OATP1B1基因多態(tài)性與利福平臨床肝毒性的關(guān)聯(lián)研究.pdf

1、背景：
　　利福平是一種常用的一線抗結(jié)核藥物，其肝細(xì)胞毒性較大，在與異煙肼和吡嗪酰胺等藥物聯(lián)合治療抗結(jié)核時(shí)，肝損害發(fā)生率達(dá)40.4％。OATP1B1是肝臟攝取轉(zhuǎn)運(yùn)體中最重要的一種，參與多種內(nèi)源性物質(zhì)及外源性藥物的攝取轉(zhuǎn)運(yùn)。OATP1B1存在遺傳多態(tài)性，具有某些等位基因的OATP1B1的轉(zhuǎn)運(yùn)能力降低，會(huì)對(duì)多種藥物的藥動(dòng)學(xué)及藥效學(xué)過(guò)程產(chǎn)生影響，OATP1B1基因多態(tài)性與藥物的毒副作用及藥物相互作用有關(guān)。利福平作為OATP1B1的特異性

2、底物，主要通過(guò)肝細(xì)胞膜表面OATP1B1轉(zhuǎn)運(yùn)進(jìn)入肝細(xì)胞內(nèi)。有報(bào)道顯示，利福平血藥濃度低，肝毒性大，血藥濃度高，肝毒性小。提示利福平肝毒性可能與OATP1B1介導(dǎo)的肝臟中利福平藥物濃度有密切關(guān)系。已證實(shí)OATP1B1存在基因多態(tài)性，利福平在不同個(gè)體毒性反應(yīng)的差異是否與OATP1B1基因多態(tài)性有相關(guān)性，目前尚無(wú)學(xué)者涉足，值得我們深入探討。
　　目的：
　　選擇連續(xù)多次服用利福平后出現(xiàn)肝損害的結(jié)核病患者和服用同樣劑量利福平未出現(xiàn)肝

3、損害的患者，考察OATP1B1基因多態(tài)性、利福平血藥濃度及肝毒性之間的關(guān)聯(lián)性，從藥物肝臟轉(zhuǎn)運(yùn)體分子學(xué)水平闡明利福平肝毒性的發(fā)生機(jī)制，為指導(dǎo)臨床合理用藥及防治肝毒性提供實(shí)驗(yàn)與科學(xué)依據(jù)。
　　方法：
　　1.收集肺結(jié)核患者一般資料、使用利福平等藥物治療情況及是否出現(xiàn)肝功能損害情況，包括肝功能損害34例及肝功能正常患者56例。所有患者在符合入選與排除標(biāo)準(zhǔn)后，使用利福平合并用藥一致標(biāo)準(zhǔn)治療至少一個(gè)月后，復(fù)查肝功能，同時(shí)采集穩(wěn)態(tài)谷濃度

4、樣本進(jìn)行OATP1B1基因分型和利福平血藥濃度測(cè)定。
　　2.OATP1B1基因分型:1）DNA抽提;2）采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)-限制性片斷長(zhǎng)度多態(tài)性(PCR-RFLP)方法對(duì)OAPT1B1第4外顯子388G>A進(jìn)行基因分型。
　　3.利福平血藥濃度測(cè)定：采用液質(zhì)聯(lián)用法(LC-MS/MS)快速測(cè)定。
　　4.采用SPASS22.0軟件對(duì)OATP1B1388G>A不同基因型與利福平血藥濃度、肝毒性進(jìn)行差異比較及相關(guān)性分析。<

5、br>　　結(jié)果：
　　1.本課題建立的利福平的LC-MS/MS測(cè)定方法具有較高的靈敏度和專屬性，方法學(xué)確證結(jié)果符合生物樣本分析的相關(guān)要求。
　　2.90名受試者OATP1B1388A>G基因位點(diǎn)分型結(jié)果如下：總野生型68例，總突變型22例，總突變率為24.44%。其中肝損害組34名受試者中有3名為突變型雜合子，突變型占肝損害組受試者的8.82%；肝功能正常組56名受試者中有19名為突變型雜合子，突變型占正常組受試者的33.9

6、3%。
　　3.OATP1B1388A>G基因突變型個(gè)體利福平血藥濃度為5.63±4.16 ng/ml，約為野生型個(gè)體的3.43倍；肝功能正常組利福平的血藥濃度為3.82±5.80 ng/ml，相當(dāng)于肝損害組的5.97倍；肝功能正常組OATP1B1388A>G基因突變率為33.93%，為肝損害組基因突變率的3.85倍；野生型患者肝損害發(fā)生率為45.59%，相當(dāng)于突變型患者的3.34倍。
　　結(jié)論：
　　OATP1B13