MCP-1對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞CRL-1730凋亡的影響及機(jī)制初探.pdf

1、目的：研究單核細(xì)胞趨化蛋白-1(MCP-1)對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞株(CRL-1730)凋亡的影響及可能機(jī)制。 方法：1.培養(yǎng)并鑒定人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞株(CRL-1730)。2.用不同濃度單核細(xì)胞趨化蛋白-1(0.1ng/ml，1.0ng/ml，10ng/ml，100ng/ml)對(duì)其作用48h后，用四氮唑鹽(MTT)比色法觀察細(xì)胞存活率；Annexin V-FITC/PI雙染細(xì)胞流式細(xì)胞術(shù)觀察內(nèi)皮細(xì)胞凋亡；Rh123染色流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)

2、線粒體膜電勢(shì)變化；Ca2+熒光指示劑Fura-2/AM作用細(xì)胞，熒光分光光度計(jì)檢測(cè)到細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度變化；分光光度法檢測(cè)細(xì)胞中Caspase-9的激活變化，以探討MCP-1誘導(dǎo)hUVECs凋亡的可能機(jī)制。 結(jié)果：1.建立了人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞株(CRL-1730)的培養(yǎng)方法，經(jīng)免疫熒光vWF抗體鑒定為內(nèi)皮細(xì)胞。2.單核細(xì)胞趨化蛋白-1能誘導(dǎo)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞株(CRL-1730)凋亡，MTT比色法顯示細(xì)胞存活率降低，Annexi