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文檔簡介
1、目的:通過構(gòu)建慢性疲勞綜合征(CFS)小鼠模型,研究運(yùn)動量對CFS小鼠免疫功能的影響,為臨床上CFS運(yùn)動處方的研究提供免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
方法:取40只雄性昆明小鼠,隨機(jī)分為4組,每組10只。Ⅰ組為正常對照組,Ⅱ組為CFS對照組,Ⅲ組為CFS運(yùn)動1組,Ⅳ組為CFS運(yùn)動2組。讓Ⅱ組、Ⅲ組與Ⅳ組小鼠在每天同一時間進(jìn)行6min的力竭性游泳,持續(xù)3周,觀察小鼠一般情況,構(gòu)建CFS小鼠模型。然后,分別讓Ⅲ組與Ⅳ組小鼠每天進(jìn)行1次或2次恢復(fù)
2、運(yùn)動,持續(xù)2周后,比較體重、力竭游泳時間以及懸掛靜止時間。小鼠摘眼球放血,分離血清,-70℃保存?zhèn)溆谩ni椎脫臼處死小鼠,無菌操作取脾臟稱重,計(jì)算脾臟指數(shù);利用噻唑藍(lán)(MTT)法檢測小鼠脾NK細(xì)胞活性和淋巴細(xì)胞刺激指數(shù)(SI);通過形態(tài)學(xué)檢測法計(jì)算淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率;利用微量聚乙二醇(PEG)半定量法檢測血清循環(huán)免疫復(fù)合物(CIC); ELISA檢測脾細(xì)胞經(jīng)誘生后分泌的IL-2和IFN-γ量;RT-PCR檢測脾細(xì)胞中TNF-α水平。利用統(tǒng)計(jì)軟
3、件SPSS13.0對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析處理,P<0.05代表差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
結(jié)果:
(1)小鼠體重分別比較Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅲ組、Ⅳ組的造模前、造模后、治療后體重,差異無顯著性(P>0.05)。
(2)小鼠行為學(xué)指標(biāo)計(jì)算治療后各組力竭時間與懸掛靜止時間,Ⅱ組、Ⅲ組、Ⅳ組的力竭時間與懸掛靜止時間明顯長于Ⅰ組(P<0.05);Ⅲ組、Ⅳ組力竭時間短于Ⅱ組(P<0.05),且Ⅳ組懸掛靜止時間短于Ⅱ組(P<0.05)。
4、> (3)小鼠脾臟指數(shù)Ⅱ組、Ⅲ組、Ⅳ組脾臟指數(shù)明顯高于Ⅰ組(P<0.05);Ⅲ組、Ⅳ組脾臟指數(shù)明顯低于Ⅱ組(P<0.05)。
(4)小鼠血清CIC值Ⅱ組和Ⅲ組小鼠血清CIC值明顯高于Ⅰ組(P<0.05);Ⅲ組與Ⅱ組比較差異無顯著性(P>0.05);Ⅳ組血清CIC值明顯低于Ⅱ組(P<0.05)。
(5)小鼠脾臟NK細(xì)胞活性Ⅱ組和Ⅲ組小鼠NK細(xì)胞活性明顯低于Ⅰ組(P<0.05);Ⅲ組小鼠雖高于Ⅱ組,但與Ⅱ組比較差異無顯
5、著性(P>0.05);Ⅳ組NK細(xì)胞活性明顯高于Ⅱ組(P<0.05)。
(6)小鼠淋巴細(xì)胞增殖Ⅱ組小鼠淋巴細(xì)胞的SI明顯低于Ⅰ組(P<0.05);Ⅲ組、Ⅳ組與Ⅱ組比較,有顯著性差異(P<0.05)。Ⅱ組和Ⅲ組淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率明顯低于Ⅰ組(P<0.05);Ⅲ組和Ⅳ組的淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率與Ⅱ組比較,Ⅳ組明顯高于Ⅱ組(P<0.05),但Ⅲ組與Ⅱ組比較差異無顯著性(P>0.05)。
(7)小鼠脾細(xì)胞IL-2與IFN-γ水平Ⅱ組小鼠I
6、L-2和IFN-γ含量明顯低于Ⅰ組(P<0.05);Ⅲ組IL-2含量與Ⅱ組比較差異無顯著性(P>0.05),Ⅲ組IFN-γ含量明顯高于Ⅱ組(P<0.05);Ⅳ組IL-2和IFN-γ含量明顯高于Ⅱ組(P<0.05)。
(8)小鼠TNF-α檢測Ⅱ組、Ⅲ組、Ⅳ組的TNF-α與Ⅰ組比較,Ⅱ組、Ⅲ組條帶亮度明顯比Ⅰ組亮;Ⅲ組、Ⅳ組與Ⅱ組比較,Ⅳ組條帶亮度明顯比Ⅱ組暗,Ⅲ組與Ⅱ組條帶亮度差不多。
結(jié)論:
(1)成功地建
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