)控卵巢周期性過程，包括促進(jìn)卵巢卵泡生長(zhǎng)、白細(xì)胞浸潤(rùn)、激活排卵、黃體化和黃體溶解過程中的組織重塑。一些細(xì)胞因子如白介素-1(IL-1)、

4、IL-2、IL-6、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、干擾素-γ(IFN-γ)、和粒-巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSFs)已經(jīng)顯示在排卵過程中起重要作用。人類研究中已經(jīng)顯示卵泡液執(zhí)行噬中性粒細(xì)胞趨化活性，且活性的水平與IVF治療結(jié)局相關(guān)。白細(xì)胞介素-8(Intedeukin-8，IL-8)是一種血管源性的促炎癥反應(yīng)的生長(zhǎng)促進(jìn)細(xì)胞因子，被認(rèn)為生長(zhǎng)卵泡排卵和黃體溶解的炎癥性事件中起重要作用。
　　 目的：
　　 本研究集中于

5、IVF/ICSI患者血清和卵泡液hCG及IL-8水平與卵巢卵母細(xì)胞受精、卵裂和妊娠結(jié)局的關(guān)系，探討其是否可能成為IVF/ICSI結(jié)局有用的預(yù)測(cè)因子。
　　 材料與方法：
　　 選擇2010年5月～2011年8月在我院生殖中心進(jìn)行IVF和卵胞漿內(nèi)單精子注射(ICSI)治療的70例(其中IVF35例，ICSI35例)患者作為研究對(duì)象。卵巢刺激采用長(zhǎng)方案(61例)或短方案(9例)，當(dāng)主卵泡平均直徑≥18mm(或2個(gè)卵泡直徑≥1

6、7mm，3個(gè)卵泡直徑≥16mm)時(shí)，采用重組人絨毛膜促性腺激素(r-hCG，商品名艾澤，Ovidrel，瑞士默克雪蘭諾公司)250ug皮下注射誘導(dǎo)排卵。收集患者取卵前半小時(shí)血清標(biāo)本和取卵時(shí)的卵泡液標(biāo)本，采用化學(xué)發(fā)光法測(cè)定卵泡液及血清hCG水平，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(enzyme-linkedimmunosorbentassay，ELISA法)測(cè)定卵泡液及血清中的IL-8水平，實(shí)驗(yàn)室標(biāo)記追蹤卵泡液對(duì)應(yīng)該卵母細(xì)胞的成熟度(ICSI組)、受精和胚

7、胎分裂情況，比較血清和卵泡液hCG及IL-8的水平與卵母細(xì)胞發(fā)育、受精、優(yōu)質(zhì)胚胎情況和妊娠結(jié)局的關(guān)系。數(shù)據(jù)分析采用SPSS13.0軟件包進(jìn)行處理，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(X±S)表示，呈正態(tài)分布的計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)，非正態(tài)計(jì)量資料采用Mann-WhitneyU非參數(shù)檢驗(yàn)；相關(guān)性分析采用Spearman等級(jí)相關(guān)分析法。以P<0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果：
　　 1.70例患者卵泡液hCG水平16.1～206(46.

8、98±30.76)IU/L，血清hCG水平43.8～258.2(95.65±35.67)IU/L，血清hCG水平顯著高于卵泡液hCG水平(P<0.01)。卵泡液IL-8水平30.59～539.34(165.60±115.01)pg/ml，血清IL-8水平3.97～1071.91(153.81±242.43)pg/ml，卵泡液中IL-8濃度高于血清IL-8水平，有顯著性差異(P<0.01)。
　　 2.受精卵對(duì)應(yīng)的卵泡液hCG水平

9、(50.8±33.0IU/L)明顯高于未受精組(34.1±16.5IU/L)(P<0.05)。受精卵對(duì)應(yīng)的血清hCG水平(98.5±39.0IU/L)高于未受精組(86.2±19.2IU/L)，但兩者無顯著性差異(P>0.05)。受精卵對(duì)應(yīng)的卵泡液IL-8水平和血清IL-8水平與未受精者相比無顯著性差異(P>0.05)。
　　 3.卵泡液和血清hCG水平在優(yōu)質(zhì)胚胎組(Ⅰ級(jí)和Ⅱ級(jí)胚胎)和非優(yōu)質(zhì)胚胎組(Ⅲ級(jí)和Ⅳ級(jí)胚胎)相比無顯著性差

10、異(P>0.05)。
　　 4.20例患者中有6例取消本周期移植，64例行宮腔內(nèi)胚胎移植，64例患者隨訪有37例獲得臨床妊娠，27例未獲妊娠，移植周期妊娠率57.8％，本研究提示妊娠組卵泡液hCG水平(54.2±36.8IU/L)高于未妊娠組(37.5±17.8IU/L)，且有顯著性差異(P<0.05).妊娠組血清hCG水平(102.0±40.9IU/L)高于未妊娠組(87.4±25.3IU/L)，但兩者無顯著性差異(P>0.0

11、5)。兩組間卵泡液IL-8水平和血清IL-8水平均顯示無顯著性差異(P>0.05)。研究也提示妊娠組的BMI(21.2±2.6kg/m2)較未妊娠組BMI(22.9±3.2kg/m2)低，有顯著性差異(P<0.05)。
　　 5.非超重組血清hCG水平(103.2±36.9IU/L)顯著高于和超重組(72.0±16.6IU/L)，有極顯著性差異(P<0.01)，非超重組卵泡液hCG水平(52.0±33.1IU/L)顯著高于超重組

12、(31.4±13.0IU/L)，有極顯著性差異(P<0.01)。IL-8水平在超重組和非超重組之間無顯著性差異(P<0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 (1)IL-8在所有IVF/ICSI息者的卵泡液中存在，但是血清和卵泡液IL-8水平與卵母細(xì)胞受精、胚胎發(fā)育和妊娠結(jié)局無關(guān)。
　　 (2)卵泡液的hCG濃度低于血清濃度，卵泡液hCG水平與卵母細(xì)胞的成熟和受精能力、妊娠結(jié)局有關(guān)。提示卵泡液hCG可能具有預(yù)測(cè)IVF/I