喉鱗狀細(xì)胞癌中mir-93、mir-106b表達(dá)與wnt-β-catenin通路靶蛋白研究.pdf

1、[目的]
　　 喉鱗狀細(xì)胞癌是頭頸部常見的惡性腫瘤之一。近年來MicroRNA分子在癌癥早期診斷，腫瘤發(fā)生，疾病預(yù)測等各個方面，成為新的研究熱點(diǎn)。但MicroRNA在喉鱗狀細(xì)胞癌的研究較少，僅檢測其表達(dá)情況。本研究從基因芯片篩選的喉鱗狀細(xì)胞癌組織與癌旁切緣中差異性microRNA表達(dá)譜中挑選出高表達(dá)的mir-106b、mir-93，在石蠟樣本中進(jìn)行q-PCR驗(yàn)證，同時檢測其可能參與的wnt/β-catenin通路中關(guān)鍵蛋白分子M

2、UC1、β-catenin、cyclinD1的表達(dá)情況，結(jié)合病理資料探討與喉鱗癌發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制以及成為喉鱗癌分子治療候選靶點(diǎn)奠定基礎(chǔ)。
　　 [方法]
　　 1、利用looped-primerReal-timePCR在喉鱗狀細(xì)胞癌石蠟包埋組織檢測mir-93、mir-106b的表達(dá)情況，并結(jié)合臨床病理參數(shù)進(jìn)行分析；
　　 2、結(jié)合國內(nèi)外文獻(xiàn)并綜合應(yīng)用專業(yè)數(shù)據(jù)庫miRBase、TargetScan、在線軟件(h

3、ttp://cloud.genomics.org.cn/home.xhtml)等預(yù)測相應(yīng)的靶基因；
　　 3、應(yīng)用MaxVision免疫組織化學(xué)方法，檢測wnt/β-catenin通路中關(guān)鍵蛋白分子MUC1、β-catenin、cyclinD1在喉鱗狀細(xì)胞癌與癌旁正常切緣石蠟包埋組織中的表達(dá)，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析三者表達(dá)與各臨床參數(shù)的關(guān)系。
　　 [結(jié)果]
　　 1、喉鱗狀細(xì)胞癌中mir-93、mir-106b的表達(dá)量均

4、高于癌旁正常切緣，差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p=0.017，p=0.019)。
　　 2、預(yù)測到mir-93、mir-106b相應(yīng)的靶基因：MUC1、β-catenin、cyclinD1。
　　 3、x2檢驗(yàn)結(jié)果顯示mir-93、mir-106b在病理分期、臨床分期、腫瘤部位、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移總體具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。進(jìn)一步經(jīng)Spearman秩相關(guān)檢驗(yàn)顯示，mir-106b、mir-93與臨床分期呈正相關(guān)（r=0.467，r=0.380）

5、，mir-106b、mir-93在T3、T4期較T1、T2期差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p=0.000,p=0.002）；二者均與淋巴結(jié)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其中mir-106b、mir-93與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)（r=0.300，P0.442），三者在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p=0.015,p=0.000)。
　　 4、在喉鱗狀細(xì)胞癌中，Mucin1在癌細(xì)胞胞質(zhì)中陽性表達(dá)，陽性表達(dá)率為44.6％，高于癌旁正常切緣組織8.6％(p＜0.001

6、)；β-catenin存在胞質(zhì)與胞核的異位表達(dá)，其異常表達(dá)率為58.5％，而癌旁正常切緣組織中異常表達(dá)僅為2.9％，兩者具有顯著差異(p＜0.001)；cyclinD1存在胞核的陽性表達(dá)，表達(dá)率為78.5％，與癌旁正常切緣組織中具有顯著差異(p＜0.001)；MUCI與β-catenin的陽性表達(dá)呈正相關(guān)（r=0.361，p=0.013），β-catenin和cyclinD1呈正相關(guān)(r=0.210，p=0.003)。
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7、、經(jīng)x2檢驗(yàn)結(jié)果顯示，MUC1陽性表達(dá)率在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的陽性率為21.1％、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽性率為54.3％，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.014）。β-catenin異常表達(dá)率在病理分期低、中、高分化分別為30.0％、72.7％、50.0％，三者的總體差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=0.024），進(jìn)一步對三者進(jìn)行兩兩比較，結(jié)果顯示中分化的異常表達(dá)率與低、高相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.034）；β-catenin異常表達(dá)率在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的陽性率為

8、36.8％、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽性率為67.4％，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.023）。cyclinD1陽性表達(dá)率在病理分期低、中、高分化分別為70.0％、90.9％、63.6％，三者的總體差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.035）。cyclinD1陽性表達(dá)率在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的陽性率為57.9％、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽性率為87.0％，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.024）。而MUC1陽性率、β-catenin異常表達(dá)率、cyclinD1陽性表達(dá)率在年齡、臨床分