胡蘆巴化學成分含量測定及對酒精性脂肪肝大鼠的作用.pdf

1、目的：對不同胡蘆巴提取物中胡蘆巴堿、薯蕷皂苷元進行含量測定，建立高效液相法測定胡蘆巴提取物中薯蕷皂苷元含量的方法；研究不同胡蘆巴提取物對DPPH及羥基自由基(·OH)的清除效果；觀察胡蘆巴乙醇提取物對大鼠酒精性脂肪肝(AFL)的治療作用，并初步探討其作用機制。
　　方法：采用藥典方法測定各提取物中的胡蘆巴堿；薯蕷皂苷元的含量測定：色譜柱為大連伊力特Hypersil ODS-1(4.6×250mm，5μm)，流動相為甲醇：水(86:

2、14，v/v)，流速1.0ml/min，檢測波長203nm，柱溫35℃；紫外法測定體外抗氧化作用；采用高脂飼料喂養(yǎng)和酒精灌胃結(jié)合的方法建立SD大鼠AFL模型，病理檢查結(jié)果顯示造模成功后，用生理鹽水做空白對照，水飛薊賓膠囊和胡蘆巴總皂苷（TFGs）做陽性對照，給予胡蘆巴乙醇提取物。給藥四周后處死大鼠，制備血清、肝勻漿，取肝組織做病理檢查。測定并比較各組間血清甘油三醋(TG)、總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LD

3、L-C)、總膽紅素(TBili)；比較各組間天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ATL)；比較各組間肝臟脂質(zhì)含量；酶聯(lián)免疫(ELISA)法測定并比較各組間超氧化物歧化酶（SOD）、腫瘤壞死因子(TNF-α）、脂聯(lián)素(adiponectin)及磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）水平；計算并比較各組肝指數(shù)。
　　結(jié)果：薯蕷皂苷元的色譜峰面積與濃度呈良好的線性關(guān)系，線性范圍為43.2μg/ml~864μg/ml（r=0.9

4、995），平均回收率（n=9）為100.3％；胡蘆巴各提取物對DPPH和羥基自由基(·OH)有明顯的清除效果；胡蘆巴乙醇提取物能顯著改善AFL大鼠肝細胞脂肪變性，顯著降低AFL大鼠血清TG、TC、LDL-C(P<0.01)水平，胡蘆巴乙醇提取物能顯著降低AFL大鼠AST(中劑量P<0.01)、ALT(小劑量P<0.05，中、大劑量P<0.01)水平，胡蘆巴乙醇提取物能顯著降低AFL大鼠肝臟中TC、TG含量(P<0.01)，胡蘆巴乙醇提取

5、物能降低肝指數(shù)(P<0.05)，TFGe能顯著降低AFL大鼠血清TNF-α水平(P<0.01)，升高血清adiponcetin(P<0.01)、SOD(大劑量組P<0.01)、AMPK水平(大劑量組P<0.01)。
　　結(jié)論：采用HPLC法測定胡蘆巴提取物中薯蕷皂苷元的含量，該方法準確可靠、重現(xiàn)性好，可用于含量測定；胡蘆巴各提取物具有清除DPPH和羥基自由基的作用；胡蘆巴乙醇提取物能明顯改善AFL大鼠肝臟腫大狀況，改善肝組織脂肪變